DTT, или дитиотретол, Является ли восстановительный агент, обычно используемый в лабораториях биохимии и молекулярной биологии. Это небольшая молекула, которая содержит два тиола (сульфгидрил) группы и используются для нарушения дисульфидных связей в белках и поддержания восстановительной среды в различных биохимических анализах. Номер CAS для DTT 3483-12-3.
Использование DTT:
- Денатурация и разворачивание белка:
- DTT часто используется для снижения дисульфидных связей в белках, приводя к денатурации и разворачиванию структуры белка. Это особенно полезно при изучении складывания белка или при приготовлении белков для анализа.
- Активация фермента:
- Некоторые ферменты требуют, чтобы уменьшающая среда была активной. DTT используется для поддержания уменьшения условия, обеспечение правильного функционирования этих ферментов.
- Снижение агрегатов белка:
- DTT может быть использован для снижения белковых агрегатов или неправильно свернутых белков, Облегчение их солюбилизации и разделения во время экспериментов, таких как гель -электрофорез.
- Предотвращение окисления в клеточной культуре:
- В клеточной культуре, DTT иногда добавляется в среду, чтобы предотвратить окисление остатков цистеина в белках и поддерживать восстановительные условия, необходимые для определенных клеточных процессов.
Как использовать DTT:
- Подготовка раствора DTT:
- Растворить DTT в соответствующем буфере или растворителе, чтобы создать раствор DTT желаемой концентрации. Обычно используемые концентрации варьируются от 1 мм до 100 мм, В зависимости от конкретного приложения.
- Добавление к образцам белка:
- DTT обычно добавляется непосредственно в образцы белка или реакционные смеси для достижения желаемых уменьшенных условий. Концентрация DTT должна быть оптимизирована на основе конкретных экспериментальных требований.
- Инкубация:
- Позвольте реакционной смеси инкубировать в течение достаточного периода, чтобы DTT уменьшал дисульфидные связи. Время инкубации может варьироваться в зависимости от экспериментальной установки и конкретных целей исследования.
- закалка:
- После завершения реакции восстановления, Важно утолить избыточный DTT, чтобы предотвратить помехи в нисходящие приложения. Это может быть достигнуто путем добавления реагента для гашения или другими подходящими методами.
- Анализ:
- Перейдите с анализом ваших образцов, включает ли он электрофорез геля, Анализы ферментов, или другие биохимические методы.
Отзывы
Отзывов пока нет.