Solarbio 精子白血球過氧化物酶染色試劑盒(正甲苯胺法)

產品資訊

• 產品代碼: G3410
• 規格: 20時間
• 貯存: 存儲在2-8°C, 保存期限為 6 月.

產品內容:

產品描述:

大多數精液都包含白細胞, 主要是多形核白細胞 (PMN, 中性粒細胞). 有時, 可以使用Papanicolaou染色方法將白細胞與精液中的精子細胞和精子細胞區分開. 區分白細胞主要取決於染色的差異, 尺寸, 和核的形態. 多形核白細胞在形態上與多核精子細胞相似, 但是多形核白細胞染色淺藍色，而精子細胞染色紅色. 細胞核的大小也有助於分化: 單核白細胞核的大小廣泛波動, 從淋巴細胞的約7μm到巨噬細胞的15μm不等. 精液中的白血細胞數量也可以使用其他技術進行量化.

過氧化物酶染色的原理用於精液白細胞 (正苯二烷方法) 是精液中的白細胞的主要類型是過氧化物酶陽性粒細胞, 可以使用過氧化物酶染色篩選. 這種方法很快, 便宜, 對於初始篩查粒細胞的實用性. 儘管該技術具有相對易於操作的優勢, 它無法檢測到以下內容: ①已經激活並釋放顆粒的多形核白細胞; ②其他不含過氧化物酶的白色血細胞類型, 例如淋巴細胞, 巨噬細胞, 和單核細胞. 該產品可用於區分不含過氧化物酶的多核精子細胞的多形核白細胞。.

操作步驟 (僅供參考):

1. 準備正苯二苯胺工作解決方案: 加入1毫升飽和氯化銨溶液, 1EDTA解決方案的ML, 和10μl氧化劑至9ml底物溶液, 攪拌均勻, 並在內部使用 24 準備小時.
2. 徹底混合精液樣品, 將0.1毫升精液與0.9毫升的工作溶液混合.
3. 渦旋的精子懸浮液 10 秒，讓它站在室溫下 20-30 分分鐘. 或者, 使用管搖桿進行連續攪動.
4. 後 20-30 分分鐘, 再次將精子懸浮液混合，然後將樣品填充到血細胞儀兩側的計數池中.
5. 至少在室溫下水平將血細胞計放在潮濕的室中 4 分鐘以允許細胞沉降.
6. 使用 200 或400倍對比度顯微鏡，以觀察和計數 200 過氧化物酶陽性細胞.

規格:

• 試劑 (A): 飽和氯化銨溶液2ML, 存儲在2-8°C.
• 試劑 (乙): EDTA溶液2ML, 存儲在2-8°C.
• 試劑 (C): 正苯二烷底物溶液20ml, 儲存於2-8°C, 避光.
• 試劑 (D): 氧化劑1ml, 存儲在2-8°C.

染色結果:

過氧化物酶陽性細胞被染色, 雖然過氧化物酶陰性細胞保持未染色.

預防措施:

1. 在使用前準備正托氨二烷的工作解決方案，並在準備後不長時間存儲.
2. 如果染色室的環境溫度較低, 使用孵化器或水浴完成染色過程.
3. 檢查計數池時, 至少繼續計數 200 每個網格的過氧化物酶陽性細胞直到計數完整的網格; 不要停止在網格中間計數.
4. 為了您的安全與健康, 在操作過程中佩戴實驗室外套和一次性手套.
5. 該產品僅用於研究目的，不應用於臨床診斷或其他目的.