ชุดทดสอบกิจกรรมกำจัดต้นไม้จากรากต้นของ Solarbio ABTS

ภาพรวมผลิตภัณฑ์

เนื้อหาผลิตภัณฑ์:

โปรดตรวจสอบให้แน่ใจว่าปริมาตรรีเอเจนต์ตรงกับปริมาตรของสารละลายในขวดก่อนใช้งาน. สำหรับการสอบถาม, กรุณาติดต่อ โซลาบิโอ พนักงานได้ทันที.

การเตรียมสารละลาย:

1. รีเอเจนต์ II: ก่อนใช้งาน, เพิ่ม 3 มิลลิลิตรของน้ำกลั่นแล้วละลายให้หมด. รีเอเจนต์ที่ไม่ได้ใช้สามารถเก็บไว้ที่ -20°C เป็นเวลาสองสัปดาห์.
2. การเตรียมสารละลายการทำงานของรีเอเจนต์ III: ใส่ของเหลวลงในท่อ EP ที่จัดไว้ให้. เตรียมสารละลายในการทำงานตามอัตราส่วนของรีเอเจนต์ III (ไมโครลิตร) ไปจนถึงน้ำกลั่น (มล) - 1 ไมโครลิตร: 12 มล. รีเอเจนต์ที่ไม่ได้ใช้ควรเก็บไว้ที่ 4 ℃.
3. การเตรียมสารละลายการทำงานของรีเอเจนต์ IV: เก็บรีเอเจนต์ IV แยกต่างหากที่ -20°C. ก่อนใช้งาน, เตรียมสารละลายในการทำงานตามหมายเลขตัวอย่างและอัตราส่วนของรีเอเจนต์ V ต่อรีเอเจนต์ I (วี: วี) - 1:9. รีเอเจนต์ที่ไม่ได้ใช้ควรเก็บไว้ที่ -20 ℃.
4. รีเอเจนต์ V: วางผงที่มี 5 มิลลิกรัมของวิตามินซีในหลอด EP ที่จัดไว้ให้. เพิ่ม 2.8 มิลลิลิตรของสารสกัดก่อนใช้, และเขย่าให้ละลาย. เตรียมก 10 สารละลายวิตามินซี mmol/L สำหรับใช้เป็นตัวควบคุมเชิงบวก. เก็บที่อุณหภูมิ 4 ℃ เป็นเวลาหนึ่งสัปดาห์.
5. การเตรียมโซลูชั่นการทำงานของ ABTS: ก่อนใช้งาน, เตรียมวิธีแก้ปัญหาการทำงานของ ABTS ตามจำนวนที่ต้องการสำหรับการทดสอบ. สัดส่วนของรีเอเจนต์ I: รีเอเจนต์ II: โซลูชันการทำงานของรีเอเจนต์ III (วี:วี:วี) - 76:5:4. เตรียมและเก็บในห้องมืดที่อุณหภูมิห้อง. ใช้ภายใน 30 นาที.

รายละเอียดสินค้า:

1. การประเมินความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระ: วิธี ABTS ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการประเมินความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระของสารที่ชอบน้ำและไลโปฟิลิก.
2. การก่อตัวของ ABTS Radical: ABTS ออกซิไดซ์เพื่อสร้างประจุบวก ABTS แคตไอออนสีน้ำเงิน-เขียวที่เสถียร โดยมียอดการดูดกลืนแสงอยู่ที่ 405 นาโนเมตรหรือ 734 นาโนเมตร.
3. การดูดซึมลดลง: เมื่อเติมสารที่ทดสอบลงในสารละลายอนุมูล ABTS, ส่วนประกอบของสารต้านอนุมูลอิสระจะทำปฏิกิริยากับมัน, ทำให้การดูดกลืนแสงลดลงที่ 405 นาโนเมตร.
4. การไล่ตามสัดส่วน: การเปลี่ยนแปลงในการดูดกลืนแสงเป็นสัดส่วนโดยตรงกับระดับการกำจัดอนุมูลอิสระภายในช่วงที่กำหนด.
5. ปริมาณการกำจัด: ชุดนี้วัดความสามารถของตัวอย่างในการไล่อนุมูล ABTS โดยการหาปริมาณของการดูดกลืนแสงที่ลดลง.

บันทึก: ก่อนการทดสอบ, ทำการทดลองเบื้องต้นโดยมีตัวอย่าง 2-3 ตัวอย่างที่แสดงความแตกต่างที่คาดหวังไว้อย่างมีนัยสำคัญ. หากค่าการดูดกลืนแสงของตัวอย่างอยู่นอกช่วงการวัด, พิจารณาเจือจางหรือเพิ่มขนาดตัวอย่างเพื่อการทดสอบ.

รีเอเจนต์และอุปกรณ์ที่จำเป็นแต่ไม่ได้จัดเตรียมไว้ให้:

อ่างน้ำอุณหภูมิคงที่, สเปกโตรโฟโตมิเตอร์, 1 คิวเวตต์แก้วขนาดมล, เครื่องหมุนเหวี่ยงเดสก์ท็อป, ครก/เครื่องบด, กล่องอบแห้ง, 30~50ตะแกรงตาข่าย, และน้ำกลั่น.

ขั้นตอน:

ฉัน. การสกัดตัวอย่าง: (สามารถปรับจำนวนตัวอย่างได้ตามความเหมาะสม, และอ้างถึงวรรณกรรมสำหรับสัดส่วนเฉพาะ)

1. การเตรียมตัวอย่างเนื้อเยื่อพืช: ตัวอย่างสดแห้งที่อุณหภูมิ 60°C จนกระทั่งมีน้ำหนักคงที่, บดในครก (หรือเครื่องบด), และกรองผ่านตะแกรงขนาด 30~50 mesh. ชั่งน้ำหนักประมาณ 0.05 กรัมของตัวอย่าง, เพิ่ม 1 สารละลายสารสกัด มล, และฟักตัวในอ่างน้ำอุณหภูมิ 40°C เพื่อ 30 นาที. เครื่องปั่นแยกที่ 10000 รอบต่อนาทีสำหรับ 10 นาทีที่อุณหภูมิห้อง, รวบรวมส่วนเหนือตะกอนและเก็บไว้บนน้ำแข็งเพื่อทำการทดสอบ.
2. ไวน์แดง, น้ำผลไม้, และตัวอย่างของเหลวอื่นๆ: เอา 100 ไมโครลิตรของสารละลายตัวอย่างแล้วเติม 900 ไมโครลิตรของสารละลายสารสกัด. กระแสน้ำวนผสม, เครื่องหมุนเหวี่ยงที่อุณหภูมิห้อง, 10000 รอบต่อนาทีสำหรับ 10 นาที, รวบรวมส่วนเหนือตะกอนและเก็บไว้บนน้ำแข็งเพื่อทำการทดสอบ.
3. การสกัดหรือยา: เตรียมความเข้มข้นด้วยสารสกัดโซลูชั่น, เช่น 5 มก./มล.

บันทึก: ความสามารถของตัวอย่างต่างๆ ในการกำจัดอนุมูลอิสระ ABTS อาจแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญ. เพื่อให้เกิดความถูกต้องแม่นยำ, ปรับตัวอย่างตามผลลัพธ์เบื้องต้น.

ครั้งที่สอง. ขั้นตอนการกำหนด:

1. เปิดเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ก่อน 30 นาที, ตั้งค่าความยาวคลื่นเป็น 405 นาโนเมตร, และศูนย์ด้วยน้ำกลั่น.
2. การเตรียมการควบคุมเชิงบวก: เตรียมก 10 สารละลายวิตามินซี mmol/L พร้อมสารสกัด. สำหรับความสัมพันธ์เชิงเส้น, เตรียมตัว 1, 0.8, 0.6, 0.4, 0.2, และ 0.1 สารละลายวิตามินซี มก./มล. สำหรับการควบคุมเชิงบวกโดยมีอัตราการกวาดล้างประมาณ 90%, เตรียมสารละลายวิตามินซีที่มีขนาดใหญ่กว่า 1.5 มิลลิโมล/ลิตร.
3. ตารางปฏิบัติการ: เติมรีเอเจนต์ต่อไปนี้ลงในเพลต 96 หลุมหรือท่อ EP, ตามลำดับ:

หลังจากผสมให้เข้ากันแล้ว, ฟักตัวอยู่ในความมืดเพื่อ 6 นาทีที่อุณหภูมิห้อง. วัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 405 นาโนเมตร. บันทึกค่าการดูดกลืนแสงของหลอดเปล่า, หลอดควบคุม, หลอดควบคุมเชิงบวก, และหลอดทดลองเป็น AB, เครื่องปรับอากาศ, เอพีซี, และ AT ตามลำดับ. จำเป็นต้องทดสอบท่อเปล่า 1-2 ครั้ง.

สาม. การคำนวณอัตราการกำจัดอนุมูลอิสระของ ABTS:

1. การจัดตั้งเส้นโค้งมาตรฐาน: สูตรสำหรับอัตราการกำจัดอนุมูลอิสระของกลุ่มควบคุมเชิงบวก: อัตราการกำจัดอนุมูลอิสระของ ABTS DVC% = [(เอบี-เอพีซี) ۞ AB] × 100%
2. สูตรการคำนวณอัตราการกำจัดอนุมูลอิสระตัวอย่าง: อัตราการกำจัดอนุมูลอิสระของ ABTS D% = [เอบี – (เอที-เอซี)] ۞ AB] × 100%.

บันทึก:

1. เพื่อเปรียบเทียบความสามารถในการกำจัดของตัวอย่างต่างๆ, ขอแนะนำให้เพิ่มตัวอย่างในปริมาณเท่ากันลงในชุดเดียวกัน, ปรับตามผลการทดลองก่อน. ระหว่างการเปรียบเทียบ, ปรับตัวอย่างตามผลลัพธ์, เปรียบเทียบอัตราการกวาดล้างที่ความเข้มข้นเดียวกัน (อัตราส่วนการเจือจาง).
2. ควรเก็บตัวอย่างและทดสอบในวันเดียวกัน.

ตัวอย่างการทดลอง:

เอา 0.05 กรัมพริกแล้วเติม 1 มิลลิลิตรของสารละลายสารสกัดเพื่อทำให้เป็นเนื้อเดียวกัน. หลังจากการปั่นแยก, รวบรวมส่วนเหนือตะกอนและดำเนินการตามขั้นตอนการกำหนด. คำนวณอัตราการกวาดล้าง: ด% = [เอบี – (เอที-เอซี)] ۞AB] × 100% - [1.330-(0.468-0.022)]۞ 1.330×100% = 66.466%

สินค้าที่เกี่ยวข้อง:

• BC4750/BC4755: ชุดทดสอบความสามารถในการกำจัดอนุมูลอิสระของ DPPH
• BC1310/BC1315: ความจุสารต้านอนุมูลอิสระทั้งหมด (ที-เอโอซี) ชุดทดสอบ
• BC1320/BC1325: ชุดทดสอบความสามารถในการกำจัดอนุมูลของไฮดรอกซิล