Примечание:Этот продукт необходимо упаковать в мешки со льдом и отправить через FedEx или UPS..
Он прибудет в течение 7-10 дни. Стоимость доставки включена в стоимость товара.
Основные компоненты и содержание:
| Компоненты | ЭД2304001-01(24Т) | ЭД2304001-02(50Т) |
| флуоресцентный ПЦР реакционный раствор | 500мкл на пробирку × 1 трубка | 1200мкл на пробирку × 1 трубка |
| Положительный контроль | 50мкл на пробирку × 1 трубка | 200мкл на пробирку × 1 трубка |
| Отрицательный контроль | 50мкл на пробирку × 1 трубка | 200мкл на пробирку × 1 трубка |
| Руководство | 1 | 1 |
Функция и цель:
Используется для обнаружения целевых нуклеиновых кислот в различных образцах, включая цельную кровь., сыворотка, лимфатические узлы, селезенка, мышцы, и другие.
Дозировка и определение:
1 Инструкции по использованию
1.1 Образец обработки
Обрабатывайте образцы в соответствии с действующими стандартами и сохраняйте обработанные образцы для последующего использования..
1.2 Экспериментальная процедура
1.2.1 Зона подготовки реагентов
Снимите набор реагентов, достать необходимые реагенты для эксперимента, разморозить и тщательно перемешать, затем кратковременно центрифугируйте для 5 секунд, чтобы удалить жидкость, прилипшую к стенкам трубки.;
Добавьте 20 мкл реакционного раствора флуоресцентной ПЦР в каждую пробирку для ПЦР и перенесите его в зону подготовки проб..
1.2.2 Зона подготовки проб
Добавьте по 5 мкл каждого отрицательного контроля., нуклеиновая кислота исследуемого образца, и положительный контроль. Кратко центрифуга для 5 секунды и перенос в зону усиления.
1.2.3 Площадь усиления
Поместите каждую пробирку для ПЦР в соответствующие положения слотов для образцов прибора и запишите последовательность размещения..
Установите параметры амплификации нуклеиновых кислот прибора в соответствии с таблицей ниже и выполните ПЦР-амплификацию..
| Система реакции | 25мкл реакционной системы | ||
| Сигнальный канал | Канал FAM для сбора флуоресцентных сигналов | ||
| Условия реакции ПЦР | Этап | Условия | Циклы |
| Предварительная денатурация | 95℃：3мин | 1 | |
| ПЦР | 95℃：15сек | 40 | |
| 60℃：30сек | |||
2 Интерпретация результата
2.1 Создание экспериментальных условий:
2.1.1 Положительный контроль: Значение Ct ≤ 30, демонстрируя явный экспоненциальный рост, демонстрируя типичный «С» изгиб.
2.1.2 Отрицательный контроль: Значение Ct > 38 или нет значения Ct, отсутствие четкой фазы экспоненциального роста или плато.
2.2 Критерии определения:
2.2.1 Позитивный: Результат обнаружения образца Значение Ct ≤ 35, демонстрируя явный экспоненциальный рост, указывая на наличие целевой ДНК в образце.
2.2.2 Подозреваемый: Результат обнаружения образца Значение Ct между 35 и 38; образец следует протестировать повторно. Если в результате повторного эксперимента значения Ct все еще находятся между 35 и 38 с явным экспоненциальным ростом, это считается положительным; в противном случае, это отрицательно.
2.2.3 Отрицательный: Результат обнаружения образца Значение Ct > 38 или нет значения Ct, что указывает на отсутствие целевой ДНК в образце.
Меры предосторожности:
- До эксперимента, внимательно прочтите данное руководство к набору реагентов и строго следуйте инструкциям по эксплуатации..
- Храните все реагенты при указанных температурах.; Подробная информация доступна на этикетках реагентов..
- Обработка проб должна происходить в боксе биобезопасности.. После эксперимента, подвергнуть все использованные образцы и материалы высокотемпературной стерилизации.
- Чтобы предотвратить перекрестное загрязнение, работать в среде, максимально свободной от нуклеаз, и сегментировать экспериментальный процесс (участок подготовки реагентов, зона подготовки проб, площадь усиления, и т. д.).
- При подготовке реакционной системы ПЦР, старайтесь избегать образования пузырей. До усиления, проверьте, плотно ли закрыты реакционные пробирки, чтобы предотвратить утечку и загрязнение прибора..
- Этот набор можно использовать со стандартными методами очистки экстракцией нуклеиновых кислот для тестирования образцов., поддержание постоянных параметров оценки, таких как значения Ct.
- Для обеспечения точных результатов эксперимента, пробы следует брать свежесобранными и транспортировать при температуре 2–8°C.; для перевозки на дальние расстояния, используйте сухой лед.
- Избегайте многократного замораживания и оттаивания всех реагентов..
Технические характеристики: 24 Т/коробка, 50 Т/коробка
Хранение и срок годности: Хранить при -20°C., вдали от света. Срок годности 12 месяцы.
