ไตรกลีเซอไรด์(ทีจี) ชุดทดสอบเนื้อหา
บันทึก: ใช้ตัวอย่างที่แตกต่างกันสองหรือสามตัวอย่างเพื่อทำนายก่อนการทดสอบ.
อุปกรณ์การดำเนินงาน: เครื่องอ่านไมโครเพลท/สเปกโตรโฟโตมิเตอร์
หมายเลขแค็ตตาล็อก: BC0625
ขนาด:100ที/96ส
ส่วนประกอบ:
รีเอเจนต์ I: รีเอเจนต์ที่จัดหาเอง, เพิ่ม 80 ML ของ N-Heptane และ 80 ml ของ isopropyl แอลกอฮอล์กับขวดแก้วเปล่า. ปิดผนึกและผสมให้เข้ากัน, การเก็บรักษาที่ 4 ℃.
รีเอเจนต์ II: 3 มล.×1 ขวด. การเก็บรักษาที่ 4 ℃.
รีเอเจนต์ III: 10 มล.×1 ขวด. การเก็บรักษาที่ 4 ℃.
รีเอเจนต์ IV: 3 มล.×1 ขวด. การเก็บรักษาที่ 4 ℃, ป้องกันจากแสง. รีเอเจนต์ V: 10 มล.×1 ขวด. การเก็บรักษาที่ 4 ℃, ป้องกันจากแสง. รีเอเจนต์ VI: 10 มล.×1 ขวด. การเก็บรักษาที่ 4 ℃, ป้องกันจากแสง.
มาตรฐาน: ผง× 1 ขวด, เพิ่ม 5 ML ของน้ำยาฉันก่อนใช้งาน. 1 โซลูชันมาตรฐาน Triglyceride MG/ML, การเก็บรักษาที่ 4 ℃.
รายละเอียดสินค้า:
ไตรกลีเซอไรด์(ทีจี) เป็นโมเลกุลไขมันที่เกิดจากกรดไขมันสายยาวและกลีเซอรอล, ซึ่งไม่เพียง แต่เป็นองค์ประกอบหลักของเยื่อหุ้มเซลล์, แต่ยังเป็นสารตั้งต้นทางเดินหายใจที่สำคัญ. TG สกัดด้วย isopropyl แอลกอฮอล์, จากนั้นไฮโดรไลซิสไปยังกลีเซอรอลและกรดไขมันหลังจาก saponification ของ TG โดย KOH. กลีเซอรอลถูกออกซิไดซ์โดยกรดเป็นระยะเพื่อสร้างฟอร์มัลดีไฮด์. การควบแน่นของฟอร์มัลดีไฮด์และ acetylacetone เพื่อสร้างส่วนประกอบสีเหลืองต่อหน้าคลอไรด์ไอออน. ส่วนประกอบสีเหลืองมีการดูดซึมลักษณะที่ 420 NM และสัดส่วนกับเนื้อหา TG.
รีเอเจนต์และอุปกรณ์ที่จำเป็นแต่ไม่ได้จัดเตรียมไว้ให้:
เครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์/เครื่องอ่านไมโครเพลท, คิวเวทท์แก้วไมโคร/แผ่นก้นแบน 96 หลุม, N-heptane, ไอโซโพรพิลแอลกอฮอล์, อ่างอาบน้ำ, ปิเปตแบบปรับได้, น้ำกลั่นและ 125 ขวดเปล่า ML.
ขั้นตอน:
ฉัน. การจัดเตรียมตัวอย่าง:
- เนื้อเยื่อ:
ความสม่ำเสมอในการอาบน้ำน้ำแข็งดำเนินการตามอัตราส่วนของมวลเนื้อเยื่อ (ก): น้ำยาⅰปริมาณ (มล) - 1: 5~10 (ขอแนะนำให้ใช้เวลาเกี่ยวกับ 0.1 กรัมของเนื้อเยื่อและเพิ่ม 1 มิลลิลิตรของรีเอเจนต์ I). เครื่องปั่นแยกที่ 8000 กรัมสำหรับ 10 นาทีที่ 4 ℃, Supernatant ใช้สำหรับการทดสอบ.
- แบคทีเรีย:
เก็บรวบรวม 5 ล้านเซลล์หรือแบคทีเรียในหลอดเซนติเมตร, จากนั้นทิ้งซุปเปอร์โนแลนต์, เพิ่มครั้งสุดท้าย 1 มิลลิลิตรของรีเอเจนต์ I. แยกแบคทีเรียหรือเซลล์ด้วยอัลตราโซนิกสำหรับ 1 นาที (พลัง 20%, เวลาทำงาน 2S, ช่วงเวลา 1S). เครื่องปั่นแยกที่ 8000 กรัมสำหรับ 10 นาทีที่ 4 ℃, Supernatant ใช้สำหรับการทดสอบ.
- เซรั่ม: ตรวจจับ
ครั้งที่สอง. ขั้นตอน:
- เปิดสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ร้อนสำหรับ 30 นาที, ปรับความยาวคลื่นเป็น 420 นาโนเมตร, ตั้งศูนย์ด้วยน้ำกลั่น.
- เปิดอ่างน้ำร้อนถึง 65 ℃.
| ชื่อรีเอเจนต์ (ไมโครลิตร) | หลอดเปล่า (เอบี) | หลอดมาตรฐาน( เช่น) | หลอดทดลอง(ที่) |
| น้ำกลั่น | 40 | – | – |
| โซลูชั่นมาตรฐาน | – | 40 | – |
| โซลูชันการทดสอบ TG | – | – | 40 |
| รีเอเจนต์ Ⅰ | 125 | 125 | 125 |
| รีเอเจนต์ Ⅱ | 25 | 25 | 25 |
| ผสมให้เข้ากันหลังจากเพิ่มน้ำยาฉัน, เพิ่ม Reagent II, เขย่า 30 ส, ยืนหลายนาที. หลังจากเลเยอร์, 15 μlของสารละลายชั้นบนถูกนำมาและนำไปใส่ในหลอด EP ใหม่. | |||
- ตรวจจับเนื้อหา TG:
| ชื่อรีเอเจนต์ (ไมโครลิตร) | หลอดเปล่า (เอบี) | หลอดมาตรฐาน (เช่น) | หลอดทดลอง (ที่) |
| สารละลายชั้นบน | 15 | 15 | 15 |
| รีเอเจนต์ Ⅲ (ส.อ) | 50 | 50 | 50 |
| รีเอเจนต์ Ⅳ (ส.อ) | 15 | 15 | 15 |
| ผสมให้เข้ากัน, อ่างน้ำที่ 65 ℃สำหรับ 3 นาที. | |||
| รีเอเจนต์ⅴ (ส.อ) | 50 | 50 | 50 |
| รีเอเจนต์ⅵ (ส.อ) | 50 | 50 | 50 |
| ผสมให้เข้ากัน, อ่างน้ำที่ 65 ℃สำหรับ 3 นาที. | |||
หลังจากระบายความร้อนแล้ว, ถ่ายโอนของเหลวจากหลอด EP ไปยังแก้วไมโครแก้ว/96 แผ่นแบนด้านล่าง, และกำหนดค่าการดูดกลืนแสงที่ 420 นาโนเมตร.
บันทึก: จำเป็นต้องวัดหลอดเปล่าและหลอดมาตรฐานเพียงครั้งเดียว.
สาม. การคำนวณ:
1) เซรั่ม:
ทีจี(mg/dl)= C ×(ที่- เอบี)÷(เช่น- เอบี)× 100 =(ที่- เอบี)÷(เช่น- เอบี)× 100
2) เนื้อเยื่อ:
ความเข้มข้นของโปรตีน:
ทีจี(มก./มก. โปรต)= C × V ×(ที่- เอบี)÷(เช่น- เอบี) ÷(CPR × V)-(ที่- เอบี)÷(เช่น- เอบี) __ซีพีอาร์
น้ำหนักตัวอย่าง:
ทีจี(mg/g) = C × V ×(ที่- เอบี)÷(เช่น- เอบี) ÷ W =(ที่- เอบี)÷(เช่น- เอบี) ۞W
3 ) แบคทีเรียหรือ เซลล์:
ทีจี(เซลล์ U/104) = C ×(ที่- เอบี)÷(เช่น- เอบี) ÷ d =(ที่- เอบี)÷(เช่น- เอบี) ÷ d 1dl = 100 มล.;
วี: ปริมาตรของรีเอเจนต์ 1, 1 มล;
ค: ความเข้มข้นมาตรฐาน, 1 mg/ ml;
ซีพีอาร์: ตัวอย่างความเข้มข้นของโปรตีน (มก./มล); ว: น้ำหนักตัวอย่าง(ก);
ดี: ความหนาแน่นของแบคทีเรียหรือเซลล์, 104 เซลล์/มล..
บันทึก:
- มีสารระเหยในชุด. ควรสวมใส่ถุงมือและหน้ากากในระหว่างการทดลอง. ควรปิดฝาขวดรีเอเจนต์ในเวลาหลังจากนั้น
- หลังจากการเติมน้ำยาⅱ, มีความจำเป็นที่จะต้องสั่นซ้ำ ๆ และรุนแรง, เพื่อให้ไตรกลีเซอไรด์ในโซลูชันการทดสอบสามารถสกัดได้อย่างสมบูรณ์, และแอมพลิจูดการแกว่ง, เวลา, เวลาซ้ำ ๆ และการรอเวลาการแบ่งชั้นควรจะเป็น
- เพื่อให้แน่ใจว่าการทำซ้ำของการทดสอบ, ควรใช้เวลาเย็นหลังจากอ่างน้ำแต่ละครั้ง
- หากค่า OD ของหลอดทดสอบมากกว่า 1.5, ขอแนะนำให้เจือจางตัวอย่างด้วยน้ำยาฉันอย่างถูกต้องก่อนทดสอบ, และคูณด้วยการเจือจางที่สอดคล้องกันหลายครั้งในระหว่างการคำนวณ.
อ้างอิง
- Fletcher M J. วิธีการกำหนดสีสำหรับการประเมินไตรกลีเซอไรด์ในซีรั่ม[เจ]. Clinica Chimica แอคต้า, 1968, 22(3): 393-397.
- Hercules d m, Sheehan t l. การหาทางเคมีของกลีเซอรอลในเลือดและไตรกลีเซอไรด์[เจ]. เคมีวิเคราะห์, 1978, 50(1):22-25.
สินค้าที่เกี่ยวข้อง
bc1890/bc1895 cholestenone ฟรี (สโมสรฟุตบอล) ชุดทดสอบเนื้อหา
BC0750/BC0755 acetaldehyde dehydrogenase(ชาวอะโวค) ชุดทดสอบกิจกรรม
BC0410/BC0415 Acetyl CoA carboxylase(ACC) ชุดทดสอบกิจกรรม
BC1980/BC1985 รวมคอเลสเตอรอล(TC) ชุดทดสอบเนื้อหา
ข้อกำหนดทางเทคนิค:
ขีดจำกัดการตรวจจับ: 0.0372 มก./มล
ช่วงเชิงเส้น: 0.0625-3 มก./มล
รีวิว
ยังไม่มีบทวิจารณ์