DTT, またはジチオスレイトール, 生化学や分子生物学の研究室で一般的に使用される還元剤です. 2つのチオールを含む小さな分子です。 (スルフヒドリル) グループを形成し、タンパク質のジスルフィド結合を切断し、さまざまな生化学アッセイで還元環境を維持するために利用されます。. DTT の CAS 番号は次のとおりです。 3483-12-3.
DTTの用途:
- タンパク質の変性と展開:
- DTT はタンパク質のジスルフィド結合を還元するためによく使用されます, タンパク質構造の変性と展開を引き起こす. これは、タンパク質のフォールディングを研究する場合、または分析用にタンパク質を準備する場合に特に役立ちます。.
- 酵素の活性化:
- 一部の酵素は活性化するために還元環境を必要とします. DTTは還元状態を維持するために使用されます, これらの酵素が適切に機能するようにする.
- タンパク質凝集体の減少:
- DTT はタンパク質凝集体やミスフォールドタンパク質を減らすために使用できます。, ゲル電気泳動などの実験中の可溶化と分離を促進します。.
- 細胞培養における酸化の防止:
- 細胞培養において, DTT は、タンパク質のシステイン残基の酸化を防ぎ、特定の細胞プロセスに必要な還元条件を維持するために培地に添加されることがあります。.
DTTの使い方:
- DTT溶液の調製:
- DTT を適切な緩衝液または溶媒に溶解して、目的の濃度の DTT 溶液を作成します。. 一般的に使用される濃度の範囲は次のとおりです。 1 mMから 100 mM, 特定の用途に応じて.
- タンパク質サンプルへの追加:
- DTT は通常、望ましい還元条件を達成するためにタンパク質サンプルまたは反応混合物に直接添加されます。. DTT の濃度は、特定の実験要件に基づいて最適化する必要があります。.
- インキュベーション:
- DTT がジスルフィド結合を還元できるように、反応混合物を十分な時間インキュベートします。. インキュベーション時間は、実験の設定や研究の具体的な目標によって異なります。.
- 焼入れ:
- 還元反応が完了したら, ダウンストリームアプリケーションへの干渉を防ぐために、過剰な DTT を抑制することが不可欠です. これは、クエンチング試薬を添加するか、その他の適切な方法によって実現できます。.
- 分析:
- サンプルの分析を進めます, ゲル電気泳動が含まれるかどうか, 酵素アッセイ, または他の生化学的手法.
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