HiPure FFPE RNA Kit supplies a simple and rapid RNA萃取 for Formalin-fixed, paraffin-embedded (FFPE) tissue and sections samples. This kit is based on silica gel column purification technology, no phenol-chloroform extraction or alcohol precipitation. The whole extraction only takes 30 分分鐘 (not including digestion time). RNA can be directly used for downstream applications such as RT-聚合酶鍊式反應, 北印跡, vitro translation and other experiments.
細節
規格
| 特徵 | 規格 |
| 主要功能 | Isolation total RNA from FFPE tissue and section samples (with DNase) |
| 應用領域 | 逆轉錄聚合酶連鎖反應, 定量RT-PCR, 北方雜交, Poly A purification, 核酸保護與體外翻譯 |
| 純化方法 | 小型的 旋轉柱 |
| 淨化技術 | 二氧化矽技術, 脫氧核糖核酸酶 |
| 工藝方法 | 手動的 (離心或真空) |
| 樣品類型 | FFPE tissue sample |
| 樣品量 | 6毫克 |
| 屈服 | 20微克 |
| 洗脫體積 | ≥10μl |
| 每次運行時間 | ≤60分鐘 |
| 每根柱的載液量 | 800微升 |
| 柱結合率 | 100微克 |
原則
本產品以矽膠柱純化. 透過 Buffer DPS 去除石蠟. Sample lysis with proteinase K digestion requires only 15 分分鐘. 裂解後, 樣品在 80°C 下孵育 15 分分鐘. 轉移至吸附柱，RNA 吸附在膜上, 而蛋白質不被吸附並透過過濾去除. 洗滌蛋白質及其他雜質後, RNA was finally eluted with low-salt buffer.
優點
- 高品質 – 高純度總RNA可直接用於各種敏感下游應用
- 快速地 – 可以提取多個樣本 60 分鐘柱法
- 安全的 – 無需苯酚氯仿萃取
- 敏感的 – RNA can be recovered at the level of PG
- Efficient DNA removal – unique method to effectively remove genomic DNA
套件內容
| 內容 | R414402 | D414403 |
| 淨化時間 | 50 準備工作 | 250 準備工作 |
| Hipure RNA微柱 | 50 | 250 |
| 2毫升收集管 | 50 | 250 |
| 緩衝DPS | 60 毫升 | 250 毫升 |
| Buffer FRL | 15 毫升 | 60 毫升 |
| 緩衝RLC | 15 毫升 | 60 毫升 |
| 緩衝區RWC* | 10 毫升 | 50 毫升 |
| 緩衝器 RW2* | 20 毫升 | 2 X 50 毫升 |
| 脫氧核糖核酸酶I | 600 微升 | 5 X 600 微升 |
| DNase Booster Buffer | 1.5 毫升 | 6 毫升 |
| 蛋白酶溶解緩衝液 | 1.8 毫升 | 10 毫升 |
| 蛋白酶K | 24 毫克 | 120 毫克 |
| 無核糖核酸酶水 | 10 毫升 | 20 毫升 |
儲存和穩定性
抵達後，蛋白酶 K 應儲存在 2–8°C 下. DNase I 應保存在 -20°C. 然而, 短期儲存 (DNase I 高達 1 週, 蛋白酶K高達 8 週) 在室溫下 (15–25°C) 不影響他們的表現. 其餘試劑盒成分可在室溫下保存 (15–25°C) 並且至少穩定 18 在這些條件下幾個月.
實驗數據
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