| 属性 | 詳細 |
|---|---|
| 猫 | G3282 |
| サイズ | 2 ×50mL / 2 ×100mL |
| ストレージ | RT, 光を避ける, に有効です 1 年 |
導入
- ヘモシデリンの特徴:
- ヘモグロビンの分解に由来する, 鉄分が含まれているため、黄金色または茶色がかった黄色に見えます.
- マクロファージが赤血球を飲み込み、ヘモグロビンを鉄を含まないオレンジ色の血液と鉄を含むヘモジデリンに分解するときに形成されます。.
- パールズプルシアンブルー反応:
- ヘモジデリン染色とも呼ばれます.
- フェロシアン化カリウムと希酸で処理すると青色を呈します。.
- 食細胞でよく見られる’ 間質, 第二鉄鉄塩の展示.
- 古典的な組織化学反応, センシティブ, 組織内の第二鉄の表示に優れています.
- 原理は、フェロシアン化カリウム溶液と塩酸を使用してタンパク質から第二鉄を分離することです。, 不溶性のプルシアンブルー化合物を形成する.
- 安定した第二鉄のフェロシアン化物により、反応後に赤色染料で再染色が可能.
- パールステインの使用法:
- 出血性病変を表示するために一般的に使用されます, 特に食細胞において.
- ヘモジデリンの沈着を判定し、他の色素と区別するのに役立ちます。.
- 染色液が安定している, 沈殿物なしで長期間持続する, 幅広い用途に適しています.
- 染め直しも可能, さまざまな染色技術に多用途に使用できます.
キットのコンポーネント
| 試薬 | 音量 | ストレージ |
|---|---|---|
| 試薬(あ): パールステイン | A1: 25mL <br> A-2: 25mL | 50mL <br> RT, 光を避ける |
| 試薬(B): ニュートラルレッド溶液 | 50mL <br> 100mL | RT, 光を避ける |
ご使用の前に, A1とA-2を等量混合してPerls染色を形成します. 事前に準備するのは不向き.
自己提供の資料
10% 中性ホルマリン固定剤, エタノールシリーズ, 蒸留水, 4% パラホルムアルデヒド
プロトコル (参照のみ)
(1) パラフィン切片染色用
- 組織を固定します 10% 天然ホルマリン固定剤, 脱水, そして埋め込みます.
- 切片厚さ4μm, 蒸留水への脱蝋, そしてすすいでください 1 分.
- 切片をパール染色液に浸します。 15-30 分. 蒸留水で完全に洗い流してください。 2-5 分.
- 核をニュートラルレッド溶液で軽く染色します。 15-30 秒. 水道水ですすぐ 1-5 秒.
- 従来の脱水, 透明, そしてレジネンでシールします.
(2) 凍結切片染色用
- 脱脂なし, 蒸留水で直接素早く洗い流してください。 2-3 分.
- パラフィンセクションとして他の手順に従います.
(3) 培養細胞染色用
- 修正してください 4% パラホルムアルデヒド用 10-20 分.
- 水道水で2回洗い流します 2 毎回数分.
- 染色の手順, 脱水, 透明性, およびシーリングはパラフィンセクションの手順と同じです. それに応じて時間を調整します.
結果
- ヘモシデリンまたは第二鉄: 青
- 核およびその他の組織: 赤
ネガティブコントロール
同じ隣接するセクションを取る, 水に脱蝋する. での孵化後 5% シュウ酸 2-6 時間, 上記と同じ手順に従います. 結果はマイナスになるはずです.
注記
- きれいなセクションを確実に脱脂します.
- 使用 10% 組織固定用中性ホルマリン. 一般的なホルマリンによる長期固定は組織を損傷する可能性があります. 酸性固定剤を避ける, クロメート処理は鉄の保存を妨げるため.
- 容器を清潔に保ち、金属鉄製品の使用を避けてください。. 鉄汚染を防ぐため、セクションや容器の洗浄には蒸留水を使用してください。.
- サンプルに応じてパールステインの染色時間を調整します.
- すべてのセクションに同じポジティブ コントロール セクションを使用する. 剖検肺組織は良好な対照である, 鉄陽性マクロファージを多く含む (心不全細胞).
- エタノールシリーズは頻繁に交換してください.
- 凍結切片や細胞染色に, 特定の条件に基づいて実験条件を探索する. 健康と安全のために実験服と使い捨て手袋を着用してください.
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