Solarbio abts樹根部清除活動測定套件

產品概述

屬性	細節
操作設備	分光光度計
目錄編號	BC4770
尺寸	50 測試 / 24 樣品

產品內容:

使用之前，請確保試劑量與瓶中的溶液量匹配. 查詢, 友善的聯繫 索拉生物 工作人員迅速.

試劑名稱	規格	儲存條件
提取解決方案	液體, 60 毫升× 1	4℃保存
試劑一	液體, 80 毫升× 1	4℃保存
試劑二	粉末× 1	4℃保存
試劑三	液體, 20 微升× 1	4℃保存
試劑四	液體, 1.5 毫升× 1	-20℃保存
試劑V	粉末× 1	4℃保存

準備解決方案:

1. 試劑二: 使用前, 添加 3 毫升蒸餾水並完全溶解. 任何未使用的試劑均可在-20℃儲存兩個星期.
2. 試劑III工作解決方案的準備: 將液體放在提供的EP管中. 根據試劑III的比例準備工作解決方案 (微升) 蒸餾水 (毫升) = 1 微升: 12 毫升. 未使用的試劑應存儲在4℃.
3. 製備試劑IV工作解決方案: 將試劑IV分別存儲在-20℃處. 使用前, 根據樣品數和試劑V與試劑I的比率準備工作解決方案 (V: V) = 1:9. 未使用的試劑應存儲在-20℃.
4. 試劑V: 放置包含粉末的粉末 5 提供的EP管中的維生素C毫克. 添加 2.8 使用前的毫升提取溶液, 並徹底搖動以溶解. 準備一個 10 MMOL/L維生素C溶液用作陽性對照. 存儲4℃.
5. 準備ABTS工作解決方案: 使用前, 根據測試所需的金額準備ABTS工作解決方案. 試劑的比例: 試劑二: 試劑III工作解決方案 (V:V:V) = 76:5:4. 在室溫下準備並存放在黑暗的房間中. 在內部使用 30 分分鐘.

產品描述:

1. 抗氧化能力評估: ABTS方法廣泛用於評估親水性和親脂性物質的抗氧化能力.
2. 自由基的形成: ABTS氧化以形成穩定的藍綠色陽離子ABTS自由基，並在吸收峰 405 nm或 734 奈米.
3. 降低吸光度: 當測試物質被添加到ABTS自由基溶液中時, 抗氧化劑成分與之反應, 導致吸光度下降 405 奈米.
4. 比例清除: 吸光度的變化與一定範圍內的自由基清除程度成正比.
5. 清除的量化: 該套件通過量化吸光度下降來衡量樣品清除自由基的能力.

筆記: 測試前, 用2-3個樣品進行初步實驗，顯示明顯的預期差異. 如果樣品吸光度不超出測量範圍, 考慮稀釋或增加樣本量以進行測試.

需要但未提供的試劑和設備:

恆溫水浴, 分光光度計, 1 毫升玻璃比色皿, 桌上型離心機, 砂漿/研磨機, 乾燥盒, 30〜50網狀篩, 和蒸餾水.

程式:

我. 樣品萃取: (可以相應地調整樣品的數量, 並參考特定比例的文獻)

1. 製備植物組織樣品: 乾燥新鮮樣品，直至持續重量, mort (或研磨機), 並通過30〜50網狀篩子篩. 大約稱重 0.05 g樣品, 添加 1 毫升提取溶液, 並在40℃水浴中孵化 30 分分鐘. 離心機在 10000 轉速為 10 在室溫下最小, 收集上清液並置於冰上以供測試.
2. 紅葡萄酒, 果汁, 和其他液體樣品: 拿 100 μL樣品溶液並添加 900 μL提取溶液. 渦流混合, 離心在室溫下, 10000 轉速為 10 分分鐘, 收集上清液並置於冰上以供測試.
3. 提取或藥物: 用提取溶液準備一定的濃度, 例如 5 毫克/毫升.

筆記: 各種樣品清除自由基的能力可能會有很大變化. 確保准確性, 根據初步結果調整樣品.

二. 確定步驟:

1. 預熱分光光度計 30 分分鐘, 將波長設置為 405 奈米, 並用蒸餾水調零.
2. 準備陽性: 準備一個 10 MMOL/L維生素C溶液與提取溶液. 對於線性關係, 準備 1, 0.8, 0.6, 0.4, 0.2, 和 0.1 MG/ML維生素C溶液. 對於陽性控制，清除率約為 90%, 準備比大於大於的維生素C解決方案 1.5 mmol / l.
3. 操作表: 將以下試劑添加到96孔板或EP管中, 分別:

試劑名稱	毛坯管 (乙)	試管 (時間)	控制管 (C)	陽性對照管 (個人電腦)
上清液	50	50		50
VC解決方案				50
蒸餾水	50		50
試劑IV溶液	100	100	100	100
ABTS工作解決方案	850	850	850	850
試劑一	950

徹底混合後, 在黑暗中孵化 6 在室溫下最小. 測量吸光度 405 奈米. 記錄空白管的吸光度值, 控制管, 陽性對照管, 和試管作為AB, 交流電, APC, 並分別在. 空白管需要進行測試 1-2 次.

三、. ABT自由基清除率的計算:

1. 建立標準曲線: 陽性對照的自由基清除率的公式: ABTS自由基清除率DVC％= [(AB-APC) ÷ab] × 100%
2. 樣品自由基清除率的計算公式: ABTS自由基清除率D％= [AB – (AT-AC)] ÷ab] × 100%.

筆記:

1. 比較不同樣品的清除能力, 建議將相同體積的樣品添加到同一批次, 根據實驗前的結果進行調整. 在比較期間, 根據結果​​調整樣品, 比較相同濃度的清除率 (稀釋比例).
2. 樣品應在同一天進行和測試.

實驗示例:

拿 0.05 辣椒g並添加 1 Ml提取溶液均質化. 離心後, 收集上清液並根據決心步驟進行. 計算清除率: d％= [AB – (AT-AC)] ÷ab] × 100% = [1.330-(0.468-0.022)]÷1.330×100％= 66.466%

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