Введение
Обзор мини-набора HiPure Plasmid EF:
- Интеграция технологий:
- Сочетает технологию HiPure с инновационной технологией удаления эндотоксинов Magen. (ЭТР) для обеспечения высокого качества плазмиды очистка ДНК.
- Управление эндотоксинами:
- Содержит специально разработанный буфер, предназначенный для предотвращения связывания эндотоксинов с матрицей HiPure., значительное снижение уровня эндотоксинов в конечном продукте ДНК.
- Пригодность приложения:
- Обеспечивает плазмидную ДНК, идеальную для трансфекции эукариот и экспериментов in vitro., особенно там, где низкий уровень эндотоксинов имеет решающее значение.
- Влияние загрязнения эндотоксинами:
- Загрязнение эндотоксинами может резко снизить эффективность трансфекции., особенно в чувствительных к эндотоксинам клеточных линиях.
- Клиническая значимость:
- В таких контекстах, как генная терапия, контроль уровня эндотоксинов имеет решающее значение из-за возможности серьезных побочных эффектов, таких как лихорадка., синдром эндотоксинового шока, и негативное влияние на трансфекцию in vitro в иммунные клетки..
Подробности
Технические характеристики
Функции | Технические характеристики |
Основные функции | Выделение до 70 мкг плазмидной ДНК, не содержащей эндотоксинов, из 10–15 мл бактериальной культуры. |
Приложения | Трансфекция клеток, инъекции животных, и т. д.. |
Метод очистки | Мини спин-колонка |
Технология очистки | Кремнеземная технология |
Метод процесса | Руководство (центрифугирование или вакуум) |
Тип образца | Обычная плазмида |
Сумма образца | Высококопийная плазмида: 10мл культуральной среды
Плазмида с низким числом копий : 10-15мл культуральной среды |
Урожай | 10-70мкг |
Объем элюирования | ≥75 мкл |
Время за прогон | ≤40 минут |
Объем переносимой жидкости на колонку | 800мкл |
Привязка выхода колонки | 70мкг |
Принцип
Процедура HiPure Plasmid основана на щелочном лизисе бактериальных клеток с последующей адсорбцией ДНК на кремнезем в присутствии высокого содержания соли.. Уникальная кремнеземная мембрана, используемая в наборе, полностью заменяет стеклянные или кремнеземные суспензии для минипрепаратов плазмидной ДНК.. Процедура состоит из 3 основные шаги: Приготовление и очистка бактериального лизата щелочным методом.,затем перенесите супернатант в колонку для связывания ДНК. После отмывки белков и других примесей, нуклеиновую кислоту наконец элюировали буфером с низким содержанием соли. (10мм Трис, pH9,0, 0.5мм ЭДТА).
Преимущества
- Высокая чистота — очищенную плазмиду можно использовать непосредственно при секвенировании., ферментативное пищеварение и ПЦР, и т. д..
- Быстрый — очистка на колонке с силикагелем происходит намного быстрее, чем ионный обмен
- Высокая доходность — до 70 мкг плазмиды можно связать в одной колонке
- Низкое содержание эндотоксинов — полученную плазмиду можно непосредственно использовать при трансфекции клеток и инъекциях животным.
Содержимое комплекта
Содержание | P115402 | P115403 |
Время очистки | 50 Приготовления | 250 Приготовления |
РНКаза А | 5 мг | 20 мг |
Буфер P1 | 30 мл | 140 мл |
Буфер P2 | 30 мл | 140 мл |
Буфер LEN3 | 15 мл | 70 мл |
Буфер LN4 | 50 мл | 250 мл |
Буфер LN5 | 30 мл | 140 мл |
Буфер PW1 | 30 мл | 140 мл |
Буфер PW2 | 12 мл | 50 мл |
Элюирующий буфер | 15 мл | 30 мл |
Мини-колонки HiPure DNA III | 50 | 250 |
2 Пробирки для сбора мл | 50 | 250 |
Хранение и стабильность
Инструкции по хранению:
- Общее хранилище:
- Компоненты набора можно хранить в сухом виде при комнатной температуре. (15–25°С).
- Стабилен как минимум 18 месяцев в таких условиях.
- Обращение с осадками:
- Если в буферах образуются осадки, нагреть до 37°C для растворения.
- Специальное хранилище для буфера P1 с РНКазой A:
- После добавления РНКазы А, Буфер P1 стабилен в течение 6 месяцев при хранении при температуре 2–8°C.
Руководство по покупке
Имя | НОМЕР КОШКИ | Сумма образца | Тип столбца | Объем элюирования | Урожай | Время за прогон | Требования к центрифугам |
Мини-набор HiPure Plasmid EF | P1154 | 10-15мл | 1.5колонка мл | ≥75 мкл | 10–70 мкг/15 мл | ≤40 минут | маленькая центрифуга |
HiPure Плазмида EF 96 Набор | P1157 | 1-5мл | 96 колодезная пластина | ≥75 мкл | 30мкг/1мл | ≤60 минут | 96 центрифуга для луночных планшетов |
Комплект HiPure Plasmid EF Midi | Р1231 | 30-50мл | 15колонка мл | ≥0,4 мл | 10-500мкг/50мл | ≤60 минут | 15центрифуга мл |
Набор HiPure Plasmid EF Maxi | Р1156 | 100-200мл | 50колонка мл | ≥0,8 мл | 100–1500 мкг/200 мл | ≤60 минут | 50центрифуга мл |
Мега-набор HiPure Plasmid EF | P1116 | 500мл | 50колонка мл | ≥0,8 мл | 10мг/500мл | ≤70 минут | 50центрифуга мл |
Отзывы
Отзывов пока нет.