SolarBio 테트라메틸로다민 에틸 에스테르(TMRE)

테트라 메틸로드 다민 에틸 에스테르 (TMRE) 살아있는 세포에서 미토콘드리아 막 전위의 시각화 및 정량화에 사용되는 형광 염료입니다.. 그것은 로다민 염료의 패밀리에 속하며 종종 미토콘드리아 건강 및 기능을 연구하기 위해 다양한 세포 분석에 사용됩니다.. TMRE는 활성으로 축적됩니다, 편광 미토콘드리아, 적색 형광 방출, 미토콘드리아 막 전위 변화를 평가하는 데 유용한 도구가됩니다..

TMRE의 주요 기능:

1. 막 전위 지표:
   • TMRE는 미토콘드리아 막 전위의 변화에 ​​민감하다. 활성으로 축적됩니다, 편광 미토콘드리아, 적색 형광 방출.
2. 세포 투과성:
   • TMRE는 세포 투과성이며 라이브 셀 이미징 실험에 사용할 수 있습니다..

tmre를 사용하는 방법:

1. TMRE 재고 용액의 준비:
   • 적절한 용매에 용해시켜 TMRE의 스톡 솔루션을 준비하십시오. (일반적으로 DMSO) 원하는 농도를 달성하기 위해. 일반적인 작업 농도는 범위입니다 10 에게 200 nm.
2. 세포 준비:
   • 적절한 성장 매체 및 조건에서 관심있는 배양 세포. 세포가 부착되어 있거나 영상화를 위해 쉽게 일시 중지 될 수 있는지 확인하십시오..
3. tmre의 로딩:
   • 원하는 농도에서 세포 배양 배지 또는 완충액에 TMRE 재고 용액을 추가하십시오.. 특정 기간 동안 TMRE로 세포를 배양하십시오, 일반적으로 15-30 분, 염료가 미토콘드리아에 축적되도록 허용합니다.
4. 세탁 (필요한 경우):
   • 배양 기간 후, 버퍼로 세포를 세척하여 배양 배지에서 과도한 TMRE를 제거하십시오..
5. 현미경 및 영상:
   • 적색 형광을위한 적절한 필터 세트가 장착 된 형광 현미경을 사용하여 라이브 셀 이미징을 수행하십시오.. 주변에서 tmre를 흥분시킵니다 550-580 NM 및 대략 방출 형광을 검출합니다 590-620 nm.
6. 미토콘드리아 건강 평가:
   • 미토콘드리아에서 TMRE의 형광 강도를 분석하십시오. 높은 형광은 활성 및 편광 미토콘드리아를 나타냅니다, 감소는 미토콘드리아 막 탈분극을 제안 할 수있다.
7. 제어 및 교정:
   • 적절한 컨트롤을 포함하십시오, 미토콘드리아 uncouplers 또는 탈분극 제로 처리 된 세포와 같은, 응답을 교정하고 결과를 검증합니다.
8. 부량:
   • 이미지 분석 소프트웨어를 사용하여 TMRE 형광 강도를 정량화하십시오. 이것은 단일 셀 수준 또는 전체 시야에서 수행 할 수 있습니다..
9. 데이터 해석:
   • 실험 목표의 맥락에서 결과를 해석하십시오.. TMRE 형광의 변화는 미토콘드리아 기능에 대한 통찰력을 제공 할 수 있습니다., 건강, 다양한 자극에 대한 반응.