數位地面電視, 或二硫代醇, 是一種通常用於生物化學和分子生物學實驗室的還原劑. 這是一個包含兩個硫醇的小分子 (亞硫酸) 組並被用來打破蛋白質中的二硫鍵,並在各種生化測定中保持還原的環境. DTT的CAS號是 3483-12-3.
DTT的使用:
- 蛋白質變性和展開:
- DTT通常用於減少蛋白質中的二硫鍵, 導致蛋白質結構的變性和展開. 這在研究蛋白質折疊或製備蛋白質進行分析時特別有用.
- 酶激活:
- 一些酶需要減少的環境才能活躍. DTT用於維持還原條件, 確保這些酶的正常運作.
- 減少蛋白質聚集體:
- DTT可用於減少蛋白質聚集體或錯誤折疊的蛋白質, 在凝膠電泳等實驗中促進其溶解和分離.
- 防止細胞培養中的氧化:
- 在細胞培養中, 有時將DTT添加到培養基中,以防止蛋白質中半胱氨酸殘基的氧化並維持某些細胞過程所需的還原條件.
如何使用DTT:
- DTT溶液的製備:
- 將DTT溶解在適當的緩衝液或溶劑中,以創建所需濃度的DTT溶液. 常用濃度範圍從 1 MM TO 100 毫米, 取決於特定申請.
- 增加蛋白質樣品:
- 通常將DTT直接添加到蛋白質樣品或反應混合物中,以達到所需的還原條件. 應根據特定的實驗要求優化DTT的濃度.
- 孵:
- 使反應混合物在足夠的時間內孵育以允許DTT減少二硫鍵. 孵化時間可能會根據實驗設置和研究的具體目標而有所不同.
- 淬火:
- 還原反應完成後, 消除多餘的DTT以防止干擾下游應用程序至關重要. 這可以通過添加淬火試劑或其他適當的方法來實現.
- 分析:
- 繼續分析樣品, 它是否涉及凝膠電泳, 酶測定, 或其他生化技術.
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