글리코겐 분석 키트

메모: 테스트 전에 예측을 위해 2~3개의 서로 다른 샘플을 채취합니다..

운영장비: 분광 광도계/ 마이크로 플레이트 리더

카탈로그 번호: BC0345

크기:100T/96S

구성요소:

시약 추출: 100밀리리터×1, 4℃에서 보관.

섭정 1세: 가루×1, 4 10 .10 mg의 포도당에서 저장, 추가하다 1 사용하기 전에이를 용해시키기 위해 증류수의 ml. 증류수로 희석 0.1 대기를위한 mg/ml 포도당 용액, 사용할 준비가되었습니다. 0.1 mg/ml 포도당 표준 용액, 4℃에서 보관.

리젠트 ⅱ: 가루×1, 4℃에서 보관.

작업 솔루션: 붓다 6 증류수의 양을 시약으로 ⅱ하고 천천히 부어 넣습니다. 24 농축 황산의 ml. 사용하기 전에 철저히 녹이고 섞으십시오. 사용하지 않는 시약은 유효합니다 4 일주일 동안 ° C.

제품 설명

글리코겐은 포도당 단위로 구성된 고 분자 다당류입니다.. 그것은 설탕의 주요 저장 형태 중 하나입니다. 주로 간과 근육에 백업 에너지로 저장됩니다., 간 글리코겐 및 근육 글리코겐이라고합니다, 각기. 글리코겐은 혈당 농도를 조절할 수 있습니다. 글리코겐은 혈당이 상승 할 때 간에서 합성 될 수 있습니다.. 혈당이 감소 할 때, 간 글리코겐은 혈당을 보충하기 위해 포도당으로 분해됩니다.. 그러므로, 간 글리코겐은 혈당의 상대 균형을 유지하는 데 중요합니다.. 근육 글리코겐은 근육에 글리코겐 저장의 한 형태입니다.. 격렬한 운동 중에 많은 혈당이 소비 될 때, 근육 글리코겐은 혈당으로 직접 분해 될 수 없습니다.. 젖산을 생산하려면 먼저 분해되어야합니다., 혈액으로 간으로 순환됩니다, 글리코겐 포도당을 통해 간 글리코겐으로 변형되었습니다.

결정 원칙: 안트론 방법. 글리코겐은 강한 알칼리 추출물로 추출된다, 글리코겐 함량은 강한 산성 조건 하에서 안트론 방법을 사용하여 측정됩니다..

필요하지만 제공되지 않는 시약 및 장비.

에스Pectrophotometer/ Microplate Reader, 책상 원심분리기, 이송 피펫, 마이크로 유리 큐벳/96웰 플레이트, 모르타르, 농축 황산 (H2SO4) 그리고 증류수.

절차:

나. 샘플 추출:

1. 세포 또는 박테리아: 모으다 5-10 원심 분리 튜브에 백만 박테리아 또는 세포, 원심 분리 후 상청액을 폐기하십시오; 초음파 박테리아 또는 세포에 0.75ml의 추출 시약을 추가합니다. (힘 20% 또는 200W, 초음파 3s, 10S 간격, 반복하다 30 타임스) ); 10ml 튜브로 옮깁니다, 끓는 수조에서 20 분 동안 끓입니다 (물 손실을 방지하기 위해 단단히 닫습니다), 매번 튜브를 흔들어보세요 5 최소 혼합; 튜브를 꺼내서 식 힙니다, 증류수로 최대 5ml를 섭취하고 섞으십시오. 10 분 동안 8000g 및 25 ℃에서 원심 분리, 테스트를 위해 상청액을 가져 가십시오.

2. 조직: 체중이 0.1 ~ 0.2g 샘플을 a 10 ML 튜브, 추가하다 0.75 추출 용액의 ml, 끓는 수조에서 끓입니다 20 분 (물 손실을 방지하기 위해 단단히 닫습니다), 매번 테스트 튜브를 흔들어보세요 5 최소 혼합. 모든 조직이 용해 된 후, 튜브를 꺼내서 식히십시오, 그런 다음 보충하십시오 5 mL(증류수 포함). 8000g 및 25 ℃에서 원심 분리 10 분, 테스트를 위해 상청액을 가져 가십시오.

II. 결정 절차:

1. 예열 에스pectrophotometer/ microplate reader for 30 분, 파장을 조정하다 620 nm, 증류수로 0을 설정하다
2. 샘플링 테이블 (EPTUBE에 다음 리전트를 추가하십시오)

섭정(μL)	빈 튜브 (A1)	표준 튜브 (A2)	시험관 (A3)
견본			60
섭정 1세		60
증류수	60
리젠트 ⅱ	240	240	240

잘 섞다, 끓는 수조에 넣으십시오 10 분 (물 손실을 방지하기 위해 단단히 닫습니다), 시원한, 그리고 가져 가라 200 μl 로의 마이크로 유리 큐벳/96- 웰 플레이트로 블랭크 튜브의 흡광도를 읽습니다., 표준 튜브, 및 측정 튜브 620 nm, A1으로 기록하십시오, A2, 그리고 a3. 빈 튜브와 표준 튜브는 한 번만 테스트하면됩니다..

III. 계산:

1. 샘플 중량

소르비톨 (Mg/g 신선한 무게) =(CS × V1)×(A3-A1)¶(A2-A1)¶(W × V1 ÷ V2)÷ 1.11

= 0.450 ×(A3-A1)A2-A1)¼W

2. 단백질 농도

소르비톨 (mg/mg 프로트) = (CS × V1)×(A3-A1) ¶(A2-A1) ¶(V1 × CPR) ÷ 1.11

= 0.09 ×(A3-A1) A2-A1) ¼Cpr

3. 박테리아 또는 세포의 수:

소르비톨 − (mg/104 세포) = (CS × V1)×(A3-A1)¶(A2-A1)¶(박테리아 또는 세포의 수 × V1 ÷ V2) ÷ 1.11

= 0.450 ×(A3-A1)A2-A1)÷ 박테리아 또는 세포의 수

1.11: 글리코겐 함량으로 전환 된 포도당 함량이 일정합니다., 그게, 색상 111 안트론 시약을 갖는 포도당 μg 100 안트론 시약을 갖는 μg의 글리코겐.

CS: 표준의 농도, 0.1 mg/ml v1: 샘플량, 0.06 밀리리터;

v2: 총 샘플 볼륨, 5 밀리리터;

심폐소생술: 샘플 단백질 농도, mg/mL; 여: 샘플 중량, g

박테리아 또는 세포의 수: 104 장치로, 만

메모:

A가 더 큰 경우 1.4, 증류수로 샘플을 희석하고 계산 공식에서 해당 희석 계수로 곱하십시오..

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기술 사양:

검출 한계: 0.002 mg/mL

선형 범위: 0.003125-0.25 mg/mL