Набор для анализа белка Solarbio BCA 50T

БСА (Бицинхониновая кислота) Комплект для анализа белков является широко используемым колориметрическим методом для количественной оценки концентраций белка в образце. Этот анализ опирается на уменьшение ионов Cu^2+ до Cu^1+ белками в щелочных условиях, формирование фиолетового комплекса с бицинхониновой кислотой. Интенсивность цвета прямо пропорциональна концентрации белка, Включение точного количественного определения.

Вот пошаговое руководство о том, как использовать БСА-белок Набор для анализа:

Требуемые материалы:

1. Набор для анализа белка BCA
2. Белковые стандарты (бычий сывороточный альбумин обычно используется)
3. Образец, содержащий неизвестные концентрации белка
4. Микропланшет или кюветы
5. Микропипетки и наконечники
6. Ридер для микропланшетов или спектрофотометр
7. Дистиллированная вода

Процедура:

1. Приготовление белковых стандартов:
   • Подготовьте серию белковых стандартов с известными концентрациями.. Эти стандарты будут использоваться для создания стандартной кривой для количественного определения.. Общие концентрации 0, 0.125, 0.25, 0.5, 0.75, и 1.0 мг/мл.
2. Подготовка образца:
   • Разбавьте образец вашего белка до подходящей концентрации в линейном диапазоне анализа. При необходимости, Возможно, вам придется выполнить предварительное разведение, чтобы гарантировать, что образец попадает в стандартную кривую.
3. Приготовление рабочего реагента BCA:
   • Смешайте реагент BCA A и BCA Реагент B в 50:1 соотношение (обычно предоставляется в комплекте). Обеспечьте тщательное перемешивание.
4. Добавление стандартов и образца:
   • Аликвоты пипетки стандартов белка и образца в отдельные скважины микропланшета. Каждый стандарт и образец должны быть запущены в двух экземплярах или трех экземплярах.
5. Добавление рабочего реагента BCA:
   • Добавьте соответствующий объем рабочего реагента BCA в каждую скважину, содержащие стандарты и образцы. Тщательно перемешать.
6. Инкубация:
   • Инкубируйте микроплантинг при соответствующей температуре (Обычно 37 ° C.) для 30 минуты, чтобы позволить цветовой реакции.
7. Измерение:
   • Измерить поглощение каждой скважины в 562 нм с использованием микропланшетного ридера или спектрофотометра.
8. Создание стандартной кривой:
   • Постройте график значений поглощения стандартов в зависимости от их известных концентраций, чтобы построить стандартную кривую..
9. Количественная оценка образца:
   • Используйте стандартную кривую, чтобы определить концентрацию белка вашего образца на основе его поглощения.
10. Анализ данных:
    • Рассчитайте концентрацию белка в образце на основе стандартной кривой. У большинства читателей микропланшетов есть программное обеспечение, которое может помочь в этом анализе.

Отзывы клиентов о продуктах Solarbio для справки