Solarbio乳酸去氫酶(乳酸脫氫酶) 活性測定試劑盒
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Solarbio乳酸去氫酶 (乳酸脫氫酶) 活性測定試劑盒

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描述

項目編號: BC0685

規格: 100 測試/48條帶

介紹

  • 乳酸脫氫酶 (乳酸脫氫酶) 活性測定試劑盒量化了LDH酶在生物樣品中的活性.
  • LDH對於細胞呼吸至關重要, 將乳酸轉化為丙酮酸.
  • 組織或體液中的LDH水平升高可能表明細胞損傷或病理.
  • 該測定法用於研究和臨床實驗室，用於診斷和實驗目的.

內容

試劑名稱 規格 儲存條件
萃取液 液體 60 毫升× 1 瓶子
試劑一 液體 7 毫升× 1 瓶子
試劑二 粉末 1 小瓶
試劑三 液體 7 毫升× 1 瓶子
試劑四 液體 25 毫升× 1 瓶子
標準解決方案 液體 1 毫升× 1 小瓶
  • 試劑二: 使用前, 添加 1.3 毫升蒸餾水以完全溶解. 一旦準備就緒, 等分的小管，在-20°C下存放到最多 2 週. 避免重複凍融週期.
  • 標準解決方案: 丙酮酸鈉溶液，濃度為 20 微摩爾/毫升.

LDH活性測定套件的關鍵組成部分:

  1. 底物解決方案: 包含酶促反應的必要成分, 通常包括乳酸和NAD^+ (煙酰胺腺嘌呤二核苷酸).
  2. 反應緩衝液: 為酶促反應提供最佳條件.
  3. LDH酶標準: 具有已知濃度LDH活性的參考標準，用於生成標準曲線.
  4. LDH分析試劑: 檢測LDH反應乘積的比色試劑或熒光試劑, 通常導致顏色變化或熒光.

如何使用LDH活動測定套件:

以下是有關如何使用LDH活動測定套件的一般指南. 特定協議在套件之間可能有所不同, 遵循套件製造商提供的說明至關重要:

  1. 樣品製備: 準備您的生物樣品 (例如, 細胞裂解物, 組織勻漿, 或體液) 並在需要時適當地用兼容的緩衝液稀釋它們.
  2. 標準曲線準備: 使用提供的LDH酶標準準備一系列具有已知濃度LDH酶活性的標準標準. 這通常是通過在緩衝區或樣品矩陣中稀釋標準來實現的.
  3. 測定板設置: 將稀釋的樣品和標準添加到微板或比色杯的孔中.
  4. 添加底物溶液: 將底物解決方案添加到每個井或包含樣品和標準的比色綠色. 酶促反應將乳酸轉化為丙酮酸.
  5. 孵: 將反應混合物孵育為特定的時期, 通常在受控溫度下. 酶促反應將發生, 產生納德 (nad^+的降低形式).
  6. 測量: 使用微孔讀取器或熒光計測量適當波長的反應混合物的吸光度或熒光.
  7. 數據分析: 使用標準曲線將吸光度或熒光值轉換為LDH酶活性單元.
  8. 品質管制: 通過確保測定性能落在可接受的範圍內，檢查結果的精度和準確性.

實驗實例:

  1. 稱0.103克的景觀, 添加了1毫升的提取溶液, 在冰浴中勻漿, 離心為8000克, 4°C 為 10 分分鐘, 並帶上上清液進行冰上的測量. 然後, 遵循測定步驟, ΔA被計算為A_TEST管 – A_Control管= 0.275 – 0.199 = 0.076. 使用標準曲線方程y = 0.5218x + 0.0063 (r^2 = 0.9983), 我們獲得了x = 0.134 微摩爾/毫升. 計算乳酸脫氫酶 (L-LDH) 活動: L-LDH (U/克質量) = 66.67 ×x÷w = 86.74 u/g
  2. 重0.109克兔肝, 添加了1毫升的提取溶液, 在冰浴中勻漿, 離心為8000克, 4°C 為 10 分分鐘, 並把上清液稀釋 80 用蒸餾水的時間，將其放在冰上進行測量. 然後, 遵循測定步驟, ΔA被計算為A_TEST管 – A_Control管= 0.795 – 0.132 = 0.663. 使用標準曲線方程y = 0.5218x + 0.0063 (r^2 = 0.9983), 我們獲得了x = 1.259 微摩爾/毫升. 計算乳酸脫氫酶 (L-LDH) 活動: L-LDH (U/克質量) = 66.67 ×x÷w×稀釋因子= 61605.53 u/g
  3. 服用10μl馬血清並遵循測定步驟. 使用96孔板, ΔA被計算為A_TEST管 – A_Control管= 0.415 – 0.161 = 0.254. 使用標準曲線方程y = 0.5218x + 0.0063 (r^2 = 0.9983), 我們獲得了x = 0.475 微摩爾/毫升. 計算乳酸脫氫酶 (L-LDH) 活動: L-LDH (單位/毫升) = 66.67 ×x = 31.67 U/m

附加資訊

重量 0.65 公斤
尺寸

100T/48S
品牌

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