Sanshibio Taq Hot-Start DNA 중합효소

Taq 핫 스타트 DNA 중합효소

제품 번호：EH001 사양：500U/1000U/5000U 스토리지: -20°C에서 보관

제품소개：

이 생성물은 저온에서 프라이머 잘못 알림 또는 프라이머 이량 체 형성으로 인한 비특이적 증폭을 억제하는 항체-차단 핫 스타트 효소입니다.. 핫 스타트에 적합합니다 PCR. 항체는 PCR 반응의 초기 DNA 변성 단계 동안 불 활성화되기 때문에, 특별한 비활성화 치료가 필요하지 않습니다; 표준 PCR 조건에서 사용할 수 있습니다. 이 제품을 사용하여 증폭 된 PCR 제품에는‘a’ 베이스가 3에 추가되었습니다′ 끝, T- 벡터로 직접 클로닝 할 수 있습니다. 또한 최종 연마 및 인산화 후 무딘 엔드 벡터로 클로닝 될 수 있습니다..

상품 내용：

저장:

-20°C에서 보관, 유통 기한이 최소한 12 개월.

활동 정의:

템플릿/프라이머로 활성화 된 Mahi-Mahi 정자 DNA를 사용합니다, 활동은 다음과 같이 정의됩니다 1 단위 (유) 산이적 불용성 물질의 통합, 차지함으로써 10 내부 뉴클레오티드의 NMOL 30 74 ° C에서 분.

품질 관리:

이 제품은 품질 테스트를 거쳤으며 Deoxyribonuclease endonuclease 활성이 없습니다., 데 옥시 리보 뉴 클레아 제 Exonuclease 활성, 리보 뉴 클레아 제 오염. 숙주 게놈 DNA 잔류 함량은 다음과 같습니다 10 사본.

제품 사용:

핫 스타트 PCR; DNA 서열 결정.

사용 지침:

• 필요한 시약이 완전히 용해 될 때까지 실온에서 평형화하도록합니다.. 부드럽게 잘 섞어주세요 (와류가 아닙니다), 간단한 원심 분리 후 사용하여 과도한 거품 형성을 방지하고 반복적 인 동결-해동 사이클을 피하십시오.. 자주 사용하는 경우, 4 ° C에 저장하십시오. 다음 성분에 따라 PCR 반응 혼합물을 준비하십시오. (얼음 상자에 반응 혼합물을 준비하십시오):

권장 반응 시스템:

메모: 반응 시스템의 각 구성 요소의 양은 실제 요구 사항에 따라 조정할 수 있습니다..

• 일반적으로, 반응에 2 단계 방법을 사용할 수 있습니다; 2 단계 증폭이 만족스럽지 않은 경우, 3 단계 방법을 사용하여 PCR 반응 프로그램을 설정할 수 있습니다..

메모: 실제 요구 사항에 따라 반응 조건을 조정하고 최적화 할 수 있습니다..

• 반응이 완료된 후, 실험 결과를 분석하십시오. 자세한 분석 방법, PCR 증폭 기기 작동 매뉴얼을 참조하십시오.

지침:

1. 적절한 어닐링을 선택하십시오 (확대) 프라이머 설계를 기반으로 한 온도. 일반적으로, 프라이머의 TM 값은 약 60 ° C로 설계되었습니다.. 어닐링 온도가 낮거나 긴 조각을 증폭시키는 프라이머의 경우 200 bp, 3 단계 방법이 권장됩니다. 연장 시간은 PCR 제품의 길이에 따라 조정할 수 있습니다., GC 컨텐츠, 그리고 다른 요인들. 제품의 KB 당 연장 시간은 템플릿 복잡성과 밀접한 관련이 있습니다.. 간단한 템플릿 사용 20 초, 일반 템플릿 사용 30 초, 복잡한 템플릿 사용 1 분.
2. PCR 반응 조건은 템플릿과 같은 요소에 따라 다르게 설정해야합니다., 프라이머, PCR 제품의 길이, 및 GC 컨텐츠. 일반적으로 사용되는 프라이머의 최종 농도는 0.2-1.0 μm. DNA 주형 농도는 농도에 따라 조정될 수 있습니다.. 복잡한 템플릿 또는 높은 GC 컨텐츠의 경우, 변성/어닐링 또는 연장 시간을 확장하는 것을 고려하십시오, 변성/어닐링 온도 증가.
3. 증폭 전후에 전용 영역과 피펫을 사용하십시오, 장갑을 착용하십시오, 그리고 자주 바꾸십시오. PCR 증폭 후, 반응 튜브를 직접 열지 마십시오. 실험 환경에서 PCR 제품 오염 위험을 최소화하기 위해 열기 전에 충분히 식히기 위해 4 ° C 또는 -20 ° C에 배치하십시오..