การแนะนำ
The Kit is designed for purification of total RNA, including miRNA and other small RNA molecules (18nt), from cultured cells and various animal and human tissues, including difficult-to-lyse tissues samples. อีกทางหนึ่ง, a miRNA-enriched fraction and a total RNA (>200nt) fraction can be purified separately. This Kit combines phenol/กัวนิดีน-based lysis of samples and silica membrane–based purification of total RNA. รีเอเจนต์แม็กโซล, included in the kits, is a monophasic solution of phenol and guanidine thiocyanate, designed to facilitate lysis of tissues, to inhibit RNases, and also to remove most of the cellular DNA and proteins from the lysate by organic extraction.
รายละเอียด
ข้อมูลจำเพาะ
คุณสมบัติ | ข้อมูลจำเพาะ |
ฟังก์ชั่นหลัก | Isolation miRNA and other small RNA molecules(18nt), from cultured cells and various animal and human tissues, using MagZol reagent and column |
การใช้งาน | RT-พีซีอาร์, Northern Blot, poly A+purification, nucleic acid protection and in vitro translation |
วิธีการทำให้บริสุทธิ์ | มินิ คอลัมน์หมุน |
เทคโนโลยีการทำให้บริสุทธิ์ | เทคโนโลยีซิลิก้า |
วิธีการประมวลผล | คู่มือ (การหมุนเหวี่ยงหรือสุญญากาศ) |
ประเภทตัวอย่าง | เนื้อเยื่อของสัตว์, adherent cells, suspension cells, แบคทีเรีย, ฯลฯ |
จำนวนตัวอย่าง | Eukaryotic culture cells: ≤ 10^7, Animal tissue:<100มก, Yeast culture cells:<5 x10^7, แบคทีเรีย:<10^9 |
ปริมาณการชะล้าง | ≥15ไมโครลิตร |
เวลาต่อการวิ่ง | ≤40 minutes |
ปริมาณการบรรทุกของเหลวต่อคอลัมน์ | 800มล |
ผลผลิตที่มีผลผูกพันของคอลัมน์ | 100มก |
หลักการ
Hipure silica gel column is based on glass fiber filter membrane with high binding force. Under the condition of high concentration of ionizing agent (such asguanidine hydrochloride or guanidine isothiocyanate), the filter membrane can adsorb nucleic acid through hydrogen bond and electrostatic, while protein andother impurities are not adsorbed and removed. The filter membrane adsorbed with nucleic acid is washed to remove the residual protein and salt. ในที่สุด, the nucleic acid adsorbed on the filter membrane can be washed out with low salt buffer (such as buffer TE) or water. The obtained nucleic acid has high purity and can be directly used in various downstream experiments.
This kit combines acid/guanidine (MagZol) extraction technology with glass fiber filter membrane purification, which can improve the extraction effect of complex samples and samples with low RNA content. After the sample is treated with MagZol reagent and chloroform, the supernatant is added with ethanol to provide appropriate binding conditions, then transferred to the purification column and centrifuged. Macromolecular RNA can be efficiently bound to the membrane. Collect the filtrate containing small RNA, add more ethanol to adjust the binding capacity of small RNA, the pollutants can be efฉiciently washed away by second cleaning. ในที่สุด, the purified RNA was eluted by RNase free water.
ข้อดี
- คุณภาพสูง – ขั้นตอนเดียว การสกัดอาร์เอ็นเอ reagent combined with silica gel column can obtain the highest concentration
- เร็ว – สามารถดึงตัวอย่างออกมาได้หลายตัวอย่าง 40 นาที
- High applicability – samples including animals, พืช, แบคทีเรีย, เซลล์, ฯลฯ.
- ความเข้มข้นสูง – efficiently remove macromolecular RNA, enrich small RNA and improve sensitivity
เนื้อหาชุด
สารบัญ | R431002 | R431003 |
เวลาการทำให้บริสุทธิ์ | 50 การเตรียมการ | 250 การเตรียมการ |
คอลัมน์ขนาดเล็ก HiPure RNA | 100 | 2 x 250 |
2หลอดเก็บมล | 100 | 2 x 250 |
รีเอเจนต์แม็กโซล | 60 มล | 270 มล |
Buffer RWC | 20 มล | 80 มล |
บัฟเฟอร์ RW2* | 20 มล | 2 x 50 มล |
น้ำเปล่า RNase | 10 มล | 30 มล |
การจัดเก็บและความเสถียร
MagZol Reagent should be stored at 2-8°C upon arrival. อย่างไรก็ตาม, การจัดเก็บระยะสั้น (จนถึง 24 สัปดาห์) ที่อุณหภูมิห้อง (15-25องศาเซลเซียส) ไม่ส่งผลกระทบต่อประสิทธิภาพการทำงาน. ส่วนประกอบชุดอุปกรณ์ที่เหลือสามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องได้ (15-25องศาเซลเซียส) และมีเสถียรภาพเป็นอย่างน้อย 18 เดือนภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้.
รีวิว
ยังไม่มีบทวิจารณ์