คำแนะนำ:
-
การเก็บตัวอย่าง:
- เก็บรวบรวม 0.1-1 ตัวอย่างเลือด มล.
-
การจัดเตรียมตัวอย่าง:
- เพิ่ม 2-3 คูณปริมาตรของ 1x เม็ดเลือดแดงไลซีนกับตัวอย่างเลือด.
- กลับด้านและผสมให้เข้ากัน.
- เครื่องปั่นแยกที่ 12,000 รอบต่อนาทีสำหรับ 1 นาที.
- นำส่วนเหนือตะกอนออกอย่างระมัดระวัง. ตะกอนควรเป็นสีขาวหรือสีแดงอ่อน.
- เพิ่ม 400 μl รีเอเจนต์บัฟเฟอร์ I และ 10 ไมโครลิตรโปรตีเอสเค (10 มก./มล) เพื่อการตกตะกอน.
- กระแสน้ำวนและผสมให้เข้ากัน 15 วินาที, แล้วพักไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลาหนึ่ง 2 นาที.
-
กรณีพิเศษ: สิ่งมีชีวิตระดับต่ำ:
- หากแปรรูปเลือดจากสัตว์ปีก, นก, หรือสิ่งมีชีวิตระดับต่ำอื่น ๆ ที่เซลล์เม็ดเลือดแดงมีนิวเคลียส:
- ไม่จำเป็นต้องเพิ่ม 1x erythrocyte lysate.
- เพิ่มโดยตรง 200 ไมโครลิตรของบัฟเฟอร์รีเอเจนต์ I (ปริมาณรวมไม่เกิน 500 ไมโครลิตร).
- ปล่อยให้นั่งที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 2 นาที.
-
การย่อย:
- เพิ่ม 10 ไมโครลิตรโปรตีเอสเค (10 มก./มล) ไปจนถึงส่วนผสม.
- ผสมให้เข้ากันโดยผกผัน.
- ย่อยที่อุณหภูมิ 65°C เป็นเวลา 10 นาที.
- พลิกกลับและผสม 6-7 ครั้งระหว่างการย่อยอาหารจนเสร็จสมบูรณ์.
-
ถ่ายโอนไปยังแผ่นรีเอเจนต์:
- เพิ่มไลซีนจากขั้นตอนก่อนหน้าลงในเพลตรีเอเจนต์ 96 หลุม.
- ปฏิบัติตามขั้นตอนเฉพาะที่ระบุไว้ในโปรโตคอลการสกัดอัตโนมัติเพื่อการประมวลผลต่อไป.