總DNA/RNA萃取試劑盒(柱提取法)
編號:DP201 規格:50時間 貯存:RT
產品原理:
總DNA/RNA提取試劑盒基於矽膠柱純化方法. 在裂解緩衝液的作用下, 樣品被裂解, 將核酸釋放到裂解液中. 核酸在高鹽環境下通過矽膠柱膜時被吸附, 而蛋白質不被吸附並被去除. 洗滌核酸結合膜以去除殘留的蛋白質和鹽, 最後, 使用DEPC處理水洗脫吸附在膜上的核酸. 所得核酸純度高,可直接用於各種下游實驗.
產品描述:
總DNA/RNA提取試劑盒適用於快速提取高純度總核酸, 包括病毒, 細菌, 寄生蟲, 和其他生物實體, 來自組織等樣本, 血, 分泌物, 和排泄物. 該試劑盒採用矽膠柱純化技術, 提取過程中無需有毒的苯酚-氯仿提取和耗時的酒精沉澱. 獲得的核酸可直接用於一系列下游實驗, 包括 聚合酶鍊式反應/逆轉錄聚合酶連鎖反應, 南方雜交/北方雜交, 以及 LAMP/RT-LAMP 檢測.
產品內容:
成分 | DP201-01(25T) | DP201-02(50T) | 儲存溫度 |
裂解緩衝液 | 15毫升 | 30毫升 | RT |
洗滌液 | 5毫升 | 10毫升 | RT |
洗脫液 | 5毫升 | 10毫升 | RT |
吸附柱 (管A) | 25件 | 50件 | RT |
收集管 (B管) | 25件 | 50件 | RT |
筆記: 首次使用前將無水乙醇添加到洗滌溶液中 (添加 20 25T 毫升, 添加 40 50T 毫升), 並在室溫下保存.
貯存:
該套件應存放在室溫乾燥條件下 (15-25℃) 並且可以保存 12 月. 用於長期儲存, 應保持在2-8°C.
操作步驟:
- 樣品製備 (預處理):
血液樣本: 拿 >500µL EDTA 抗凝血液, 離心機用於 30 秒, 並收集 200μL 上清液用於以下步驟.
組織樣本: 取組織樣本0.05-1g, 添加 5-10 倍生理鹽水體積, 研磨成均質混合物, 並收集 200μL 勻漿用於以下步驟.
分泌物, 糞便樣本: 將棉籤浸入生理鹽水中, 旋轉並塗抹在取樣部位. 收集後, 將拭子頭折斷放入裝有1mL生理鹽水的離心管中, 渦流 30 秒, 並收集200μL混合溶液用於以下步驟.
- 轉移步驟中準備好的樣品 200μL 1 至 1.5mL 離心管, 添加 500μL 裂解緩衝液, 通過反轉混合, 讓它代表 5 分鐘裂解, 並以 10000rpm 離心 3 分分鐘.
- 將 400 µL 上清液轉移至新的 1.5 mL 離心管中, 添加200μL無水乙醇, 渦流 20 秒.
- 將管 A 放入管 B 內, 將步驟中的整個混合物轉移 3 進入A管, 並以 10000rpm 離心 1 分分鐘.
- 丟棄管 B 中的濾液, 將管 A 放回管 B 中, 向管 A 中添加 600 µL 清洗液, 並以 10000rpm 離心 1 分分鐘.
- 丟棄管 B 中的濾液, 將管 A 放回管 B 中, 並以 10000rpm 離心 2 分分鐘.
- 將管 A 放入新的 1.5mL 離心管中. 將 50μL 洗脫緩衝液添加到管 A 中, 讓它代表 1-2 分分鐘, 10000rpm 離心機 1 分分鐘. 所得溶液即為樣本的總核酸溶液. 如果不立即使用, 儲存於-80°C.
重要提示 (使用本試劑盒前請閱讀此內容):
- 確保測試結果準確, 請嚴格按照說明操作.
- 套件內的管 A 和 B 為一次性物品, 請不要重複使用它們.
- 所有用於測試的廢物應放置在裝有消毒劑的廢物容器中, 浸泡消毒. 實驗結束後, 立即對工作台進行消毒 1% 次氯酸鈉或 75% 酒精.
- 實驗過程中, 人員應戴手套, 面具, 和實驗室外套, 並避免試劑之間的接觸, 樣品, 和身體. 建議盡量減少與管 A 和離心管開口的接觸. 如果樣品溶液粘在手套上或在操作過程中濺出 1-4, 應立即更換手套並清潔濺到的區域. 所有與病原體接觸的材料均應妥善處理.
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