肝醣測定試劑盒

筆記: 測試前取兩個或三個不同的樣本進行預測.

操作設備: 分光光度計/酶標儀

目錄編號: BC0345

尺寸:100T/96S

成分:

萃取試劑: 100毫升×1, 4℃保存.

攝政一世: 粉末×1, 4℃保存。, 添加 1 使用前用 mL 蒸餾水溶解. 用蒸餾水稀釋至 0.1 mg/mL備用葡萄糖溶液, 準備使用. 0.1 mg/mL 葡萄糖標準溶液, 4℃保存.

攝政二世: 粉末×1, 4℃保存.

工作溶液: 倒 6 mL 蒸餾水倒入試劑Ⅱ中，緩慢倒入 24 濃硫酸毫升. 使用前溶解並充分混合. 未使用的試劑的有效期限為 4 °C 1週.

產品描述

肝醣是由葡萄糖單元組成的高分子多醣. 它是糖的主要儲存形式之一. 主要儲存在肝臟和肌肉中作為備用能量, 稱為肝醣原和肌肉肝醣原, 分別. 肝醣可以調節血糖濃度. 當血糖升高時，肝臟可以合成肝醣. 當血糖降低時, 肝醣原分解成葡萄糖來補充血糖. 所以, 肝醣原對於維持血糖的相對平衡很重要. 肌肉肝醣是肌肉中肝醣儲存的一種形式. 當劇烈運動消耗大量血糖時, 肌肉肝醣不能直接分解成血糖. 它必須先被分解產生乳酸, 隨血液循環到肝臟, 並經由肝醣葡萄糖轉化為肝醣原.

判定原則: 蒽酮法. 用強鹼性萃取物萃取肝醣, 肝醣含量以蒽酮法在強酸性條件下測定.

需要但未提供的試劑和設備.

S分光光度計/酶標儀, 桌上型離心機, 移液管, 微型玻璃比色皿/96孔板, 砂漿, 濃硫酸 (硫酸) 和蒸餾水.

程式:

我. 樣品萃取:

1. 細胞或細菌: 收集 5-10 將百萬個細菌或細胞放入離心管中, 離心後棄去上清液; 加入0.75mL萃取試劑超音波破碎細菌或細胞 (力量 20% 或200W, 超音波3秒, 10s間隔, 重複 30 次) ); 轉移至 10mL 管中, 放入沸水浴中煮20分鐘 (緊緊關閉以防止水分流失), 每隔一次搖晃管子 5 分鐘充分混合; 取出管子並冷卻, 用蒸餾水吸取至 5mL，並混合. 8000g、25℃離心10分鐘, 取上清液進行檢測.

2. 組織: 稱取0.1~0.2g樣品，置於 10 毫升管, 添加 0.75 萃取液毫升數, 在沸水浴中煮沸 20 分分鐘 (緊緊關閉以防止水分流失), 每隔一段時間搖動試管 5 分鐘充分混合. 當所有組織溶解後, 取出管子並冷卻, 然後彌補 5 mL 加蒸餾水. 8000g、25℃離心 10 分分鐘, 取上清液進行檢測.

二. 決心 程式:

1. 預熱 s分光光度計/酶標儀 30 分分鐘, 調整波長至 620 奈米, 用蒸餾器調零
2. 取樣台 (在 EPtube 中加入以下試劑)

攝政(微升)	毛坯管 (A1)	標準管 (A2)	試管 (A3)
樣本			60
攝政一世		60
蒸餾水	60
攝政二世	240	240	240

攪拌均勻, 放入沸水浴中 10 分分鐘 (緊緊關閉以防止水分流失), 涼爽的, 並採取 200 µL 注入微量玻璃比色皿/96 孔板中，讀取空白管的吸光度, 標準管, 和測量管在 620 奈米, 並將它們記錄為A1, A2, 和A3. 空白管和標準管只需測試一次.

三、. 計算:

1. 樣品重量

山梨醇 (毫克/克鮮重) =(銫×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(寬×V1÷V2)÷1.11

= 0.450×(A3-A1)÷（A2-A1）)÷W

2. 蛋白質濃度

山梨醇 (毫克/毫克蛋白質) = (銫×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(V1×心肺復甦) ÷1.11

=0.09×(A3-A1) ÷（A2-A1）) ÷心肺復甦

3. 細菌或細胞的數量:

山梨醇（mg/104細胞）= (銫×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(細菌或細胞數×V1÷V2) ÷1.11

= 0.450×(A3-A1)÷（A2-A1）)÷細菌或細胞數量

1.11: 葡萄糖含量換算成肝醣含量是一個常數, 那是, 的顏色 111 μg葡萄糖與蒽酮試劑相當於 100 μg 肝醣與蒽酮試劑.

CS: 標準品濃度, 0.1 毫克/毫升 V1: 樣品量, 0.06 毫升;

V2: 總樣本量, 5 毫升;

心肺復甦: 樣品蛋白濃度, 毫克/毫升; 瓦: 樣品重量, G

細菌或細胞的數量: 104 作為單位, 萬

筆記:

如果 A 大於 1.4, 用蒸餾水稀釋樣品並乘以計算公式中對應的稀釋倍數.

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技術規格:

檢測極限: 0.002 毫克/毫升

線性範圍: 0.003125-0.25 毫克/毫升