ภาพรวมผลิตภัณฑ์
พีซีอาร์ amplification of DNA fragments, DNA labeling, primer extension, sequence determination, blunt end addition of A, TA vector cloning
| ข้อมูลผลิตภัณฑ์ | |
|---|---|
| น้ำหนักโมเลกุล | 94 เคดี |
| Polymerase Activity | 5′-3′ ดีเอ็นเอโพลีเมอเรส, 5′-3′ exonuclease (no 3′-5′ exonuclease) |
| บัฟเฟอร์ PCR | 10 X PCR Buffer for direct loading |
| Experimental Efficiency | The PCR reaction can be directly detected by electrophoresis |
| Extension Speed | 1-2 kb/min |
| Terminal Base | Product has A at the 3′ จบ, facilitating TA vector cloning |
| ระบบปฏิกิริยา (20ไมโครลิตร) | Addition Amount | Remarks |
|---|---|---|
| Pure DNA Polymerase | 0.8ไมโครลิตร | Adjust for amplification needs |
| 10x PCR Buffer | 2ไมโครลิตร | |
| ดีเอ็นทีพี (2.5มม) | 2ไมโครลิตร | |
| PrimerF | 0.1-1ไมโครลิตร | 10-50pmol used |
| PrimerR | 0.1-1ไมโครลิตร | 10-50pmol used |
| เทมเพลต | <1มก | |
| ddH2O | Up to 20μl |
| Cycle Program | อุณหภูมิ (องศาเซลเซียส) | เวลา | Remarks |
|---|---|---|---|
| Initial Denaturation | 94 | 3นาที | |
| การเสียสภาพ | 94 | 30ส (30-40 รอบ) | |
| การหลอม | 45-60 | 30ส | |
| ส่วนขยาย | 72 | 30s-2min | Extension time varies with fragment |
| ส่วนขยายสุดท้าย | 72 | 10นาที |
ขั้นตอน
Can be directly detected without adding a Loading Buffer
Result Detection
หลังจาก PCR, เอา 5 μl of product for agarose gel electrophoresis
รีวิว
ยังไม่มีบทวิจารณ์