肝醣測定試劑盒
筆記: 測試前取兩個或三個不同的樣本進行預測.
操作設備: 分光光度計/酶標儀
目錄編號: BC0345
尺寸:100T/96S
成分:
萃取試劑: 100毫升×1, 4℃保存.
攝政一世: 粉末×1, 4℃保存。, 添加 1 使用前用 mL 蒸餾水溶解. 用蒸餾水稀釋至 0.1 mg/mL備用葡萄糖溶液, 準備使用. 0.1 mg/mL 葡萄糖標準溶液, 4℃保存.
攝政二世: 粉末×1, 4℃保存.
工作溶液: 倒 6 mL 蒸餾水倒入試劑Ⅱ中，緩慢倒入 24 濃硫酸毫升. 使用前溶解並充分混合. 未使用的試劑的有效期限為 4 °C 1週.
產品描述
肝醣是由葡萄糖單元組成的高分子多醣. 它是糖的主要儲存形式之一. 主要儲存在肝臟和肌肉中作為備用能量, 稱為肝醣原和肌肉肝醣原, 分別. 肝醣可以調節血糖濃度. 當血糖升高時，肝臟可以合成肝醣. 當血糖降低時, 肝醣原分解成葡萄糖來補充血糖. 所以, 肝醣原對於維持血糖的相對平衡很重要. 肌肉肝醣是肌肉中肝醣儲存的一種形式. 當劇烈運動消耗大量血糖時, 肌肉肝醣不能直接分解成血糖. 它必須先被分解產生乳酸, 隨血液循環到肝臟, 並經由肝醣葡萄糖轉化為肝醣原.
判定原則: 蒽酮法. 用強鹼性萃取物萃取肝醣, 肝醣含量以蒽酮法在強酸性條件下測定.
需要但未提供的試劑和設備.
S分光光度計/酶標儀, 桌上型離心機, 移液管, 微型玻璃比色皿/96孔板, 砂漿, 濃硫酸 (硫酸) 和蒸餾水.
程式:
我. 樣品萃取:
- 細胞或細菌: 收集 5-10 將百萬個細菌或細胞放入離心管中, 離心後棄去上清液; 加入0.75mL萃取試劑超音波破碎細菌或細胞 (力量 20% 或200W, 超音波3秒, 10s間隔, 重複 30 次) ); 轉移至 10mL 管中, 放入沸水浴中煮20分鐘 (緊緊關閉以防止水分流失), 每隔一次搖晃管子 5 分鐘充分混合; 取出管子並冷卻, 用蒸餾水吸取至 5mL，並混合. 8000g、25℃離心10分鐘, 取上清液進行檢測.
- 組織: 稱取0.1~0.2g樣品，置於 10 毫升管, 添加 0.75 萃取液毫升數, 在沸水浴中煮沸 20 分分鐘 (緊緊關閉以防止水分流失), 每隔一段時間搖動試管 5 分鐘充分混合. 當所有組織溶解後, 取出管子並冷卻, 然後彌補 5 mL 加蒸餾水. 8000g、25℃離心 10 分分鐘, 取上清液進行檢測.
二. 決心 程式:
- 預熱 s分光光度計/酶標儀 30 分分鐘, 調整波長至 620 奈米, 用蒸餾器調零
- 取樣台 (在 EPtube 中加入以下試劑)
| 攝政(微升) | 毛坯管 (A1) | 標準管 (A2) | 試管 (A3) |
| 樣本 | 60 | ||
| 攝政一世 | 60 | ||
| 蒸餾水 | 60 | ||
| 攝政二世 | 240 | 240 | 240 |
攪拌均勻, 放入沸水浴中 10 分分鐘 (緊緊關閉以防止水分流失), 涼爽的, 並採取 200 µL 注入微量玻璃比色皿/96 孔板中，讀取空白管的吸光度, 標準管, 和測量管在 620 奈米, 並將它們記錄為A1, A2, 和A3. 空白管和標準管只需測試一次.
三、. 計算:
- 樣品重量
山梨醇 (毫克/克鮮重) =(銫×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(寬×V1÷V2)÷1.11
= 0.450×(A3-A1)÷（A2-A1）)÷W
- 蛋白質濃度
山梨醇 (毫克/毫克蛋白質) = (銫×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(V1×心肺復甦) ÷1.11
=0.09×(A3-A1) ÷（A2-A1）) ÷心肺復甦
- 細菌或細胞的數量:
山梨醇（mg/104細胞）= (銫×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(細菌或細胞數×V1÷V2) ÷1.11
= 0.450×(A3-A1)÷（A2-A1）)÷細菌或細胞數量
1.11: 葡萄糖含量換算成肝醣含量是一個常數, 那是, 的顏色 111 μg葡萄糖與蒽酮試劑相當於 100 μg 肝醣與蒽酮試劑.
CS: 標準品濃度, 0.1 毫克/毫升 V1: 樣品量, 0.06 毫升;
V2: 總樣本量, 5 毫升;
心肺復甦: 樣品蛋白濃度, 毫克/毫升; 瓦: 樣品重量, G
細菌或細胞的數量: 104 作為單位, 萬
筆記:
如果 A 大於 1.4, 用蒸餾水稀釋樣品並乘以計算公式中對應的稀釋倍數.
相關產品
BC2450/BC2455 植物組織果糖含量測定試劑盒
BC2540/BC2545纖維素酶(化學發光) 活性測定試劑盒
BC0330/BC0335 海藻糖含量測定試劑盒
BC2510/BC2515 海藻糖酶活性測定試劑盒
BC2520/BC2525 山梨醇含量測定試劑盒
BC2530/BC2535 山梨醇脫氫酶(SDH) 活性測定試劑盒
BC0230/BC0235 還原糖(RS) 含量測定試劑盒
BC2490/BC2495 血糖含量測定試劑盒
技術規格:
檢測極限: 0.002 毫克/毫升
線性範圍: 0.003125-0.25 毫克/毫升
評論
還沒有評論.