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제품소개：
이 테스트 키트는 White Spot Syndrome Virus를 검출하는 빠르고 정확한 방법을 제공합니다. (WSSV) 새우에.
- 기술: 실시간 형광 정량적 사용 PCR (TaqMan 프로브 방법) 민감하고 구체적인 탐지를 위해.
- 대상: WSSV의 고유한 핵산 서열을 표적으로 삼도록 설계된 특정 프라이머 및 형광 프로브를 활용합니다..
- 응용: 다양한 새우 샘플에서 WSSV를 검출합니다., 포함:
- 동물 조직
- 밥을 먹이다
- 기타 샘플 유형 (키트 사양을 참조하세요)
- 이중 감지: 정성적, 정량적 결과 제공:
- 질적: WSSV의 존재 여부를 결정합니다..
- 정량적: 존재하는 WSSV 핵산의 양을 측정합니다., 바이러스 부하 평가 가능.
- 실시간 모니터링: 반응 전반에 걸쳐 증폭을 지속적으로 모니터링하기 위해 실시간 PCR을 활용합니다., 빠른 결과 가능.
이 사용자 친화적인 테스트 키트는 새우 양식업자에게 귀중한 도구를 제공합니다., 연구원, 효과적인 WSSV 탐지 및 관리를 위한 진단 연구소.
상품 내용：
| 구성요소 | WP2101005-01(24T) |
| WSSV 반응 용액 | 23웰당 μL × 8 스트립당 웰 × 3 스트립 |
| WSSV 양성 대조군 | 100μL |
| 음성 대조군 | 100μL |
저장:
-20°C에서 보관, 유통 기한이 최소한 12 개월.
적용 가능한 기기：
ABI 시리즈 (ABI 7300/ABI 7500/1단계, 등.), 로슈 LightCycler 시리즈, 바이오래드 CFX 96, SanshiBio Q162D, 및 기타 실시간 형광 정량 PCR 장비
샘플 처리：
관련 표준에 따라 샘플을 처리합니다., 나중에 사용하기 위해 처리된 샘플을 저장합니다..
실험 절차：
- 샘플 준비 (샘플 준비 영역)
Total DNA/의 사용설명서를 참조하세요.RNA 추출 키트, 또는 일치하는 신속 핵산 추출 키트와 함께 ES08 전자동 핵산 추출 및 정제 장비를 사용하십시오. (자기비드 방식), 또는 처리된 샘플에서 핵산을 추출하기 위해 관련 표준을 준수하는 기타 핵산 추출 키트/방법. 추출된 검체핵산은 최대한 빨리 검사하여 아이스박스에 보관해야 합니다., 또는 -20°C에서 보관.
- 반응 시스템 준비 (면적 추가)
2.1 WSSV 양성 대조 튜브를 꺼냅니다., 네거티브 컨트롤 튜브, 및 실험에 필요한 WSSV 반응액이 담긴 반응관 (n+2) (즉., n개의 테스트할 샘플 + 양성 대조군 + 음성 대조군), 실온에서 시약을 완전히 녹입니다., 원심분리기 10 초, 튜브 벽과 뚜껑에서 튜브 바닥까지 액체를 원심분리합니다., 나중에 사용하기 위해 아이스박스에 보관하세요.
2.2 그런 다음 추출된 음성 대조군 2μL를 추가합니다., 샘플 핵산, 8열 스트립의 반응 튜브에 대한 WSSV 양성 대조군, 튜브 뚜껑을 닫아라, 기록을 세우다, 각 반응의 총 부피를 25μL로 만듭니다.. 잘 섞어주세요, 원심분리기 30 초, 실시간 형광 정량 PCR 기기로 증폭 실험을 수행합니다..
- 형광 PCR 증폭 (증폭 및 제품 분석 영역)
95°C에서 사전 변성 3 분; 95°C에서 변성 5 초, 60°C에서 어닐링 및 신장 30 초, ~을 위한 40 사이클, 60°C에서 형광 신호 수집. FAM을 형광 그룹으로 선택, 및 소광제 그룹은 없음 (ABI 시리즈 실시간 형광 정량 PCR 장비와 함께 사용, 필요하다면, 사전에 제조업체에 문의하거나 직접 ROX 교정 염료를 추가하십시오., ROX를 소광제 그룹으로 선택합니다.; 그렇지 않으면, 정상적인 절차를 따르세요).
- 결과판정
4.1 양성 대조군의 Ct 값 < 30 그리고 “에스” 모양의 증폭 곡선이 나타납니다., 테스트 결과는 유효하다. 그렇지 않은 경우, 실험은 반복되어야 한다. 재시험이 여전히 유효하지 않은 경우, 기술 담당자에게 문의해 주세요.
4.2 샘플 검출 결과: Ct 값 ≤ 38 그리고 “에스” 모양의 증폭 곡선이 나타납니다., 긍정적인 결과를 나타내는, 이는 샘플에 백반증후군 바이러스가 포함되어 있음을 의미합니다. (WSSV).
4.3 샘플 검출 결과: 38 < 코네티컷 < 40, 의심스러운 것으로 간주됩니다. 샘플을 다시 테스트해야 합니다.. 재검사한 Ct 값이 < 40 명확한 증폭 곡선이 있습니다, 긍정적으로 여겨진다; 그렇지 않으면, 부정적인 것으로 간주됩니다.
4.4 샘플 검출 결과: Ct 값 없음 또는 Ct 값 ≥ 40 그리고 아니 “에스” 모양의 증폭 곡선, 부정적인 것으로 간주됩니다, 백점증후군 바이러스를 의미합니다. (WSSV) 샘플에서는 검출되지 않았습니다.
지침：
- 이 테스트 키트는 높은 감도를 가지고 있습니다.. 오염을 방지하기 위해, 실험은 엄격하게 분할되어야 합니다, 인적 요인으로 인한 교차 오염을 방지하기 위해 파티션 간 물리적 격리를 권장합니다..
- 실험 중에는 실험실 가운과 라텍스 장갑을 착용하십시오.. 다양한 영역에서 별도의 도구 사용, 그리고 장갑과 실험복을 갈아입는 것을 잊지 마세요.
- 반응 용액의 성분은 빛에 민감하므로 빛을 피하여 보관해야 합니다.. 사용하기 전에 시약을 완전히 해동하십시오., 그러나 반복적인 냉동과 해동을 피하십시오.
- 시약 준비 및 샘플 추가와 같은 단계에 대한 지침을 엄격히 따르십시오.. 작업대 소독, 원심분리기, 정기적으로 염소 소독제를 사용하여 피펫팅, 에탄올, 핵산 오염 제거제, 아니면 자외선.
- 반응 후, 폐기를 위해 PCR 반응 튜브를 밀봉된 봉지에 넣습니다.. 에어로졸 오염을 방지하려면 튜브를 열지 마십시오..
- 다른 배치의 시약을 혼합하지 마십시오. 유효기간 내에 사용하세요. 소모품은 효소 없이 멸균 처리되어야 합니다..
- 검사 결과가 음성이라고 해서 완전히 감염되지 않은 상태를 나타내는 것은 아닙니다.; 이는 획득된 핵산의 품질과 밀접한 관련이 있습니다.. “부정적인” 결과는 검증되지 않은 핵산 샘플 품질로 인해 발생할 수 있습니다., 낮은 샘플 핵산 로드, 또는 핵산 추출에 실패함 (발각). 특정 진단을 위해서는 수의학적 임상적 고려가 필요합니다..
- 거짓 긍정의 가능한 원인: 검체 채취 중 교차 오염, 운송, 및 핵산 추출.
- 기타 질문사항, 즉시 제조사 기술진에게 연락해주세요. 본 제품은 과학적 연구용으로만 사용되며 임상 진단이나 기타 목적으로는 사용할 수 없습니다..
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