เนื้อเยื่อ Solarbio และอัลคาไลน์ฟอสฟาเตสในเลือด (เอเคพี/แอลพี) ชุดทดสอบกิจกรรม

เนื้อเยื่อและเลือดอัลคาไลน์ฟอสฟาเตส (เอเคพี/แอลพี) ชุดทดสอบกิจกรรม

บันทึก: ใช้ตัวอย่างที่แตกต่างกันสองหรือสามตัวอย่างเพื่อทำนายก่อนการทดสอบ.

อุปกรณ์การดำเนินงาน: สเปกโตรโฟโตมิเตอร์

หมายเลขแค็ตตาล็อก: BC2140

ขนาด: 50ที/24ส

ส่วนประกอบ:

รีเอเจนต์การสกัด: ของเหลว 30 มล.×1 ขวด, การเก็บรักษาที่ 4 ℃.

รีเอเจนต์ 1: ของเหลว 10 มล.×1 ขวด, storage at 4℃ and protect from light.

รีเอเจนต์ 2: ของเหลว 10 มล.×1 ขวด, storage at 4℃ and protect from light.

รีเอเจนต์ 3: ของเหลว 30 มล.×1 ขวด, storage at 4℃ and protect from light. It cannot be used if it turns to blue-green.

มาตรฐาน: ของเหลว 1 มล.×1 ขวด, 10 μmol/mL phenol standard solution, การเก็บรักษาที่ 4 ℃. Dilute with distilled water to 2.5 μmol/mL before use.

รายละเอียดสินค้า:

AKP/ALP is a zinc-containing glycoprotease, which hydrolysis various natural and synthetic phospholipid monoester compounds in alkaline condition. AKP / ALP are widely distributed in human organs, mainly in liver.

In alkaline condition, AKP/ALP catalyzes hydrolysis of disodium phenyl phosphate to phenol, and the phenol reacts with 4-Aminoantipyrine and potassium ferricyanide to form red quinone derivative, which can be detected absorbance at 510 นาโนเมตร. AKP/ALP activity can be calculated by measuring the absorbance increase rate at 510 นาโนเมตร.

รีเอเจนต์และอุปกรณ์ที่จำเป็นแต่ไม่ได้จัดเตรียมไว้ให้:

สเปกโตรโฟโตมิเตอร์, เครื่องหมุนเหวี่ยงบนโต๊ะ, transferpettor, 1 คิวเวตต์แก้วขนาดมล, น้ำแข็งและน้ำกลั่น.

ขั้นตอน:

ฉัน. เอนไซม์ การตระเตรียม:

เพิ่ม 1 mL Extraction reagent to 0.1 g tissue, grind thoroughly. เครื่องปั่นแยกที่ 4 ℃, 10000 รอบต่อนาทีสำหรับ 10 นาที. Take the supernatant on the ice for test. Blood sample can be detected directly. Dilute with Extraction reagent if concentrate is high.

ครั้งที่สอง. การกำหนด ขั้นตอน:

1. Preheat spectrophotometer for 30 นาที, ปรับความยาวคลื่นเป็น 510 นาโนเมตร, ตั้งตัวนับเป็นศูนย์ด้วยการกลั่น
2. Add reagents in 1.5 mL cuvette as the following:

ชื่อรีเอเจนต์ (ไมโครลิตร)	Test tube A3	Control tube A4	Blank tube A2	Standard tube A1
น้ำกลั่น			20
โซลูชั่นมาตรฐาน				20
เหนือตะกอน	20
รีเอเจนต์ 1	200	200	200	200
รีเอเจนต์ 2	200	200	200	200
ผสมให้เข้ากัน, stay in 37℃ for 15 นาที.
รีเอเจนต์ 3	600	600	600	600
เหนือตะกอน		20
ผสมให้เข้ากัน, detect absorbance at 510 นาโนเมตร, record as A1, A2, A3, A4.

สาม. AKP/ALP activity calculation:

• ความเข้มข้นของโปรตีน:

คำจำกัดความของหน่วย: กิจกรรมเอนไซม์หนึ่งหน่วยถูกกำหนดให้เป็นปริมาณของเอนไซม์ที่เร่งการสร้าง 1 μmol phenol in the reaction system per minute at 37℃ every mg protein.

เอเคพี/แอลพี (U/มก) -[C×(A3-A4)÷(A1-A2)×Vs]÷(ซีพีอาร์×เทียบกับ)÷T=0.167×(A3-A4)÷(A1-A2)__ซีพีอาร์

• น้ำหนักตัวอย่าง:

คำจำกัดความของหน่วย: กิจกรรมเอนไซม์หนึ่งหน่วยถูกกำหนดให้เป็นปริมาณของเอนไซม์ที่เร่งการสร้าง 1 μmol phenol in the reaction system per minute at 37℃ every g sample.

เอเคพี/แอลพี (น้ำหนักยู/กรัม) -[C×(A3-A4)÷(A1-A2)×Vs]÷(W÷Ve×Vs)÷T=0.167×(A3-A4)÷(A1-A2)۞W

• เลือด:

คำจำกัดความของหน่วย: กิจกรรมเอนไซม์หนึ่งหน่วยถูกกำหนดให้เป็นปริมาณของเอนไซม์ที่เร่งการสร้าง 1 μmol phenol in the reaction system per minute at 37℃ every mL serum.

เอเคพี/แอลพี (ยู/มล) -[C×(A3-A4)÷(A1-A2)×Vs]÷Vs÷T=0.167×(A3-A4)÷(A1-A2)

ค: ความเข้มข้นมาตรฐาน, 2.5 ไมโครโมล/มล;

เชือก: ปริมาตรปฏิกิริยาทั้งหมด, 1020 μL=1.02 mL; เทียบกับ: Supernatant volume, 0.02 มล;

เวอ: ปริมาณการสกัด, 1 มล; ว: น้ำหนักตัวอย่าง, ก;

ต: เวลาเกิดปฏิกิริยา, 15 นาที;

ซีพีอาร์: ตัวอย่างความเข้มข้นของโปรตีน, มก./มล.

บันทึก:

1. รีเอเจนต์ 1, รีเอเจนต์ 2 and Reagent 3 should be protected from
2. รีเอเจนต์ 3 cannot be used if it has changed toblue-green.
3. Mix thoroughly quickly after adding Reagent 3 to avoid incomplete

ตัวอย่างการทดลอง:

1. Take 0.1g of mouse pancreas and add 1 mL of Extract solution for homogenate. After taking the supernatant, operate according to the determination steps. Calculate AT = 0.324, เอซี = 0.037, AB = 0.022, AS = 0.677. Calculate the enzyme activity according to the sample mass: AKP/ALP enzyme activity (มวลยู/กรัม) = 0.167×(เอที-เอซี)÷(AS-AB) ÷ W =0.167×(0.324-0.037)÷(0.677-0.022)÷0.1=0.732 U/g
2. After taking the rabbit serum, การดำเนินการจะดำเนินการตามขั้นตอนการกำหนด, and the enzyme activity is calculated as follows: AT = 0.190, เอซี = 0.015, AB = 0.022, AS = 0.677. According to the blood volume, the enzyme activity is calculated as follows: AKP/ALP enzyme activity (ยู/มล) = 0.167×(เอที-เอซี) ÷ (AS-AB) =0.167×(0.190-0.015)÷(0.677-0.022)=0.0446U/mL.

สินค้าที่เกี่ยวข้อง：

BC2020/BC2025 Acetylcholinesterase(AchE) ชุดทดสอบกิจกรรม

BC2130/BC2135 Acid Phosphatase(ACP) ชุดทดสอบกิจกรรม

BC0840/BC0845 Carboxylesterase(CarE) ชุดทดสอบกิจกรรม