고양이 번호: PC0015
크기: 50티
저장: 개방 후 보존을 밀봉합니다, 주문일 의이 키트는 9 개월 동안 유효합니다..
설명
Coomassie G-250 염료는 총 단백질의 검출 및 정량에 사용되는 비색 시약입니다.. 산성 배지에서 Coomassie Dye는 단백질에 결합하여 465nm에서 595nm에서 최대 흡수의 즉각적인 이동을 유발합니다.. 특정 농도 범위에서, 측정 된 흡광도 값 A595는 단백질 농도에 직접 비례합니다..
규약
- 마이크로플레이트리더
- BSA 표준을 완전히 용해하십시오, 10Ul로 희석됩니다. 250UL, 0.2mg/ml의 최종 농도. 희석 완충액은 측정 된 단백질 샘플에 의존 하였다.. 단순성을 위해, 0.9%NACL 또는 PBS를 사용하도록 제안합니다.
- 54ml DDH2O로 희석 된 1ML 5 × G250 이전에 × G250mix. 1× G250 솔루션은 1 주일을 4 °로 절약 할 수 있습니다.
- 에 따른 표준 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 및 20UL은 각각 96well 플레이트에 첨가된다, 및 PBS 희석에 보완된다.
- 샘플을 희석하십시오(몇 가지 그라디언트를 준비하십시오, ~와 같은 2 타임스, 4 타임스, 8 배 희석), 20UL 샘플을 추가하십시오 96 잘. 오류를 피하기 위해, 표준 라인 이후에 샘플 포인트가 설정되어야합니다 1/2.
- 각 웰에 200UL 희석 1 × G250을 추가하십시오, 실온 3-5 분.
- 흡광도 결정.
- 표준 곡선에 따르면 샘플 단백질을 계산합니다
- UV-Vis분광 광도계
- 8*10ML 원심 분리 튜브(이상) 1 ~ 8으로 표시되어 있습니다.
- 2.4ml PBS로 2mg/ml로 100UL BSA를 희석시킵니다.
- 5× G250 사용하기 전에 잘 혼합됩니다. 14ML DDH2O로 희석 된 ML 5 × G250. 1× G250 솔루션은 1 주일을 4 ℃로 절약 할 수 있습니다.
- 다음 표에 따라 시약을 추가하십시오 (각 우물 5ml, 추가는 큐벳을 청소하는 데 사용됩니다)
PBS | 500울 | 400울 | 300울 | 200울 | 100울 | 0울 | 0울 | 0울 | 0울 |
1× G250 | 5밀리리터 | 5밀리리터 | 5밀리리터 | 5밀리리터 | 5밀리리터 | 5밀리리터 | 5밀리리터 | 5밀리리터 | 5밀리리터 |
- 다음 값을 측정하십시오 3 반응의 분. 실험의 정확성을 보장합니다, 매번 OD 값을 측정하십시오 2 분
튜브 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | …… |
얼룩 용액(분) | 0 | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 | 12 | 14 | …… |
OD 값 | 3 | 5 | 7 | 9 | 11 | 13 | 15 | 17 | …… |

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