การแนะนำ
เลือดเป็นแหล่ง DNA ที่มีคุณค่าสำหรับการใช้งานทางคลินิกและการศึกษาวิจัยต่างๆ. อย่างไรก็ตาม, การสกัด DNA จากตัวอย่างเลือดทำให้เกิดความท้าทายหลายประการ:
ข้อกังวลด้านความปลอดภัย:
- ตัวอย่างเลือดสามารถเป็นแหล่งสะสมเชื้อโรคได้, ก่อให้เกิดความเสี่ยงต่อการติดเชื้อต่อนักวิจัยและการปนเปื้อนในสภาพแวดล้อมของห้องปฏิบัติการ.
- วิธีการแบบดั้งเดิมมักเกี่ยวข้องกับสารเคมีอันตราย เช่น ฟีนอล-คลอโรฟอร์ม.
การสูญเสียดีเอ็นเอ:
- การกำจัดเซลล์เม็ดเลือดแดง, ขั้นตอนก่อนการรักษาทั่วไปอาจทำให้สูญเสียเศษส่วน DNA ที่ต้องการ เช่น DNA ของไวรัส, DNA หมุนเวียน, และดีเอ็นเอของจุลินทรีย์.
สิ่งสกปรกและสารยับยั้ง:
- เลือดประกอบด้วยส่วนประกอบต่างๆ ที่สามารถรบกวนการวิเคราะห์ขั้นปลายน้ำได้ เช่น พีซีอาร์ และซับใต้.
เทคโนโลยีใหม่เพื่อการสกัด DNA ในเลือดที่ดีขึ้น:
ผลิตภัณฑ์นี้นำเสนอแนวทางใหม่ในการจัดการกับความท้าทายเหล่านี้:
- ปลอดภัยและมีประสิทธิภาพ: วิธีนี้ช่วยลดความจำเป็นในการกำจัดเซลล์เม็ดเลือดแดง, ลดขยะติดเชื้อและการปนเปื้อนที่อาจเกิดขึ้น.
- การกู้คืน DNA ที่ครอบคลุม: โปรโตคอลช่วยให้สามารถชำระ DNA ทั้งหมดให้บริสุทธิ์ได้, รวมทั้งจีโนมด้วย, ไมโตคอนเดรีย, ไวรัส, และดีเอ็นเอหมุนเวียน, ทำให้ได้ภาพการวิเคราะห์ที่สมบูรณ์ยิ่งขึ้น.
- ความเข้ากันได้ของตัวอย่างในวงกว้าง: วิธีการนี้จะทำให้ DNA บริสุทธิ์จากส่วนประกอบต่างๆ ของเลือด เช่น เลือดครบส่วนได้อย่างมีประสิทธิภาพ (สดหรือแช่แข็ง), พลาสมา, เซรั่ม, บัฟฟี่โค้ต, และอื่น ๆ.
- การใช้งานขั้นปลายน้ำ: DNA คุณภาพสูงที่สกัดออกมาเหมาะสำหรับการวิเคราะห์ PCR และ Southern blotting ที่เชื่อถือได้.
โซลูชันที่เป็นนวัตกรรมนี้ช่วยลดความยุ่งยากในการสกัด DNA ในเลือดพร้อมรับประกันความปลอดภัย, ประสิทธิภาพ, และการกู้คืน DNA ที่ครอบคลุม. ซึ่งแสดงถึงความก้าวหน้าครั้งสำคัญสำหรับนักวิจัยที่ทำงานในสาขาต่างๆ เช่น การวินิจฉัย, นิติเวช, และการวิจัยทางการแพทย์.
ข้อมูลจำเพาะ
| คุณสมบัติ | ข้อมูลจำเพาะ |
| ฟังก์ชั่นหลัก | แยก DNA ทั้งหมดออกจากเลือดครบส่วน 200ul |
| การใช้งาน | พีซีอาร์, เซาท์เทิร์นโบลต์และการตรวจจับไวรัส, ฯลฯ |
| วิธีการทำให้บริสุทธิ์ | มินิ คอลัมน์หมุน |
| เทคโนโลยีการทำให้บริสุทธิ์ | เทคโนโลยีซิลิก้า |
| วิธีการประมวลผล | คู่มือ (การหมุนเหวี่ยงหรือสุญญากาศ) |
| ประเภทตัวอย่าง | เลือดทั้งหมด (สดหรือแช่แข็ง), เซรั่ม, พลาสมา, น้ำนม, น้ำลาย, และตัวอย่างของเหลวอื่นๆ และเซลล์เพาะเลี้ยง |
| จำนวนตัวอย่าง | <200μl เลือดครบส่วนหรือตัวอย่างของเหลวอื่นๆ, <5*106 ลิมโฟไซต์หรือเซลล์เพาะเลี้ยง สัตว์ที่ไม่ใช่สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมซึ่งมีนิวเคลียสอยู่ในเซลล์เม็ดเลือดแดง (อุดมไปด้วยดีเอ็นเอ, เช่นนกและปลา): 5เลือดครบประมาณครั้งละ ~20ไมโครลิตร. |
| ปริมาณการชะล้าง | ≥20ไมโครลิตร |
| เวลาต่อการวิ่ง | ≤30นาที |
| ปริมาณการบรรทุกของเหลวต่อคอลัมน์ | 800มล |
| ผลผลิตที่มีผลผูกพันของคอลัมน์ | 100มก |
หลักการ
วิธีการนี้เป็นแนวทางที่เชื่อถือได้และสะดวกสบายสำหรับนักวิจัยที่ทำงานในสาขาต่างๆ ที่ต้องการ DNA บริสุทธิ์เพื่อการวิเคราะห์, เช่น พีซีอาร์, การซับใต้, และการเรียงลำดับรุ่นต่อไป.
การทำให้บริสุทธิ์ DNA อย่างมีประสิทธิภาพด้วยเทคโนโลยีคอลัมน์ซิลิกา
ผลิตภัณฑ์นี้ใช้วิธีการแบบคอลัมน์ซิลิกาเพื่อการฟอก DNA ที่รวดเร็วและมีประสิทธิภาพ. นี่คือรายละเอียดของกระบวนการ:
- ตัวอย่างการสลายและการย่อยอาหาร: ตัวอย่างจะได้รับการบำบัดด้วยสารละลายไลเซตและโปรตีเอสเพื่อสลายเยื่อหุ้มเซลล์และลดระดับโปรตีน. สิ่งนี้จะปล่อย DNA เข้าสู่สารละลาย.
- ยึดเกาะกับซิลิกาเมมเบรน: ไลซีนที่มี DNA จะถูกถ่ายโอนไปยังคอลัมน์ซิลิกา. เมมเบรนซิลิกาในคอลัมน์จับโมเลกุล DNA โดยเฉพาะผ่านปฏิกิริยาที่เป็นประโยชน์. โปรตีนและสิ่งสกปรกอื่นๆ ยังคงไม่ถูกผูกมัด.
- ซักผ้า: บัฟเฟอร์การซักจะถูกส่งผ่านคอลัมน์, กำจัดโปรตีนและเศษเซลล์ที่ไม่ได้เกาะติดกันซึ่งไม่เกาะติดกับเยื่อหุ้มซิลิกา.
- ชะล้าง: ในที่สุด, บัฟเฟอร์เกลือต่ำ (โดยทั่วไป 10 เอ็มเอ็ม ทริส, ค่า pH 9.0, และ 0.5 เอ็มเอ็ม เอ็ดต้า) ใช้เพื่อชะล้าง DNA บริสุทธิ์จากเยื่อหุ้มซิลิกา. บัฟเฟอร์นี้ขัดขวางปฏิสัมพันธ์ระหว่าง DNA และซิลิกา, ทำให้สามารถเก็บ DNA บริสุทธิ์ไว้ในหลอดแยกได้.
ข้อดี
- ดีเอ็นเอคุณภาพสูง – ตอบโจทย์การใช้งานดาวน์สตรีมที่หลากหลาย, รวมถึง PCR, คิวพีซีอาร์, การย่อยของเอนไซม์, การผสมพันธุ์, ฯลฯ.
- เร็ว – โดยไม่มีการแยกตัวของเม็ดเลือดขาว, การสกัดแบบอินทรีย์, หรือการตกตะกอนของเอธานอล
- เรียบง่าย – กรดนิวคลีอิกทั้งหมดสามารถได้รับจากการย่อยโดยตรง
- การบังคับใช้ที่กว้าง- จัดการกับตัวอย่างของเหลวที่หลากหลาย
เนื้อหาชุด
| สารบัญ | D311102 | D311103 |
| เวลาการทำให้บริสุทธิ์ | 50 | 250 |
| คอลัมน์ขนาดเล็ก HiPure DNA I | 50 | 2 x 125 |
| 2หลอดเก็บมล | 100 | 5 x 100 |
| บัฟเฟอร์ อัล | 15 มล | 60 มล |
| บัฟเฟอร์ DW1 | 30 มล | 150 มล |
| บัฟเฟอร์ GW2* | 12 มล | 50 มล |
| โปรตีนเค | 24 มก | 120 มก |
| บัฟเฟอร์ละลายโปรตีเอส | 1.8 มล | 10 มล |
| บัฟเฟอร์ AE | 15 มล | 60 มล |
การจัดเก็บและความเสถียร
เพื่อประสิทธิภาพสูงสุด:
- เก็บโปรตีเนส K ที่อุณหภูมิ 2-8°C (ตู้เย็น) เมื่อมาถึง.
การจัดเก็บระยะสั้นที่ยอมรับได้:
- Proteinase K สามารถเก็บไว้ได้นานถึง 12 สัปดาห์ที่อุณหภูมิห้อง (15-25องศาเซลเซียส) โดยไม่กระทบต่อประสิทธิภาพการทำงาน.
ส่วนประกอบชุดที่เหลืออยู่:
- เก็บส่วนประกอบอื่นๆ ทั้งหมดของชุดให้แห้งที่อุณหภูมิห้อง (15-25องศาเซลเซียส).
- พวกเขามีเสถียรภาพอย่างน้อย 18 เดือนภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้.
หมายเหตุสำคัญ:
- หากเก็บทั้งชุดไว้ที่อุณหภูมิห้อง, ตรวจสอบให้แน่ใจว่าบัฟเฟอร์ละลายหมดก่อนใช้งาน และอุ่นบัฟเฟอร์ทั้งหมดจนถึงอุณหภูมิห้องก่อนใช้งานเสมอ.
