Solarbio核酮糖 1 5-二磷酸羧化酶/加氧酶 (盧比斯科) 檢測試劑盒

$474.00

運費美元 45 - 超過美元免費 300

DTE是一家專門從事分子檢測線上銷售的中國電子商務平台, 酵素連結免疫吸附試驗, 及相關產品.

  • 製造商: 中國領導品牌
  • 船運: 直接從工廠加急聯邦快遞發貨
  • 符合退貨或換貨條件 30 天
  • 支付方式: 安全的 PayPal 或信用卡.

描述

筆記: 測試前取兩個或三個不同的樣本進行預測.

操作設備: 分光光度計

目錄號: BC0440

尺寸:50T/48S

成分:

試劑 規格 儲存條件 使用前準備
提取解決方案 50 毫升× 1 4℃
試劑一 50 毫升× 1 4℃
試劑二 粉末× 1 -20℃
試劑三 粉末× 2 -20℃ 溶解 1 使用前的毫升蒸餾水; 如果振盪後出現濁度, 使用前離心.
試劑四 粉末× 1 -20℃ 溶解 2 使用前的毫升蒸餾水.
工作解決方案 使用前將所有試劑I添加到II之前, 充分混合, 並孵化25℃ 5 分分鐘.
產品描述:
  • 核糖1,5-雙磷酸羧化酶/氧酶 (盧比斯科) 是植物光合作用的關鍵酶.
  • 它控制二氧化碳固定並調節碳流入加爾文週期和光震動週期.
  • Rubisco的活動直接影響光合率.
  • Rubisco催化核糖1,5-磷酸鹽的組合 (摩擦) 和二氧化碳生產3-磷酸甘油酯 (PGA).
  • PGA進一步轉化為3-磷酸甘油醛, 伴隨著NADH氧化形成NAD+.
  • NADH吸收光 340 奈米, 而nad+沒有.
  • 在這個套件中, Rubisco活動是通過測量NADH吸光度下降來確定的 340 奈米.

需要但未提供的試劑和設備:

紫外分光光度計, 桌上型離心機, 可調式移液器, 水浴, 1 ML石英比色卷, 研缽/均質器, 冰, 蒸餾水.

程式:

樣品製備:

    • 細菌或細胞:
      • 將細菌或細胞收集到離心管中並離心以丟棄上清液.
      • 添加 1 ml提取溶液 5 百萬細菌或細胞.
      • 使用超聲處理 (在冰上, 20% 力量, 3 幾秒鐘, 10 幾秒鐘, 重複 30 次) 裂解細菌或細胞.
      • 離心機在 10000 ×g 為 10 4°C的分鐘分鐘以去除不溶性材料並在冰上收集上清液進行測試.
    • 組織:
      • 添加 1 ml提取溶液 0.1 克組織 (最好是新鮮的植物樣品) 並在冰上勻漿.
      • 離心機在 10000 ×g 為 10 4°C的分鐘以去除不溶材料, 並在冰上收集上清液進行測試.

確定程序:

        • 預熱紫外分光光度計 30 分鐘並將波長調整為 340 奈米. 用蒸餾水使樂器零.
        • 添加以下試劑:
試劑 (微升) 試管 (時間) 空白管 (乙)
樣本 100
蒸餾水 100
試劑三 35 35
試劑四 35 35
工作溶液 900 900

檢測吸光度 340 NM 20年代和5分之20, 分別記錄為A1和A2. ΔA(時間)= A2(時間)-A1(時間), ΔA(乙)= A2(乙)-A1(乙), ΔA=ΔA(時間)-ΔA(乙). 在反應期間保持25℃. 空白管只需要測試一次或兩次.

計算:

蛋白質濃度:

    • 單位定義: 一個單位的酶活性定義為催化產生的酶量 1 每分鐘每分鐘的NMOL蛋白質的NADH每分鐘.
    • 盧比斯科 (U/毫克蛋白質) 計算:
      • 盧比斯科(U/毫克蛋白質) = [ΔA÷ (ε×d) ×10^9×繩索] ÷ (VS×CPR) ÷t
      • 盧比斯科(U/毫克蛋白質) = 344 ×ΔA÷CPR

樣品重量:

    • 單位定義: 一個單位的酶活性定義為催化產生的酶量 1 每克組織的NMOL每分鐘.
    • 盧比斯科 (單位/克重量) 計算:
      • 盧比斯科(單位/克重量) = [ΔA÷ (ε×d) ×10^9×繩索] ÷ (w÷ve×vs) ÷t
      • 盧比斯科(單位/克重量) = 344 ×ΔA÷在

細菌或培養細胞:

    • 單位定義: 一個單位的酶活性定義為催化產生的酶量 1 每分鐘每分鐘的nmol 10,000 細胞或細菌.
    • 盧比斯科 (U/10^4單元格) 計算:
      • 盧比斯科(U/10^4單元格) = [ΔA÷ (ε×d) ×10^9×繩索] ÷ (vs÷VE× 500) ÷t
      • 盧比斯科(U/10^4單元格) = 0.69 ×ΔA

常數和參數:

  • e: NADH摩爾滅絕係數, 6.22 ×10^3 l/mol/cm
  • d: 淺色小路, 1 公分
  • 繩索: 總反應體積, 1.07 ×10^-3 l
  • VS: 上清液體積, 0.1 毫升
  • 維: 提取溶液增加體積, 1 毫升
  • 心肺復甦: 樣品蛋白濃度 (毫克/毫升)
  • 時間: 反應時間, 5 分分鐘
  • 瓦: 樣品重量 (G)
  • 500: 5 百萬個細胞或細菌
  • 10^9: 1 mol = 10^9 nmol

實驗範例:

取0.1克植物葉, 添加 1 ML提取溶液的均質化溶液, 取上清液, 然後按照確定步驟進行操作.

用微石英比色綠色測量併計算

ΔAT= AT1-AT2 = 1.279-1.206 = 0.073, ΔAB= AB1 – AB2 = 0.834-0.823 = 0.011,

ΔA=ΔAT-ΔAB= 0.073-0.011 = 0.062

Rubisco活動 (U/克質量) = 344 ×ΔA÷w = 344×0.062÷0.1 = 213.28 u/g質量.

相關產品:

BC0310/BC0315輔酶I NAD(h) 含量測定試劑盒

BC1030/BC1035 NAD激酶 (納德) 活性測定試劑盒

BC0630/BC0635 NADH氧化酶 (NOX) 活性測定試劑盒

BC1130/BC1135 NAD MALIC酶 (nad-me) 活性測定試劑盒

附加資訊

尺寸

25時間, 50時間

評論 (0)

評論

還沒有評論.

成為第一個評論“Solarbio核酮糖 1 5-二磷酸羧化酶/加氧酶 (盧比斯科) 檢測試劑盒”

您的電子郵件地址不會被公開. 必填的地方已做標記 *


依戀

購物車
捲動到頂部