Un gel prefabbricato proteico (Nativo) 8-20%, 15 Wells è un gel di poliacrilammide pre-realizzato progettato per la separazione delle proteine native in base alle loro dimensioni senza denaturazione. Questi gel sono comunemente usati in tecniche come l'elettroforesi su gel di poliacrilammide nativa (PAGINA) o pagina nativa blu.
Caratteristiche del gel prefabbricato proteico (Nativo) 8-20%, 15 pozzi:
- Composizione del gradiente: Il gel ha una composizione a gradiente di acrilamide, in genere vanno da 8% A 20%, che consente la separazione di proteine su un intervallo di dimensioni elevate.
- 15 Pozzi: Il gel è prefabbricato con 15 pozzi, fornendo all'utente la possibilità di caricare e separare contemporaneamente campioni di proteine multipli.
- Condizioni native: Il gel è progettato per mantenere le condizioni native, preservare la struttura nativa e l'attività delle proteine.
Come usare il gel prefabbricato proteico (Nativo) 8-20%, 15 pozzi:
- Preparazione del gel:
- Rimuovi il gel prefabbricato proteico dalla sua confezione. Posizionare il gel nell'apparato di gel o nel serbatoio dell'elettroforesi, Garantire un corretto allineamento con gli elettrodi.
- Caricamento del campione:
- Prepara i campioni proteici mescolandoli con un tampone di carico adatto che è compatibile con l'elettroforesi nativa. Carica i campioni di proteine nei pozzi del gel usando una micropipetta.
- Elettroforesi:
- Immerge il gel nel tampone di elettroforesi nel serbatoio dell'elettroforesi. Applicare una corrente elettrica secondo le raccomandazioni del produttore. L'elettroforesi nativa funziona in genere a una tensione inferiore rispetto ai gel di denaturazione.
- Esegui durata:
- Esegui l'elettroforesi fino a quando le proteine non sono migrate sufficientemente attraverso il gel in base alla risoluzione desiderata. Il tempo di esecuzione dipenderà dall'apparato specifico e dalle condizioni utilizzate.
- Colorazione gel:
- Dopo l'elettroforesi, Il gel può essere colorato per visualizzare le proteine separate. Le macchie comuni per gel native includono Coomassie Brilliant Blue o Silver Staining.
- Disperazione e imaging:
- Distrarre il gel se necessario, e quindi immagine il gel utilizzando un sistema di documentazione in gel o altri metodi di imaging appropriati.
- Analisi:
- Analizzare il gel per determinare i pesi molecolari e le quantità relative delle proteine separate. Confronta i risultati con gli standard proteici eseguiti sullo stesso gel.
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