다당류 및 폴리페놀 식물 총 RNA (을 더한) 소량 추출 키트

1. 시약 키트의 구성 요소

명세서	50티	100티
고양이. 아니요.	SN0305AD	SN0306AD
RNA 추출 컬럼 (세트)	50 (세트)	100 (세트)
DNA 청소 열 (세트)	50 (세트)	100 (세트)
RNA 추출 버퍼 i	30 밀리리터	2×30 밀리리터
억제제 제거 버퍼	30 밀리리터	2×30 밀리리터
세척 버퍼 1	15 밀리리터	2×15 밀리리터
용출 버퍼	20 밀리리터	20 밀리리터
사용 설명서	1	1

 

2. 저장

이 시약 키트는 실온에서 저장 될 수 있습니다 (15-25℃) 건조한 환경에서 안정적이며 12 개월.

3. 시약 키트 사용 지침

3.1 이 키트는 분자 생물학 연구 목적으로 제작되었으며 질병 진단이나 치료에 사용해서는 안 됩니다..

3.2 키트의 일부 구성품에는 자극제가 포함되어 있습니다.; 필요한 예방 조치를 취하는 것이 좋습니다 (보호복과 고글을 착용하는 등).

3.3 이 키트를 사용하려면 고속 원심분리기 등 추가 장비가 필요합니다., 욕조 (금속 욕조), 소용돌이 믹서, 무수에탄올, 액체 질소, 클로로포름, 멸균 탈이온수, 및 EP 튜브.

4. 시약 키트 소개

This RNA purification kit provides a fast and efficient method for purifying polysaccharide and polyphenol plant total RNA, suitable for most polysaccharide and polyphenol-rich plant tissues. 일반적으로, plant tissues rich in polysaccharides and polyphenols contain a high level of secondary phenolic metabolites and polysaccharides, significantly affecting RNA extraction efficiency. This kit can effectively remove polysaccharides and polyphenols, as well as efficiently eliminate DNA contamination from samples. 실험이 DNA에 민감한 경우, it is recommended to use primers spanning introns for downstream experiments.

The RNA Fast Purification Kit can extract total RNA from plant tissues (핵 RNA 및 세포질 RNA 포함) 이내에 1 시간. 추출된 RNA를 RT에 바로 활용 가능-PCR, 노던 블로팅, 등. 전체 정제 공정에는 페놀-클로로포름과 같은 독성 시약이 필요하지 않습니다., making this RNA purification kit suitable for various other sample types.

5. 실험 원리 및 절차

6. 추출과정

실험 시작 전 주의사항:

ㅏ. 사용하기 전에 세척 버퍼 1, add the specified amount of absolute ethanol according to the label on the reagent bottle, 무수 에탄올이 첨가되었음을 나타내는 라벨의 상자를 선택하십시오..

비. The Elution Buffer is a 0.1x TE 솔루션 최소한의 EDTA 함유. EDTA가 후속 실험에 영향을 미치는 경우, Elution Buffer를 멸균 탈이온수로 교체하는 것이 좋습니다..

1. 샘플 처리:

ㅏ. 재료 수집 및 보관:

신선한 재료를 즉시 사용할 수 없는 경우, 액체질소에 넣고 -80°C에 보관하세요.

비. 가능할 때마다, collect fresh materials, as they contain fewer polysaccharides and polyphenols.

2. 대략 갈기 100 신선한 샘플의 Mg 또는 그 이상 20 액체 질소를 사용한 건조 물질의 mg.

3. 추가하다 600μL RNA 추출 완충액 I., ensuring there are no blocky tissues in the ground sample. Blocky tissues are difficult to lyse and can reduce RNA yield.

4. 소용돌이 30 초.

5. 용해물을 원심분리합니다. 5 분 12,000 rpm.

(메모: Polysaccharide plant materials may produce a lot of sticky substances at this step, which can shear RNA in subsequent steps. 그러므로, remove these substances during this step.)

6. Transfer the supernatant obtained in the previous step to a DNA Clear Purification Column, 원심분리기 12,000 rpm 30 초, 여과 액을 수집하십시오 (메모: RNA는 여과 액에 존재한다).
7. 추가하다 250무수 에탄올 μl, 피펫팅으로 섞는다. 적은 양의 강수량이있는 경우, 후속 실험에는 영향을 미치지 않습니다. Add the liquid to the RNA purification column, 원심분리기 12,000 rpm 30 초, and discard the flow-through.
8. 추가하다 700μl 억제제 제거 완충액 RNA 정제 컬럼으로, 원심분리기 12,000 rpm 30 초, and discard the flow-through.
9. 추가하다 700μl 세척 완충액 1 RNA 정제 컬럼으로, 원심분리기 12,000 rpm 30 초, and discard the flow-through.
10. 추가하다 500μl 세척 완충액 1 RNA 정제 컬럼으로, 원심분리기 12,000 rpm 3 분, and discard the flow-through.
11. RNA 정제 컬럼을 새로운 1.5ml 원심 분리기에 배치하십시오., 실온에서 멤브레인을 공기 건조시킵니다 2 분.

(메모: Wash Buffer에 에탄올 첨가 확인 1. The presence of ethanol significantly affects subsequent experiments. 그러므로, 막 건조가 중요합니다. 원심분리 후, ensure the absence of ethanol before elution. 폐기물과 수집 튜브를 폐기하십시오.. Wash Buffer 사용 후 1, RNA 정제 컬럼의 멤브레인은 약간의 색상만 있어야 합니다.. 원심분리 후 RNA 정제 컬럼을 조심스럽게 제거하세요., 에탄올 오염을 방지하기 위해 수집 튜브에 닿지 않도록 하십시오..)

12. 똑똑 떨어지는 물방울 소리 50-100μl 용출 완충액 멤브레인 위에, 원심분리기 12,000 rpm 1 분, RNA 용액을 수집하십시오.

(메모: Eluting RNA with 50μl Elution Buffer can increase RNA concentration but decrease total RNA yield.)