사양: 4*50ML
시약 | 구성 |
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시약 (ㅏ) | 크리스탈 바이올렛 염색 솔루션 |
시약 (비) | 산성 에탄올 분화 용액 |
시약 (씨) | 암모늄 옥살 레이트 크리스탈 바이올렛 염색 용액 |
시약 (디) | Refusert의 요오드 솔루션 |
저장: 실온, 빛을 피하다
제품 설명:
- 그램 염색:
- 발명:
- 덴마크의 의사 Christian Gram에 의해 발명되었습니다 1884.
- 방법:
- 세균학에서 널리 사용되는 차등 염색 방법.
- 카운터 스테인의 형태.
- 목적:
- 박테리아를 두 가지 주요 클래스로 구분합니다:
- 그람 양성 (G*)
- 그람 음성 (G)
- 박테리아를 두 가지 주요 클래스로 구분합니다:
- 기구:
- 차이에 기초한 차등 염색:
- 에탄올에 대한 세포벽의 투과성
- 탈색에 저항하는 능력
- 펩티도 글리 칸 층의 두께 및 구조
- 차이에 기초한 차등 염색:
- 염색 과정:
- 크리스탈 바이올렛으로 염색 된 세포 후 요오드 형태의 불용성 복합체로 처리 된 세포.
- 에탄올에 의해 탈색된다.
- 등전점:
- 그람 양성 박테리아: pH에서의 등전점 2.0-3.0
- 그람 음성 박테리아: pH에서의 등전점 4.0-5.0
- 바인딩 특성:
- 그람 양성 박테리아는 더 많은 음전하를 가지고 있습니다.
- Crystal Violet과 같은 기본 염료에 더 단단히 바인딩.
- 복합체의 형성:
- Mordant를 추가 한 후 (요오드) 박테리아 세포로:
- 물에 불용성이 불용성 된 결정 바이올렛-요오드-단백질 복합체가 형성된다.
- 그람 양성 박테리아 내부의 리보 핵산 마그네슘 염에 결합합니다.
- Mordant를 추가 한 후 (요오드) 박테리아 세포로:
- 결과:
- 염색 된 박테리아는 탈색하기 쉬운 경향이 적습니다.
- 발명:
작동 단계 (참고용으로만):
- 조직 고정 10% 포르말린, 일상적인 탈수 임베딩.
- 섹션을 4μm의 두께로 절단합니다, 그리고 Dewax는 정기적으로 물에.
- 크리스탈 바이올렛 염색 솔루션에서 염색 슬라이스를 떨어 뜨립니다 5 분, 그런 다음 염료를 버립니다.
- 산성 에탄올 분화 솔루션에서 차별화 2-5 초.
- 흐르는 물로 헹구십시오 3-5 초.
- 암모늄 옥살 레이트 크리스탈 바이올렛 염색 용액에서 염색 슬라이스를 떨어 뜨립니다. 5 분, 그런 다음 염료를 버립니다. 종이를 사용하여 슬라이스 주위에 과도한 액체를 부드럽게 흡수하십시오..
- Weigert의 요오드 용액으로 슬라이스를 처리하십시오 1 분, 그런 다음 요오드 용액을 버립니다. 필터 종이로 슬라이스 내부의 수분을 반복적으로 흡수하십시오..
- 슬라이스에서 자주색 색상 침출이 없을 때까지 오르토-톨루이딘-Xylene 용액과 구별. 자일렌으로 즉시 씻으십시오, 현미경으로 관찰하십시오. 신선한 자일 렌으로 여러 번 세척을 반복하여 오르토 톨루이딘을 철저히 제거하십시오.. 중성 수지로 밀봉하십시오.
염색 결과:
- 그람 양성 박테리아 및 셀룰로오스: 파란색
- 그람 음성 박테리아: 빨간색
- 세포 핵: 빨간색
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