Sanshibio 2× SYBR Green Смесь для ПЦР

предмет номер： EH003 Спецификация：1мл Хранение: Хранить при -20°C.

Внедрение продукции：

• Специализированный реагент для реального времени ПЦР используя СИБР Флуоресцентный метод на основе красителя Green I.
• Содержит блокируемый антителами фермент горячего старта для подавления неспецифической амплификации, вызванной димеризацией праймеров или неспецифическим отжигом праймеров в условиях низкой температуры..
• Повышает специфичность реакции амплификации..
• Имеет высокую эффективность усиления., высокая специфичность и чувствительность обнаружения, хорошая стабильность, и простота эксплуатации.
• Формирует надежную стандартную кривую в широком количественном диапазоне., Включение точного количественного определения.
• Совместимость с различными приборами для количественной флуоресцентной ПЦР., в том числе из Applied Biosystems, Эппендорф, Био-Рад, Рош, и другие отечественные бренды.

Содержание продукта：

Примечание：

• Эталонный краситель ROX исправляет ошибки сигнала межлуночной флуоресценции в некоторых приборах для амплификации ПЦР в реальном времени..
• Эталонный краситель ROX I подходит для ABI PRISM 7000/7700/7300/7900HT и системы ПЦР в реальном времени Step One Plus..
• ROX Reference Dye II совместим с 7500 Система ПЦР в реальном времени, 7500 Быстрая система ПЦР в реальном времени, Стратаген MX3000P, MX3005P, и Мх4000.
• Оба эталонных красителя ROX I и II следует использовать в конечной концентрации 1× в реакциях..
• Такие инструменты, как LightCycler, Система реального времени Thermal Cycler Dice II, и система Smart Cycler не требуют использования эталонного красителя ROX..

Хранилище:

Хранить при -20°C., с минимальным сроком годности 12 месяцы.

Определение деятельности:

Использование активированной ДНК спермы махи-махи в качестве шаблона/праймера, деятельность определяется как 1 единица (ты) кислотно-нерастворимого материала, включенного, Занимаясь 10 нмоль нуклеотидов внутри 30 минуты при 74 ° C..

Контроль качества:

Этот продукт подвергся качественному тестированию и не свободен от дезоксирибонуклеазы эндонуклеазной активности, Дезоксирибонуклеаза экзонуклеазная активность, и загрязнение рибонуклеазой. Остаточное содержание геномной ДНК хозяина ниже 10 копии.

Продукт использует:

Флуоресценция в реальном времени Количественная ПЦР (Метод окрашивания) амплифицирует ДНК или кДНК; Абсолютно-количественный кПЦР; Относительный количественный ПЦР.

Инструкции по использованию:

• Дайте необходимым реагентам уравновеситься до комнатной температуры до полного растворения., аккуратно тщательно перемешать (Не вихрь), используйте после непродолжительного центрифугирования, чтобы избежать чрезмерного образования пузырьков и повторных циклов замораживания-оттаивания.. Если часто использовать, Хранить при 4 ° C.. Приготовьте реакционную смесь для ПЦР в соответствии с нажатыми компонентами. (приготовить реакционную смесь в холодильнике):

Примечание：Количество каждого компонента можно регулировать в соответствии с фактическими потребностями.. Добавление эталонного красителя ROX должно определяться пользователем в зависимости от конкретной используемой модели..

• В общем, Двухэтапный метод может быть использован для реакции. Если амплификация неудовлетворительна при использовании двухэтапного метода, Трехэтапный метод может быть использован для настройки программы реакции ПЦР.

Примечание： Условия реакции можно регулировать и оптимизировать в соответствии с фактическими потребностями.. Программа кривой плавления должна быть выбрана и адаптирована на основе программы используемого прибора амплификации..

• После завершения реакции, проанализировать кривую амплификации и результаты кривой плавления. Подробные методы анализа см. в руководстве пользователя прибора для ПЦР в реальном времени..

Меры предосторожности:

1. Пожалуйста, выберите подходящий отжиг (расширение) температуры в зависимости от конструкции праймера, с грунтовкой Tm обычно около 60°C. Для грунтовок с более низкими температурами отжига, Рекомендуется трехэтапный метод. Конечную концентрацию используемых праймеров можно регулировать в диапазоне 0,2-1,0 мкм.. Концентрацию матрицы ДНК можно регулировать в зависимости от ее концентрации..
2. Краситель SYBR Green I — неспецифический краситель, излучающий флуоресценцию при связывании с двухцепочечной ДНК. (дцДНК). Однако, он легко разрушается под сильным светом. Поэтому, при разработке праймеров, важно, насколько это возможно, избегать образования димеров праймера.. Во время использования, следует избегать длительного воздействия яркого света, чтобы повысить точность результатов., чувствительность, и специфика.
3. Увеличение концентрации ионов магния может снизить ингибирующее действие SYBR Green I на реакции ПЦР.. При оптимизации реакций флуоресцентной ПЦР с использованием этого продукта, желательно немного увеличить концентрацию ионов магния (0.5-3.0мМ выше, чем стандартные реакции ПЦР).
4. Используйте выделенные области и пипетки до и после амплификации., Носите перчатки, и менять их часто. После завершения реакции ПЦР, не открывайте реакционные пробирки, чтобы свести к минимуму загрязнение среды тестирования продуктами ПЦР..