Stuhlprobe in der molekularen Biologieforschung:
- Dienstprogramm und Anwendungen:
- Stuhlproben werden zunehmend in der tierischen molekularen Genetik verwendet, Bevölkerungsökologie, Verhaltensökologie, und Diagnose von Darmkrankheiten.
- Sie enthalten Darm -mikrobielle DNA, DNA mit Lebensmittelrückstand, und Verdauungstrakte peelte Zell -DNA.
- Herausforderungen:
- Niedriger Gehalt an Peeling -Zellen im Verdauungstrakt und Abbau von genetischen Material stellen primäre Herausforderungen dar.
- Vorhandensein von Inhibitoren wie Polysacchariden, Gallensäuren, Gallensalze, Gallenpigmente, Verdauungssäfte, und Schleim kann sich auswirken PCR-basierende molekulare Analyse.
Bedeutung der DNA -Extraktion:
Kritische Rolle:
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- Die Auswahl geeigneter Extraktionsmethoden ist entscheidend, um eine qualitativ hochwertige DNA zu erhalten und einen erfolgreichen nachgeschalteten Nachweis von Stuhl-DNA zu gewährleisten.
Hüfthocker -DNA -Kit:
- Lösung bereitgestellt:
- Das Hipure Stool -DNA -Kit von Magen Company bietet eine vielversprechende Lösung.
- Zeigt eine gute Universalität, hohe Kosteneffizienz, hoher Ausbeute, und Reinigung.
- Einzigartige Funktionen:
- Verwendet ein einzigartiges Lösungssystem und ein inhibitorischer Faktor -Adsorbens, um verschiedene Verunreinigungen in Stuhlproben effizient zu entfernen.
- Die gereinigte DNA kann direkt für PCR verwendet werden, Quantitative PCR, und andere Anwendungen.
- Effizienz und Benutzerfreundlichkeit:
- Ermöglicht eine schnelle und zuverlässige Isolierung hochwertiger genomischer DNA aus verschiedenen Stuhlproben.
- In der Lage, zu verarbeiten bis zu 100 mg Stuhlproben innerhalb 60 Protokoll.
- Kombiniert reversible Nukleinsäure -Bindungseigenschaften mit Spin-Säule Technologie, Eliminierung der PCR -Hemmung von Verbindungen.
- Geeignet für PCR, Restriktionsverdauung, und Sequenzierungsanwendungen der nächsten Generation.
- Nachhaltigkeit und Skalierbarkeit:
- Eliminiert den Bedarf an organischen Extraktionen, Reduzierung von Plastikabfällen und praktischer Zeit.
- Ermöglicht es, mehrere Proben parallel verarbeitet zu werden, Verbesserung der Effizienz.
Einzelheiten
Spezifikationen
Merkmale | Spezifikationen |
Hauptfunktionen | Isolation Gesamt-DNA aus 50-100 mg Stuhlproben |
Anwendungen | PCR, Southern Blot, Enzymverdauung und NGs, usw. |
Reinigungsmethode | Mini-Spin-Säule |
Reinigungstechnologie | Silica-Technologie |
Prozessmethode | Handbuch (Zentrifugation oder Vakuum) |
Beispielstyp | Hocker |
Probenmenge | 50-100mg |
Ertrag | 3-15μg |
Elutionsvolumen | ≥30 μl |
Zeit pro Lauf | ≤ 60 Minuten |
Flüssigkeitstransportvolumen pro Säule | 750μl |
Bindungsausbeute der Säule | 100μg |
Prinzip
Stuhl -DNA -Extraktionsprozess:
- Homogenisierung und Lyse:
- Die Stuhlprobe wird homogenisiert und in einem speziell formulierten Puffer behandelt, der Reinigungsmittel enthält.
- Dieser Schritt lyses Bakterien effektiv lyses, Hefe, und im Stuhl vorhandene Pilzproben.
- Verunreinigungsentfernung:
- Unsere proprietäre Absorberlösung wird verwendet, um Huminsäure zu entfernen, Proteine, Polysaccharide, und andere Verunreinigungen aus der lysierten Probe.
- Bindung und Waschen:
- Die angepassten Bindungsbedingungen erleichtern die Bindung von DNA an eine DNA -Mini -Säule.
- Es werden zwei schnelle Waschschritte durchgeführt, um Spurenverschmutzungen zu entfernen, Gewährleistung der Reinheit der DNA.
- Elution der gereinigten DNA:
- Reine DNA wird aus der Säule in einem niedrigen Ionenstärkepuffer eluiert.
- Die resultierende gereinigte DNA ist für die direkte Verwendung in nachgeschalteten Anwendungen bereit, ohne dass eine weitere Reinigung erforderlich ist.
Vorteile
- Hohe Reinheit – Einzigartige Adsorbens können inhibitorische Faktoren vollständig entfernen
- Hohe Konzentration – Maximale Extraktion der Gesamt -DNA aus Stuhlproben
- Hohe Genesung – DNA kann auf der Ebene von PG wiederhergestellt werden
- Gute Wiederholbarkeit – Die Silica -Technologie kann jedes Mal ideale Ergebnisse erzielen
Inhalt des Kits
Inhalt | D314102 | D314103 |
Reinigungszeiten | 50 Vorbereitungen | 250 Vorbereitungen |
Hipure -DNA -Mini -Säulen II | 50 | 250 |
2ml-Sammelröhrchen | 50 | 250 |
2ML Perlenröhrchen | 50 | 250 |
Proteinase K | 24 mg | 120 mg |
Protease-Auflösungspuffer | 1.8 ml | 10 ml |
Puffer spl | 40 ml | 200 ml |
Puffer PCI | 40 ml | 200 ml |
Puffer AL | 20 ml | 80 ml |
Puffer GW1 | 22 ml | 88 ml |
Puffer GW2 | 20 ml | 2 X 50 ml |
Puffer AE | 15 ml | 30 ml |
Lagerung und Stabilität
Speicheranweisungen:
- Proteinase K und Puffer PCI:
- Bei der Ankunft, Lagern Sie bei 2-8 ° C..
- Kurzfristige Lagerung (bis zu 12 Wochen) bei Raumtemperatur (15-25°C) hat keinen Einfluss auf ihre Leistung.
- Verbleibende Kit -Komponenten:
- Bei Raumtemperatur aufbewahren (15-25°C).
- Stabil für zumindest 18 Monate unter diesen Bedingungen.
- Ganzes Kit:
- Kann bei 2–8 ° C gelagert werden.
- Puffer sollten vor dem Gebrauch wieder aufgelöst werden, wenn sie bei dieser Temperatur gespeichert werden.
- Stellen Sie sicher, dass alle Puffer bei der Verwendung bei Raumtemperatur stehen.
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