導入
HiPure Fastfilter プラスミドDNA Midi キットは、HiPure テクノロジーのパワーと、実績のあるアルカリ性の一貫性を組み合わせています。-SDS 細菌細胞を溶解して高品質の DNA を提供します. HiPure DNA カラムは結合を促進します, 洗浄と溶出のステップにより、複数のサンプルを同時に処理できるようになります。. このシステムには、アルカリ溶解後の遠心分離ステップを置き換える特殊なフィルター カートリッジも含まれています。. このシステムで精製されたプラスミド DNA は自動蛍光 DNA シーケンスに適しています, 制限エンドヌクレアーゼ消化, 哺乳類細胞のトランスフェクション, およびその他の操作. まで 250 μg の高コピー数プラスミド DNA または 10-75 µg の低コピー数プラスミド DNA を精製できます。 15-50 mLの一晩培養.
詳細
仕様
特徴 | 仕様 |
主な機能 | 30~50mlの細菌培養物から最大250μgのプラスミドDNAを分離 |
アプリケーション | 酵素消化, 順序付け, PCR そしてラベル付け, 等. |
精製方法 | ミディ スピンカラム |
精製技術 | シリカ技術 |
加工方法 | マニュアル (遠心分離または真空) |
サンプルの種類 | 従来のプラスミド, 30KB未満のプラスミド |
サンプル量 | 30-50ミリリットル |
収率 | 50-250μg |
溶出量 | ≧300μl |
実行あたりの時間 | 60分以内 |
カラムあたりの液体搬送量 | 4ミリリットル |
カラムの結合収量 | 250μg |
原理
HiPure Plasmid の手順は、細菌細胞のアルカリ溶解と、それに続く高濃度の塩の存在下での DNA のシリカへの吸着に基づいています。. このキットで使用されている独自のシリカ膜は、プラスミド DNA ミニプレップ用のガラスまたはシリカ スラリーを完全に置き換えます。. 手順は次のとおりです。 3 基本的な手順: アルカリ法による細菌溶解物の調製と清澄,次に上清をカラムに移して DNA を結合させます。. タンパク質やその他の不純物を洗浄した後, 核酸は最終的に低塩緩衝液で溶出されました (10mmトリス, pH9.0, 0.5mm EDTA).
利点
- 高純度 – 精製されたプラスミドは配列決定に直接使用できます, 酵素消化と PCR, 等.
- 速い – それだけが必要です 15-60 隔離が完了するまでに数分
- 高収量 – 1つのカラムで最大70µgのプラスミドを結合可能
キット内容
コンテンツ | P101302 | P101303 |
浄化時間 | 25 準備 | 100 準備 |
RNase A | 10 mg | 40 mg |
バッファP1 | 80 ミリリットル | 300 ミリリットル |
バッファP2 | 80 ミリリットル | 300 ミリリットル |
バッファLEN3 | 40 ミリリットル | 150 ミリリットル |
バッファGBT | 60 ミリリットル | 250 ミリリットル |
バッファPW1 | 60 ミリリットル | 250 ミリリットル |
バッファPW2 | 20 ミリリットル | 100 ミリリットル |
溶出バッファー | 30 ミリリットル | 120 ミリリットル |
HiPure DNA Midi カラム III | 25 | 100 |
ライセートクリアミディシリンジ | 25 | 100 |
15 ml 採取管 | 50 | 200 |
保管と安定性
キットのコンポーネントは乾燥した状態で室温で保管できます。 (15-25℃) 少なくとも一定期間は安定しています 18 この状況下で数か月. バッファー内に沈殿物が形成された場合, 37℃に温めて溶かす. RNase A添加後,バッファ P1 は次の期間安定しています。 6 2~8°Cで保管した場合、数か月.
購入ガイド
名前 | カタログ番号 | サンプル量 | 列の種類 | 溶出量 | 収率 | 実行あたりの時間 | 遠心分離機の要件 |
HiPure プラスミド ミニ キット | P1001 | 1-5ミリリットル | 1.5mlカラム | 30-50μl | 5–35μg/5ml | 30分以内 | 小型遠心分離機 |
HiPure プラスミド ミニ キット II | P1002 | 5-15ミリリットル | 1.5mlカラム | 75-100μl | 20-80μg/15ml | 30分以内 | 小型遠心分離機 |
HiPure プラスミド プラス 96 キット | P1006 | 1-1.5ミリリットル | 96 ウェルプレート | 70-150μl | 1-15μg/1ml | 60分以内 | 96 ウェルプレート遠心分離機 |
HiPure Fastfilter プラスミド Midi キット | P1013 | 30-50ミリリットル | 15mlカラム | 0.3-0.8ミリリットル | 50–250μg/50ml | 60分以内 | 15ml遠心分離機 |
HiPure Fastfilter Plasmid Maxi キット | P1014 | 100-200ミリリットル | 50mlカラム | 0.5-1.5ミリリットル | 0.4–1mg/200ml | 60分以内 | 50ml遠心分離機 |
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