太陽肝炎ウイルス染色キット (シカタのオルセイン染色で)

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説明

属性 詳細
G1921
サイズ 3 ×50mL
ストレージ 2-8℃, 光を避ける, に有効です 6 月

キットのコンポーネント

試薬 音量 ストレージ
試薬(あ):
Shikata Acidizing Solution Al: Shikata Oxidant 25mL
A2: Shikata Acid Solution 25mL
試薬(B): Shikata Bleaching Solution 50mL
試薬(C): Acidic Orcein Stain Solution 50mL

ご使用の前に, mix Al with A2 in equal amounts to form Shikata Acidizing Solution. It is ready to use.

導入

  • Viral Hepatitis Description:
    • Viral hepatitis is an infectious disease characterized by the degeneration and necrosis of liver parenchymal cells induced by hepatitis viruses.
  • Prevalence of Hepatitis B Virus (HBV):
    • Hepatitis B virus (HBV) is globally prevalent.
    • HBsAg (Hepatitis B surface antigen) is typically present in the liver cytoplasm.
  • Immunohistochemistry for HBsAg and HBcAg:
    • 現在, HBsAg and HBcAg can be displayed via immunohistochemistry techniques.
  • Staining Methods for HBsAg:
    • Various methods exist for displaying HBsAg, including the Shikata Orcein Stain Method, Aldehyde Fuchsin Method, Victoria Blue Method, 等.
  • キットの説明:
    • This kit offers simplicity and specificity in staining HBsAg.
    • The staining effect may vary with different batches of raw materials.
    • Orcein likely combines with the disulfide bond of cystine in HBsAg to produce color.

プロトコル (Our reference only)

  1. 組織を固定します 10% formalin. Conventionally dehydrate and embed.
  2. Cut the section into 4μm. Conventionally dewax and rehydrate.
  3. Oxidize with Shikata Oxidant for 5 分. Rinse with water slightly.
  4. Bleach with Shikata Bleaching Solution for 2 minutes to remove the color of Shikata Acidizing Solution.
  5. Rinse with distilled water slightly. Immerse with 70% ethanol slightly.
  6. Stain with Acidic Orcein Stain Solution under cover for 5 hours or more.
  7. Differentiate with 95% ethanol until a clear light brown base is achieved.
  8. Dehydrate rapidly with absolute ethanol, transparentize with xylene, そしてレジネンでシールします.

結果

  • HBsAg Positive Substance: Brown-red to deep brown
  • 背景: Light red on different levels

注記

  1. Shikata Acidizing Solution must be used immediately; さもないと, its oxidation power will be reduced.
  2. Acidic Orcein Stain Solution should be restored to RT before use, and it can be reused several times.
  3. After staining for 5 時間, remove the section, wash it in 70% エタノール, then wash it in distilled water, and view under the microscope. If the staining is light, soak it in 70% ethanol and then stain with Acidic Orcein Stain Solution. If necessary, it can be stained overnight.
  4. When staining with orcein, lipofuscin has a positive reaction. The difference is that lipofuscin has a deeper color, presenting small particles of uniform size in the cytoplasm; HBsAg has a shallower color, presenting fine particles.
  5. 安全と健康のために, please wear laboratory attire and disposable gloves.

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