Набор для экстракции геномной ДНК в почве Solarbio

Содержимое комплекта

Примечание: После открытия, Решение а, Б, С, D следует хранить в 2-8 ℃. Улучшитель ПЦР должен храниться при -20 ℃.

Описание продукта

• Пригодность и эффективность:
  • Земля Экстракция геномной ДНК Комплект идеально подходит для извлечения микробной ДНК из экстремальных почвенных средств, таких как коричная почва, грязь, Вулканический пепел, и т. д..
  • Эффективно лизирует бактерии и грибы, Сохранение разнообразия микробной ДНК.
• Удаление гумуса:
  • Использование уникального адсорбционного материала гумуса для эффективного и специфического удаления различных компонентов гумуса.
  • Этот процесс не ставит под угрозу урожайность, и чистота значительно выше по сравнению с методом извлечения фенол-хлороформ.
• Выход и целостность ДНК:
  • Извлеченные урожайности ДНК являются существенными, и целостность в хорошем состоянии.
  • Извлеченная ДНК подходит для различных рутинных операций, включая пищеварение ферментов, ПЦР, Библиотека строительство, Южное пятно, и т. д..

Протокол

Добавить свежий открытый абсолютный этанол в стиральный буфер перед использованием, Том основан на этикетке бутылки в качестве ссылки. Положите кепку обратно на бутылку и хорошо встряхните. Все ступени центрифуги выполняются при комнатной температуре (15℃ -25 ℃).

1. Метод а: Взвесить образец почвы 0,1-0,5 г, Добавить почву в раствор, Вылейте правильное количество жидкого азота, размолоть немедленно, и повторить три раза. Когда почва превращается в порошок, Добавить раствор 450ul A, и продолжайте встряхивать 1-2 минуты, пока растворенное вещество не будет полностью приостановлено.

Метод б: Взвесить образец почвы 0,1-0,5 г в центрифужной трубке (Лучше использовать 2 мл круглого дна), Добавить раствор 450ul A, и продолжайте встряхивать 1-2 минуты до полного приостановки растворенного вещества. Примечание: Эффект измельчения с помощью жидкого азота будет лучше.

2. Добавить раствор 50UL B, и инвертировать трубку несколько раз, чтобы полностью смешивать (Не встряхнешь). Инкубировать при 65 ℃ водяной бане для 6 мин, инвертировать, и смешать каждый 2 мин.
3. Добавить раствор 100ul C, и инвертировать трубку несколько раз, чтобы полностью смешивать (Не встряхнешь). Центрифуга в, 12000об/мин для 10 мин.
4. Передача супернатанта в новую центрифужную трубку, центрифуга в, 12000об/мин для 10 мин.
5. Добавить раствор 200юл D в колонку адсорбции, Добавить супернатант центрифугирован с шага 4 к адсорбционной колонке, Полностью смешанный пипеткой. Центрифуга при 12000 об / мин для 1 мин.
6. Полностью смешать фильтрат в сборе трубки, Добавьте его в столбец адсорбции, и центрифуга при 12000 об / мин для 1 мин.
7. Снимите отработанную жидкость в сборочной трубке, Добавить 500UL для мытья буфера в адсорбционную колонку, и центрифуга при 12000 об / мин для 10 мин.
8. Повторить шаг 7 дважды (промыть три раза в общей сложности).
9. Снимите отработанную жидкость в сборочной трубке, Поместите адсорбционную колонку обратно в трубку для сбора, и центрифуга при 12000 об / мин для 2 мин.
10. Высушить адсорбционную колонну при комнатной температуре(15℃ -25 ℃) в течение нескольких минут или в 50 ℃ для 1 минута.
11. Поместите адсорбционную колонку в новую центрифужную трубку, Добавить буфер для мытья 50-100UL (разогреть в 65 ℃ перед использованием), и центрифуга при 12000 об / мин для 1 мин.
12. Добавить фильтрат в центрифужную трубку в адсорбционную колонку, центрифуга при 12000 об / мин для 1 мин. Жидкость в центрифужной трубке - это раствор для экстракции ДНК в почве.
13. Если эффект ПЦР ДНК не очень хороший, правильно разбавить концентрацию ДНК или добавить 1/10 Объем усилителя ПЦР.

Примечания

1. Свежие образцы почвы получат более высокий урожай. И лучше ссылаться на правильные условия сохранения для разных образцов.
2. Если решение показывает осадки, Переживание в 37 ℃ на водяной бане на мгновение, Осадки исчезнут, и это не влияет на экстракцию ДНК.
3. Принимая супернатант, это должно избежать осадков, в противном случае, он заблокирует колонку поглощения и повлияет на чистоту продукта.
4. Объем буфера элюции не должен быть менее 50ul, Если объем слишком мал, это повлияет на восстановление, это предлагается использовать буфер элюирования, предоставленный комплектом, Использование воды в качестве буфера элюирования потеряет часть ДНК. Извлеченная ДНК должна храниться при -20 ℃ и избегать повторных циклов замораживания -оттаивания, чтобы предотвратить деградацию ДНК.
5. Если продукт содержит остаточный гумус, это серьезно повлияет на поглощение ДНК, Таким образом, это должно быть идентифицировано с помощью комбинации обнаружения электрофореза и спектрофотометра
6. Избегайте касания жидких реагентов, В случае случайного контакта, сразу же промойте большим количеством воды.

сопутствующие товары

• T1050 5 × TBE Buffer
• T1060 50 × TAE Buffer
• M1400 1KB ДНК -лестница
• M1060 D2000 ДНК -лестница
• D1010 6 × буфер нагрузки ДНК
• G8142 Goldview II ядерные окрашивающие красители (5000×)
• D1500 Genomic DNA Extraction Kit
• D1600 бактериальная геномная набор для экстракции ДНК
• D1700 Ткани животных/клетки геномная ДНК набор для экстракции ДНК D1800 Набор для экстракции ДНК крови (Спин -колонка)