ชุดทดสอบไกลโคเจน
บันทึก: ใช้ตัวอย่างที่แตกต่างกันสองหรือสามตัวอย่างเพื่อทำนายก่อนการทดสอบ.
อุปกรณ์การดำเนินงาน: เครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์/เครื่องอ่านไมโครเพลท
หมายเลขแค็ตตาล็อก: BC0345
ขนาด:100ที/96ส
ส่วนประกอบ:
สารสกัดรีเอเจนต์: 100มล.×1, การเก็บรักษาที่ 4 ℃.
รีเจนท์ 1: ผง×1, การเก็บรักษาที่ 4°C.10 มก. ของกลูโคส, เพิ่ม 1 มิลลิลิตรของน้ำกลั่นเพื่อละลายก่อนใช้. เจือจางด้วยน้ำกลั่นลงไป 0.1 สารละลายน้ำตาลกลูโคส มก./มล. สำหรับสแตนด์บาย, พร้อมใช้งาน. 0.1 สารละลายมาตรฐานกลูโคส มก./มล, การเก็บรักษาที่ 4 ℃.
รีเจนท์ Ⅱ: ผง×1, การเก็บรักษาที่ 4 ℃.
วิธีแก้ปัญหาการทำงาน: เท 6 มิลลิลิตรของน้ำกลั่นลงในรีเอเจนต์ Ⅱ แล้วค่อยๆ เท 24 มิลลิลิตรของกรดซัลฟิวริกเข้มข้น. ละลายและผสมให้ละเอียดก่อนใช้. รีเอเจนต์ที่ไม่ได้ใช้สามารถใช้ได้ที่ 4 °C เป็นเวลาหนึ่งสัปดาห์.
รายละเอียดสินค้า
ไกลโคเจนเป็นโพลีแซ็กคาไรด์โมเลกุลสูงที่ประกอบด้วยหน่วยกลูโคส. เป็นหนึ่งในรูปแบบการเก็บน้ำตาลหลัก. โดยส่วนใหญ่จะสะสมอยู่ในตับและกล้ามเนื้อเป็นพลังงานสำรอง, และเรียกว่าไกลโคเจนในตับและไกลโคเจนในกล้ามเนื้อ, ตามลำดับ. ไกลโคเจนสามารถควบคุมความเข้มข้นของน้ำตาลในเลือดได้. ไกลโคเจนสามารถสังเคราะห์ได้ในตับเมื่อระดับน้ำตาลในเลือดเพิ่มขึ้น. เมื่อน้ำตาลในเลือดลดลง, ไกลโคเจนในตับจะถูกย่อยเป็นกลูโคสเพื่อเสริมน้ำตาลในเลือด. ดังนั้น, ไกลโคเจนในตับเป็นสิ่งสำคัญในการรักษาสมดุลของน้ำตาลในเลือด. ไกลโคเจนในกล้ามเนื้อเป็นรูปแบบหนึ่งของการเก็บไกลโคเจนในกล้ามเนื้อ. เมื่อบริโภคน้ำตาลในเลือดมากระหว่างออกกำลังกายหนัก, ไกลโคเจนในกล้ามเนื้อไม่สามารถสลายเป็นน้ำตาลในเลือดได้โดยตรง. ต้องสลายตัวก่อนจึงจะผลิตกรดแลคติคได้, ซึ่งไหลเวียนไปยังตับพร้อมกับเลือด, และเปลี่ยนเป็นไกลโคเจนในตับผ่านไกลโคเจนกลูโคส.
หลักการกำหนด: วิธีแอนโธรน. ไกลโคเจนสกัดด้วยสารสกัดอัลคาไลน์เข้มข้น, และปริมาณไกลโคเจนถูกวัดโดยใช้วิธีแอนโทรนภายใต้สภาวะที่เป็นกรดสูง.
รีเอเจนต์และอุปกรณ์ที่จำเป็นแต่ไม่ได้จัดเตรียมไว้ให้.
สเครื่องอ่านเพคโตรโฟโตมิเตอร์/ไมโครเพลท, เครื่องหมุนเหวี่ยงบนโต๊ะ, ปิเปตโอน, คิวเวตต์แก้วขนาดเล็ก/จาน 96 หลุม, ปูน, กรดซัลฟิวริกเข้มข้น (H2SO4) และน้ำกลั่น.
ขั้นตอน:
ฉัน. การสกัดตัวอย่าง:
- เซลล์หรือแบคทีเรีย: เก็บรวบรวม 5-10 ล้านแบคทีเรียหรือเซลล์ลงในหลอดหมุนเหวี่ยง, ทิ้งส่วนเหนือตะกอนหลังจากการปั่นแยก; เติมน้ำยาสกัด 0.75 มล. เพื่อทำลายแบคทีเรียหรือเซลล์ด้วยคลื่นเสียงความถี่สูง (พลัง 20% หรือ 200W, อัลตราโซนิก 3s, 10ช่วงเวลา, ทำซ้ำ 30 ครั้ง) ); ถ่ายโอนไปยังหลอดขนาด 10 มล, ต้มในอ่างน้ำเดือดเป็นเวลา 20 นาที (ปิดให้สนิทเพื่อป้องกันการสูญเสียน้ำ), เขย่าหลอดทุกครั้ง 5 นาทีเพื่อผสมให้เต็มที่; นำหลอดออกมาและเย็น, ใช้น้ำกลั่นถึง 5 มล. แล้วผสม. ปั่นแยกที่ 8000 กรัม และ 25°C เป็นเวลา 10 นาที, นำส่วนเหนือตะกอนไปทดสอบ.
- เนื้อเยื่อ: ชั่งน้ำหนักตัวอย่าง 0.1~0.2 กรัม แล้วใส่ไว้ใน 10 หลอดมล, เพิ่ม 0.75 มิลลิลิตรของสารละลายการสกัด, ต้มในอ่างน้ำเดือดเพื่อ 20 นาที (ปิดให้สนิทเพื่อป้องกันการสูญเสียน้ำ), เขย่าหลอดทดลองทุกครั้ง 5 นาทีเพื่อผสมให้เต็มที่. หลังจากนั้นเนื้อเยื่อก็ละลายหมด, นำหลอดออกมาแล้วทำให้เย็นลง, แล้วแต่งหน้า 5 มล. ด้วยน้ำกลั่น. ปั่นแยกที่ 8000 กรัม และ 25°C สำหรับ 10 นาที, นำส่วนเหนือตะกอนไปทดสอบ.
ครั้งที่สอง. การกำหนด ขั้นตอน:
- เปิดเครื่อง สเครื่องอ่านเพคโตรโฟโตมิเตอร์/ไมโครเพลทสำหรับ 30 นาที, ปรับความยาวคลื่นเป็น 620 นาโนเมตร, ตั้งค่าศูนย์ด้วยการกลั่น
- ตารางสุ่มตัวอย่าง (เพิ่มผู้สำเร็จราชการต่อไปนี้ใน EPtube)
| อุปราช(ไมโครลิตร) | หลอดเปล่า (A1) | ท่อมาตรฐาน (A2) | หลอดทดลอง (A3) |
| ตัวอย่าง | 60 | ||
| รีเจนท์ 1 | 60 | ||
| น้ำกลั่น | 60 | ||
| รีเจนท์ Ⅱ | 240 | 240 | 240 |
ผสมให้เข้ากัน, ใส่ในอ่างน้ำเดือดเพื่อ 10 นาที (ปิดให้สนิทเพื่อป้องกันการสูญเสียน้ำ), เย็น, และรับ 200 ไมโครลิตรลงในคิวเวตต์แก้วขนาดเล็ก/เพลต 96 หลุมเพื่ออ่านค่าการดูดกลืนแสงของหลอดเปล่า, หลอดมาตรฐาน, และท่อวัดที่ 620 นาโนเมตร, และบันทึกเป็น A1, A2, และ A3. ต้องทดสอบท่อเปล่าและท่อมาตรฐานเพียงครั้งเดียว.
สาม. การคำนวณ:
- น้ำหนักตัวอย่าง
ซอร์บิทอล (มก./กรัม น้ำหนักสด) -(ซีเอส×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(ก×V1۞V2)¨1.11
= 0.450×(A3-A1)เสี่ยว(A2-A1)۞W
- ความเข้มข้นของโปรตีน
ซอร์บิทอล (มก./มก. โปรต) - (ซีเอส×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(V1×ซีพีอาร์) ¨1.11
=0.09×(A3-A1) เสี่ยว(A2-A1) __ซีพีอาร์
- จำนวนแบคทีเรียหรือเซลล์:
ซอร์บิทอล (มก./104 เซลล์)= (ซีเอส×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(จำนวนแบคทีเรียหรือเซลล์×V1~V2) ¨1.11
= 0.450×(A3-A1)เสี่ยว(A2-A1)۞จำนวนแบคทีเรียหรือเซลล์
1.11: ค่าคงที่ของปริมาณกลูโคสที่แปลงเป็นปริมาณไกลโคเจน, นั่นก็คือ, สีของ 111 ไมโครกรัมของกลูโคสที่มีแอนโทรนรีเอเจนต์เทียบเท่ากับของ 100 ไมโครกรัมของไกลโคเจนกับแอนโทรนรีเอเจนต์.
คส: ความเข้มข้นของมาตรฐาน, 0.1 มก./มล. V1: ปริมาณตัวอย่าง, 0.06 มล;
V2: ปริมาณตัวอย่างทั้งหมด, 5 มล;
ซีพีอาร์: ตัวอย่างความเข้มข้นของโปรตีน, มก./มล; ว: น้ำหนักตัวอย่าง, ก
จำนวนแบคทีเรียหรือเซลล์: 104 เป็นหน่วย, หมื่น
บันทึก:
ถ้า A มากกว่า 1.4, เจือจางตัวอย่างด้วยน้ำกลั่นแล้วคูณด้วยปัจจัยการเจือจางที่สอดคล้องกันในสูตรการคำนวณ.
สินค้าที่เกี่ยวข้อง
BC2450/BC2455 ชุดทดสอบปริมาณฟรักโทสในเนื้อเยื่อพืช
BC2540/BC2545 เซลลูเลส(ซีแอล) ชุดทดสอบกิจกรรม
BC0330/BC0335 ชุดทดสอบปริมาณทรีฮาโลส
BC2510/BC2515 ชุดทดสอบกิจกรรมทรีฮาเลส
BC2520/BC2525 ชุดทดสอบปริมาณซอร์บิทอล
BC2530/BC2535 ซอร์บิทอลดีไฮโดรจีเนส(สธ) ชุดทดสอบกิจกรรม
BC0230/BC0235 น้ำตาลรีดิวซ์(อาร์เอส) ชุดทดสอบเนื้อหา
BC2490/BC2495 ชุดทดสอบปริมาณกลูโคสในเลือด
ข้อกำหนดทางเทคนิค:
ขีดจำกัดการตรวจจับ: 0.002 มก./มล
ช่วงเชิงเส้น: 0.003125-0.25 มก./มล
รีวิว
ยังไม่มีบทวิจารณ์