Solarbio rifiuta la soluzione di macchia di grammo(Conn modificato)

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  • Produttore: Principali marchi cinesi
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  • Modalità di pagamento: PayPal sicuro o carta di credito.

Descrizione

Specifica: 4*50M.L

Reagente Composizione
Reagente (UN) Soluzione di colorazione viola cristallina
Reagente (B) Soluzione di differenziazione dell'etanolo acido
Reagente (C) Soluzione di colorazione viola di cristallo di ossalato di ammonio
Reagente (D) Soluzione di iodio del rifiuto

Magazzinaggio: Temperatura ambiente, evitare la luce

Descrizione del prodotto:

  • Colorazione grammo:
    • Invenzione:
      • Inventato dal medico danese Christian Gram in 1884.
    • Metodo:
      • Metodo di colorazione differenziale ampiamente utilizzato in batteriologia.
      • Forma di controcolorante.
    • Scopo:
      • Differenzia i batteri in due classi principali:
        • Gram-positivo (G*)
        • Gram-negativo (G)
    • Meccanismo:
      • Colorazione differenziale in base alle differenze in:
        • Permeabilità della parete cellulare a etanolo
        • Capacità di resistere alla decolorazione
        • Spessore e struttura dello strato peptidoglicano
    • Processo di colorazione:
      • Cellule colorate con viola di cristallo e quindi trattate con iodio a forma di complessi insolubili.
      • Decolorato dall'etanolo.
    • Punti isoelettrici:
      • Batteri gram-positivi: punti isoelettrici a pH 2.0-3.0
      • Batteri gram-negativi: punti isoelettrici a pH 4.0-5.0
    • Proprietà vincolanti:
      • I batteri gram-positivi portano più cariche negative.
      • Lega più strettamente ai coloranti di base come Crystal Violet.
    • Formazione di complesso:
      • Dopo l'aggiunta di Mordant (iodio) in cellule batteriche:
        • Si forma il complesso cristallino-viola-proteina insolubile in acqua.
        • Si lega ai sali di magnesio dell'acido ribonucleico all'interno dei batteri Gram-positivi.
    • Risultato:
      • Batteri colorati meno soggetti alla decolorazione.

Passaggi operativi (solo per riferimento):

  1. Fissazione tissutale in 10% formalina, Incorporamento di disidratazione di routine.
  2. Tagliare le sezioni a uno spessore di 4μm, e dewax abitualmente ad annaffiare.
  3. Fette di colorazione per calare in soluzione di colorazione viola cristallina per 5 minuti, Quindi scartare la tintura.
  4. Differenziare in soluzione di differenziazione dell'etanolo acido per 2-5 secondi.
  5. Risciacquare con acqua fluente per 3-5 secondi.
  6. Fette di colorazione a goccia nella soluzione di colorazione viola di cristallo di ossalato di ammonio per 5 minuti, Quindi scartare la tintura. Usa la carta per assorbire delicatamente il liquido in eccesso attorno alle fette.
  7. Tratta le fette con la soluzione di iodio di Weigert per 1 minuto, Quindi scartare la soluzione di iodio. Assorbi ripetutamente l'umidità all'interno delle fette con carta da filtro.
  8. Differenziare con la soluzione orto-toluidina-xilene fino a quando non vi è alcun colore viola lisciviazione dalle fette. Lavare immediatamente con xilene, e osservare al microscopio. Ripeti il ​​lavaggio con xilene fresco più volte per rimuovere accuratamente ortotoluidina. Sigillare con resina neutra.

Risultati della colorazione:

  • Batteri gram-positivi e cellulosa: Blu-viola
  • Batteri gram-negativi: Rosso
  • Nucleo cellulare: Rosso

Precauzioni:

  1. Dopo la colorazione in soluzione di colorazione viola cristallina, Non lavare le fette con acqua. Differenziare direttamente in etanolo acido per fissare il colore colorato da Crystal Violet.
  2. Quando si differenzia con la soluzione ortotoluidina-xilene, scuotere delicatamente le fette per garantire la differenziazione uniforme. Se necessario, Sostituire con fresco orto toluidina-xilene.
  3. Differenzia fino a quando non vi è alcun colore viola che si stacca dalle fette, Quindi scartare immediatamente l'orto toluidina-xilene e lavare con xilene fresco. Osservare al microscopio dopo il lavaggio del xilene.
  4. Se la differenziazione è insufficiente, Aggiungi nuovamente ortotoluidina-xilene e continua la differenziazione fino a quando i batteri Gram-positivi sono chiaramente visibili, ma fai attenzione a non differenziarsi troppo.
  5. Finalmente, Lavare ripetutamente le fette con xilene per rimuovere completamente l'ortoluidina. Se una piccola quantità di toluidina orto rimane sulle fette, Potrebbero svanire facilmente più tardi.
  6. Per la tua sicurezza e salute, Indossare cappotti da laboratorio e guanti usa e getta durante il funzionamento.

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