동물/세포 게놈 DNA 미니 추출 키트

1. 시약 키트의 구성 요소

명세서	50티	100티
고양이. 아니요.	SN0221	SN0222
DNA 추출 컬럼 (세트)	50 (세트)	100 (세트)
시약 완충액 IV	20 밀리리터	2×20 밀리리터
시약 완충액 Cplus	30 밀리리터	30 밀리리터
세척 버퍼 1	15 밀리리터	2 × 15 밀리리터
용출 버퍼	20 밀리리터	20 밀리리터
단백질분해효소 K	1밀리리터	2x1ml
RNaseA	1밀리리터	1밀리리터
사용 설명서	1	1

2. 저장

이 시약 키트는 실온에서 보관해야 합니다. (15-25℃) 그리고 건조한 환경에서는, 유효기간이 있는 12 개월. DNA 추출 정제 컬럼은 다음 용도로 보관할 수 있습니다. 1 시원하고 건조한 환경에서 1년 동안. 단백질분해효소 K 및 RNase A 방부제 함유, 실온에서 운송 가능, 하지만 장기간 보관을 위해서는, -20℃에 보관해야 합니다.

3. 시약 키트 사용 지침

3.1 이 시약 키트는 분자생물학 연구용이므로 질병 진단이나 치료에 사용해서는 안 됩니다..

3.2 시약 키트의 일부 구성품에는 자극제가 포함되어 있습니다.. 보호복, 고글 착용 등의 보호 조치가 권장됩니다..

3.3 이 시약 키트를 사용하는 동안, 고속 원심분리기, 욕조 (금속 욕조), 소용돌이 믹서, 무수에탄올, 멸균 탈이온수, EP 튜브는 사용자가 준비해야 합니다..

4. 시약 키트 소개

동물/조직 DNA 정제 키트는 동물 조직 및 세포 배양 DNA 정제를 위한 빠르고 효과적인 솔루션을 제공합니다., 동물 조직 및 세포 배양 전반에 걸쳐 널리 적용 가능.

동물 및 세포로부터 신속하게 total DNA를 추출하는 DNA 급속 정제 키트입니다., 직접적으로 사용할 수 있는 DNA를 생성 PCR, 서던 블로팅, 그리고 유사한 응용 프로그램. 정제 공정에는 페놀-클로로포름과 같은 독성 물질이 필요하지 않습니다., 다양한 시료에 매우 적합한 DNA 정제 키트입니다..

5. 실험 원리 및 절차

6. 추출과정

실험을 시작하기 전에:

ㅏ. 시약 완충액 IV 저온 조건에서 침전되는 경향이 있음. 65℃로 가열하는 것이 좋습니다. 5 분. 침전물이 용해된 후, 정상적으로 사용할 수 있어요.

비. 사용하기 전에, 규정량의 무수에탄올을 첨가한다. 씻다완충기 1 시약병 라벨에 표시된 대로, 무수 에탄올 첨가를 나타내기 위해 라벨에 체크 표시를 하십시오..

씨. 용출 완충액은 0.1x TE 솔루션 최소한의 EDTA 함량으로. EDTA가 후속 실험에 영향을 미칠 수 있는 경우, Elution Buffer를 멸균 탈이온수로 교체하는 것이 좋습니다..

1. 샘플 취급:

ㅏ. 세포 배양을 해보세요, 원심분리기 12,000 rpm 1 세포를 수집하는 데 분, 그리고 상등액을 최대한 흡인합니다.. 시약 완충액 IV 250μl와 RNaseA 10μl를 추가합니다. (10 mg/ml) 수집된 세포에, 철저히 중단하다, 그리고 65°C에서 배양하세요. 10 분.

비. 그라인딩 티슈를 초과하지 않음 25 액체 질소를 사용하여 mg을 미세한 분말로 만듭니다.. 시약 완충액 IV 200μl 추가, 20단백질분해효소 K 1μl (10 mg/ml), 및 RNaseA 10μl (10 mg/ml) 가루에, 잘 흔들어, 그리고 65°C에서 배양하세요. 30 분, 이 기간 동안 혼합물을 4번 흔듭니다..

2. 추가하다 200시약 완충액 Cplus의 μl 용해물에 넣고 잘 섞는다. 흰색 침전물이 나타나는 경우, 방해받지 않고 그대로 둘 수 있어; 침전물이 사라지면 후속 실험에 영향을 미치지 않습니다..

3. 추가하다 200무수 에탄올 μl 그리고 잘 섞어주세요. 약간의 강수량이 발생할 수 있음, 하지만 후속 실험에는 영향을 미치지 않습니다..

4. 얻은 액체를 DNA 추출 정제 컬럼에 적용 (소매) (매번 약 650~700μl), 실온에 잠시 놓아두세요 2 분, 원심분리기 12,000 rpm 30 초, 수거된 폐기물을 폐기하다, 다음 단계를 위해 수집 튜브를 정제 컬럼에 다시 삽입합니다..

5. DNA 추출 정제 컬럼을 배치합니다. (소매) 새로운 컬렉션 슬리브로, 추가하다 700μl의 씻다완충기 1, 원심분리기 12,000 rpm 30 초, 폐기물을 버리다, DNA 추출 정제 컬럼을 배치합니다. (소매) 다음 단계를 위해 다시 슬리브 안으로 들어가세요.

(메모: Rinse Buffer에 무수에탄올 첨가 확인 1.)

6. 추가하다 500μl의 씻다완충기 1 DNA 추출 정제 컬럼으로 (소매), 원심분리기 12,000 rpm 30 초, 멤브레인이 더 건조되도록 원심분리 시간을 적절하게 연장하십시오..

(메모: 에탄올은 후속 실험에 중요한 영향을 미칩니다.; 그러므로, 막 건조가 중요합니다. 원심분리 후, 용출 전에 에탄올이 남아 있지 않은지 확인하십시오.. 나중에 폐기물 및 수집 튜브를 폐기하십시오.. Wash Buffer로 헹군 후 1, DNA 정제 컬럼의 멤브레인은 희미한 색상을 띠어야 합니다.. 원심분리 후 DNA 정제 컬럼을 조심스럽게 제거하세요., 에탄올 오염을 방지하기 위해 수집 튜브에 닿지 않도록 하십시오.)

7. DNA 정제 컬럼을 새로운 원심분리 튜브에 넣습니다., 100μl의 Elution Buffer를 멤브레인에 직접 첨가하세요., 원심분리기 12,000 rpm 1 분, DNA를 수집하고.

(메모: 50μl의 Elution Buffer로 DNA를 용출하면 DNA 농도는 증가하지만 총 DNA 수율은 감소합니다.)