The Kit provides fast purification of high-quality RNA from paxigene Blood RNA Tube using silica-membrane spin columns. RNA purified using the HiPure System is ready for applications such as RT-PCR, ノーザンブロット, ポリA+ RNA (mRNA) 精製, ヌクレアーゼ保護, およびin vitro翻訳.
詳細
仕様
| 特徴 | 仕様 |
| 主な機能 | Isolation of total RNA from Paxgene RNA Tubes |
| アプリケーション | RT-PCR, qPCR, 北ハイブリダイゼーション, NGS, nucleic acid protection, in vitro translation |
| 精製方法 | ミニ スピンカラム |
| 精製技術 | シリカ技術, DNA filtration technology |
| 加工方法 | マニュアル (遠心分離または真空) |
| サンプルの種類 | Blood in the preservation tube |
| サンプル量 | 2.5ミリリットル |
| 溶出量 | ≥30μl |
| カラムあたりの液体搬送量 | 800μl |
| カラムの結合収量 | 100μg |
原理
The Kit is for the purification of total RNA from 2.5 ml human whole blood collected in a PAXgene Blood RNA Tube. Purification begins with a centrifugation step to pellet nucleic acids in the PAXgene Blood RNA Tube. The pellet is washed and resuspended, and incubated in optimized buffers together with proteinase K. DNA wash The lysate is passed through a DNA Mini column. Ethanol is added to adjust binding conditions, and the lysate is applied to a column.RNA is selectively bound to the silica membrane as contaminants pass through. The remaining contaminants are removed in several efficient wash steps. Between the first and second wash steps, the membrane is treated with DNase I to remove trace amounts of bound DNA. After the wash steps, RNA is eluted in elution buffer and heat-denatured.
利点
- 高品質 – 高純度総RNAは、さまざまな敏感な下流のアプリケーションで直接使用できます
- 速い – isolation of several samples can be completed in 40 minutes by using the column purification method
- Safety – no phenol-chloroform extraction is required
- センシティブ – direct lysis of blood, プラズマ, and other samples without separation of leukocytes
キット内容
| コンテンツ | R416802 | R416803 |
| 浄化時間 | 10 準備 | 50 準備 |
| HiPure RNA Mini Columns I | 10 | 50 |
| gDNA Filter Mini Columns | 10 | 50 |
| 2ml 採取管 | 30 | 150 |
| RNaseフリーウォーター | 60 ミリリットル | 250 ミリリットル |
| Buffer MBR1 | 10 ミリリットル | 30 ミリリットル |
| Buffer MBR2 | 5 ミリリットル | 15 ミリリットル |
| バッファRW1 | 15 ミリリットル | 60 ミリリットル |
| バッファRW2* | 6 ミリリットル | 20 ミリリットル |
| プロテイナーゼK | 12 mg | 50 mg |
| プロテアーゼ溶解バッファー | 1.8 ミリリットル | 5 ミリリットル |
| DNase I | 120 μl | 600 μl |
| DNase Buffer | 6 ミリリットル | 30 ミリリットル |
保管と安定性
Proteinase K should be stored at 2–8°C upon arrival. DNase I should be stored at -20°C. しかし, 短期保管 (DNase I up to 1 週, Proteinase K up to 8 週) 室温で (15–25℃) 彼らのパフォーマンスには影響しない. 残りのキットコンポーネントは室温で保存できます (15–25℃) 少なくとも一定期間は安定しています 18 この状況下で数か月.
実験データ
レビュー
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