ชุดทดสอบกิจกรรมกำจัดต้นไม้จากรากต้นของ Solarbio ABTS

ภาพรวมผลิตภัณฑ์

คุณลักษณะ	รายละเอียด
อุปกรณ์การดำเนินงาน	สเปกโตรโฟโตมิเตอร์
หมายเลขแค็ตตาล็อก	BC4770
ขนาด	50 การทดสอบ / 24 ตัวอย่าง

เนื้อหาผลิตภัณฑ์:

โปรดตรวจสอบให้แน่ใจว่าปริมาตรรีเอเจนต์ตรงกับปริมาตรของสารละลายในขวดก่อนใช้งาน. สำหรับการสอบถาม, กรุณาติดต่อ โซลาบิโอ พนักงานได้ทันที.

ชื่อรีเอเจนต์	ข้อมูลจำเพาะ	สภาพการเก็บรักษา
สารสกัดโซลูชั่น	ของเหลว, 60 มล. × 1	เก็บที่อุณหภูมิ 4 ℃
รีเอเจนต์ I	ของเหลว, 80 มล. × 1	เก็บที่อุณหภูมิ 4 ℃
รีเอเจนต์ II	ผง × 1	เก็บที่อุณหภูมิ 4 ℃
รีเอเจนต์ III	ของเหลว, 20 ไมโครลิตร × 1	เก็บที่อุณหภูมิ 4 ℃
รีเอเจนต์ IV	ของเหลว, 1.5 มล. × 1	เก็บที่อุณหภูมิ -20 ℃
รีเอเจนต์ V	ผง × 1	เก็บที่อุณหภูมิ 4 ℃

การเตรียมสารละลาย:

1. รีเอเจนต์ II: ก่อนใช้งาน, เพิ่ม 3 มิลลิลิตรของน้ำกลั่นแล้วละลายให้หมด. รีเอเจนต์ที่ไม่ได้ใช้สามารถเก็บไว้ที่ -20°C เป็นเวลาสองสัปดาห์.
2. การเตรียมสารละลายการทำงานของรีเอเจนต์ III: ใส่ของเหลวลงในท่อ EP ที่จัดไว้ให้. เตรียมสารละลายในการทำงานตามอัตราส่วนของรีเอเจนต์ III (ไมโครลิตร) ไปจนถึงน้ำกลั่น (มล) - 1 ไมโครลิตร: 12 มล. รีเอเจนต์ที่ไม่ได้ใช้ควรเก็บไว้ที่ 4 ℃.
3. การเตรียมสารละลายการทำงานของรีเอเจนต์ IV: เก็บรีเอเจนต์ IV แยกต่างหากที่ -20°C. ก่อนใช้งาน, เตรียมสารละลายในการทำงานตามหมายเลขตัวอย่างและอัตราส่วนของรีเอเจนต์ V ต่อรีเอเจนต์ I (วี: วี) - 1:9. รีเอเจนต์ที่ไม่ได้ใช้ควรเก็บไว้ที่ -20 ℃.
4. รีเอเจนต์ V: วางผงที่มี 5 มิลลิกรัมของวิตามินซีในหลอด EP ที่จัดไว้ให้. เพิ่ม 2.8 มิลลิลิตรของสารสกัดก่อนใช้, และเขย่าให้ละลาย. เตรียมก 10 สารละลายวิตามินซี mmol/L สำหรับใช้เป็นตัวควบคุมเชิงบวก. เก็บที่อุณหภูมิ 4 ℃ เป็นเวลาหนึ่งสัปดาห์.
5. การเตรียมโซลูชั่นการทำงานของ ABTS: ก่อนใช้งาน, เตรียมวิธีแก้ปัญหาการทำงานของ ABTS ตามจำนวนที่ต้องการสำหรับการทดสอบ. สัดส่วนของรีเอเจนต์ I: รีเอเจนต์ II: โซลูชันการทำงานของรีเอเจนต์ III (วี:วี:วี) - 76:5:4. เตรียมและเก็บในห้องมืดที่อุณหภูมิห้อง. ใช้ภายใน 30 นาที.

รายละเอียดสินค้า:

1. การประเมินความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระ: วิธี ABTS ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการประเมินความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระของสารที่ชอบน้ำและไลโปฟิลิก.
2. การก่อตัวของ ABTS Radical: ABTS ออกซิไดซ์เพื่อสร้างประจุบวก ABTS แคตไอออนสีน้ำเงิน-เขียวที่เสถียร โดยมียอดการดูดกลืนแสงอยู่ที่ 405 นาโนเมตรหรือ 734 นาโนเมตร.
3. การดูดซึมลดลง: เมื่อเติมสารที่ทดสอบลงในสารละลายอนุมูล ABTS, ส่วนประกอบของสารต้านอนุมูลอิสระจะทำปฏิกิริยากับมัน, ทำให้การดูดกลืนแสงลดลงที่ 405 นาโนเมตร.
4. การไล่ตามสัดส่วน: การเปลี่ยนแปลงในการดูดกลืนแสงเป็นสัดส่วนโดยตรงกับระดับการกำจัดอนุมูลอิสระภายในช่วงที่กำหนด.
5. ปริมาณการกำจัด: ชุดนี้วัดความสามารถของตัวอย่างในการไล่อนุมูล ABTS โดยการหาปริมาณของการดูดกลืนแสงที่ลดลง.

บันทึก: ก่อนการทดสอบ, ทำการทดลองเบื้องต้นโดยมีตัวอย่าง 2-3 ตัวอย่างที่แสดงความแตกต่างที่คาดหวังไว้อย่างมีนัยสำคัญ. หากค่าการดูดกลืนแสงของตัวอย่างอยู่นอกช่วงการวัด, พิจารณาเจือจางหรือเพิ่มขนาดตัวอย่างเพื่อการทดสอบ.

รีเอเจนต์และอุปกรณ์ที่จำเป็นแต่ไม่ได้จัดเตรียมไว้ให้:

อ่างน้ำอุณหภูมิคงที่, สเปกโตรโฟโตมิเตอร์, 1 คิวเวตต์แก้วขนาดมล, เครื่องหมุนเหวี่ยงเดสก์ท็อป, ครก/เครื่องบด, กล่องอบแห้ง, 30~50ตะแกรงตาข่าย, และน้ำกลั่น.

ขั้นตอน:

ฉัน. การสกัดตัวอย่าง: (สามารถปรับจำนวนตัวอย่างได้ตามความเหมาะสม, และอ้างถึงวรรณกรรมสำหรับสัดส่วนเฉพาะ)

1. การเตรียมตัวอย่างเนื้อเยื่อพืช: ตัวอย่างสดแห้งที่อุณหภูมิ 60°C จนกระทั่งมีน้ำหนักคงที่, บดในครก (หรือเครื่องบด), และกรองผ่านตะแกรงขนาด 30~50 mesh. ชั่งน้ำหนักประมาณ 0.05 กรัมของตัวอย่าง, เพิ่ม 1 สารละลายสารสกัด มล, และฟักตัวในอ่างน้ำอุณหภูมิ 40°C เพื่อ 30 นาที. เครื่องปั่นแยกที่ 10000 รอบต่อนาทีสำหรับ 10 นาทีที่อุณหภูมิห้อง, รวบรวมส่วนเหนือตะกอนและเก็บไว้บนน้ำแข็งเพื่อทำการทดสอบ.
2. ไวน์แดง, น้ำผลไม้, และตัวอย่างของเหลวอื่นๆ: เอา 100 ไมโครลิตรของสารละลายตัวอย่างแล้วเติม 900 ไมโครลิตรของสารละลายสารสกัด. กระแสน้ำวนผสม, เครื่องหมุนเหวี่ยงที่อุณหภูมิห้อง, 10000 รอบต่อนาทีสำหรับ 10 นาที, รวบรวมส่วนเหนือตะกอนและเก็บไว้บนน้ำแข็งเพื่อทำการทดสอบ.
3. การสกัดหรือยา: เตรียมความเข้มข้นด้วยสารสกัดโซลูชั่น, เช่น 5 มก./มล.

บันทึก: ความสามารถของตัวอย่างต่างๆ ในการกำจัดอนุมูลอิสระ ABTS อาจแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญ. เพื่อให้เกิดความถูกต้องแม่นยำ, ปรับตัวอย่างตามผลลัพธ์เบื้องต้น.

ครั้งที่สอง. ขั้นตอนการกำหนด:

1. เปิดเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ก่อน 30 นาที, ตั้งค่าความยาวคลื่นเป็น 405 นาโนเมตร, และศูนย์ด้วยน้ำกลั่น.
2. การเตรียมการควบคุมเชิงบวก: เตรียมก 10 สารละลายวิตามินซี mmol/L พร้อมสารสกัด. สำหรับความสัมพันธ์เชิงเส้น, เตรียมตัว 1, 0.8, 0.6, 0.4, 0.2, และ 0.1 สารละลายวิตามินซี มก./มล. สำหรับการควบคุมเชิงบวกโดยมีอัตราการกวาดล้างประมาณ 90%, เตรียมสารละลายวิตามินซีที่มีขนาดใหญ่กว่า 1.5 มิลลิโมล/ลิตร.
3. ตารางปฏิบัติการ: เติมรีเอเจนต์ต่อไปนี้ลงในเพลต 96 หลุมหรือท่อ EP, ตามลำดับ:

ชื่อรีเอเจนต์	หลอดเปล่า (บี)	หลอดทดลอง (ต)	หลอดควบคุม (ค)	หลอดควบคุมเชิงบวก (พีซี)
เหนือตะกอน	50	50		50
วีซี โซลูชั่น				50
น้ำกลั่น	50		50
สารละลายรีเอเจนต์ IV	100	100	100	100
โซลูชั่นการทำงานของ ABTS	850	850	850	850
รีเอเจนต์ I	950

หลังจากผสมให้เข้ากันแล้ว, ฟักตัวอยู่ในความมืดเพื่อ 6 นาทีที่อุณหภูมิห้อง. วัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 405 นาโนเมตร. บันทึกค่าการดูดกลืนแสงของหลอดเปล่า, หลอดควบคุม, หลอดควบคุมเชิงบวก, และหลอดทดลองเป็น AB, เครื่องปรับอากาศ, เอพีซี, และ AT ตามลำดับ. จำเป็นต้องทดสอบท่อเปล่า 1-2 ครั้ง.

สาม. การคำนวณอัตราการกำจัดอนุมูลอิสระของ ABTS:

1. การจัดตั้งเส้นโค้งมาตรฐาน: สูตรสำหรับอัตราการกำจัดอนุมูลอิสระของกลุ่มควบคุมเชิงบวก: อัตราการกำจัดอนุมูลอิสระของ ABTS DVC% = [(เอบี-เอพีซี) ۞ AB] × 100%
2. สูตรการคำนวณอัตราการกำจัดอนุมูลอิสระตัวอย่าง: อัตราการกำจัดอนุมูลอิสระของ ABTS D% = [เอบี – (เอที-เอซี)] ۞ AB] × 100%.

บันทึก:

1. เพื่อเปรียบเทียบความสามารถในการกำจัดของตัวอย่างต่างๆ, ขอแนะนำให้เพิ่มตัวอย่างในปริมาณเท่ากันลงในชุดเดียวกัน, ปรับตามผลการทดลองก่อน. ระหว่างการเปรียบเทียบ, ปรับตัวอย่างตามผลลัพธ์, เปรียบเทียบอัตราการกวาดล้างที่ความเข้มข้นเดียวกัน (อัตราส่วนการเจือจาง).
2. ควรเก็บตัวอย่างและทดสอบในวันเดียวกัน.

ตัวอย่างการทดลอง:

เอา 0.05 กรัมพริกแล้วเติม 1 มิลลิลิตรของสารละลายสารสกัดเพื่อทำให้เป็นเนื้อเดียวกัน. หลังจากการปั่นแยก, รวบรวมส่วนเหนือตะกอนและดำเนินการตามขั้นตอนการกำหนด. คำนวณอัตราการกวาดล้าง: ด% = [เอบี – (เอที-เอซี)] ۞AB] × 100% - [1.330-(0.468-0.022)]۞ 1.330×100% = 66.466%

สินค้าที่เกี่ยวข้อง:

• BC4750/BC4755: ชุดทดสอบความสามารถในการกำจัดอนุมูลอิสระของ DPPH
• BC1310/BC1315: ความจุสารต้านอนุมูลอิสระทั้งหมด (ที-เอโอซี) ชุดทดสอบ
• BC1320/BC1325: ชุดทดสอบความสามารถในการกำจัดอนุมูลของไฮดรอกซิล