| 屬性 | 細節 |
|---|---|
| 貓 | G1480 |
| 尺寸 | 4 ×2毫升, 4 ×10毫升, 4 ×20毫升 |
| 貯存 | -20℃, 避光, 有效期限為 6 月 |
套件組件:
| 試劑 | 4x2毫升 | 4x10毫升 | 4x20毫升 | 貯存 |
|---|---|---|---|---|
| 試劑A: 鹼性磷酸酶固定劑 | 2毫升 | 10毫升 | 20毫升 | RT, 避光 |
| 試劑B: ALP孵化方案 | B1: AS-BI溶液1mL | 5毫升 | 10毫升 | -20℃, 避光 |
| B2: FBB溶液1mL | 5毫升 | 10毫升 | -20℃, 避光 | |
| 試劑C: 核固紅溶液 | 2毫升 | 10毫升 | 20毫升 | 2-8℃, 避光 |
| 試劑D: 甲基綠溶液 | 2毫升 | 10毫升 | 20毫升 | RT, 避光 |
介紹:
鹼性磷酸酶 (ALP 或 AKP) 廣泛分佈於哺乳動物組織中, 主要在細胞膜等活性物質交換位點, 內質網, 高爾基複合體, 溶小體, 嗜中性球顆粒, 和平滑肌細胞膜. ALP 染色試劑盒 (卡普洛法) 利用偶氮偶聯方法證明 ALP 活性, 與金屬鹽沉澱方法相比，提供可靠的結果.
自備材料:
玻片, 濕箱, 光學顯微鏡
協定 (僅供參考):
用於塗片或切片染色:
- 用 ALP 固定劑固定塗片或切片 3 分鐘, 然後用蒸餾水清洗.
- 應用ALP孵化方案, 置於濕盒中避光孵育 15-20 分鐘, 然後用蒸餾水清洗.
- 用核固紅溶液或甲基綠溶液重染3-5分鐘.
- 清洗或用甘油明膠密封後在顯微鏡下觀察切片.
用於貼壁細胞染色:
- 用 PBS 沖洗培養的細胞, 然後用 ALP 固定劑或 4% 粉煤灰, 然後用PBS洗滌.
- 應用ALP孵化方案, 置於濕盒中避光孵育 15-20 分鐘, 然後用PBS清洗.
- 用核固紅溶液或甲基綠溶液重染3-5分鐘.
- 用 PBS 清洗並在顯微鏡下觀察切片.
結果:
| 結果 | 顏色 |
|---|---|
| ALP陽性位點 | 藍色的 |
| 核 | 紅色或綠色 |
血液和骨髓抹片的判斷標準:
| 積極水平 | 染色特性 |
|---|---|
| 0 | 無顆粒 |
| 1 | 略呈顆粒狀 |
| 2 | 中級顆粒 |
| 3 | 多數顆粒 |
| 4 | 全顆粒 |
筆記:
- 使用新鮮樣本並及時固定切片以保持酵素活性.
- 染色過程中小心處理培養的細胞，以避免損壞或流失.
- ALP 孵化方案可能很快就會失效, 及時使用.
- 用核固紅溶液或甲基綠溶液重染.
- 每個樣本均包含陽性對照.
參考:
Yu Jiang, Dantian Zhu, Wenfeng Liu, 等人. Hedgehog 路徑抑制導致初級卵泡閉鎖並降低雌性生殖系幹細胞增殖能力或乾性. 幹細胞研究 & 治療. 七月 2019. (如果 4.627)
評論
還沒有評論.