Il sangue è una preziosa fonte di DNA per la diagnostica clinica e la ricerca, ma i metodi di estrazione tradizionali presentano delle sfide:
- Pericoli per la sicurezza: Gli agenti patogeni trasmessi dal sangue rappresentano un rischio di infezione durante l'estrazione.
- Perdita di DNA: La rimozione dei globuli rossi può eliminare le frazioni di DNA desiderate (virale, DNA circolante).
- Impurità e inibitori: I componenti del sangue possono interferire con le applicazioni a valle (PCR, Southernblotting).
Questo prodotto offre una nuova soluzione di estrazione del DNA che affronta questi problemi:
- Sicuro ed efficiente: L’assenza di rimozione dei globuli rossi riduce al minimo i rifiuti infettivi e i rischi di contaminazione.
- Recupero completo del DNA: Purifica il DNA totale (genomico, mitocondriale, virale, circolante) per un quadro completo.
- Ampia compatibilità del campione: Funziona con sangue intero (fresco/congelato), plasma, siero, cappotto buffy, e cellule coltivate.
- Applicazioni a valle: Il DNA purificato è adatto per PCR e Southern blotting.
Questo metodo innovativo semplifica l’estrazione del DNA dal sangue garantendo al tempo stesso la sicurezza, efficienza, e recupero completo del DNA. Rappresenta un progresso significativo per i ricercatori nel campo della diagnostica, forense, e ricerca medica.
Nota: Questo bollettino corregge la dichiarazione precedente sulla compatibilità dei campioni. Questo metodo non è adatto per campioni di tessuto.
Specifiche
| Caratteristiche | Specifiche |
| Funzioni principali | Isolamento del DNA totale da 2 ml di sangue e 200 mg di tessuto utilizzando la colonna Midi |
| Applicazioni | PCR, Rilevamento del bullone e del virus meridionale, eccetera |
| Metodo di purificazione | Mezzogiorno colonna rotante |
| Tecnologia di purificazione | Tecnologia della silice |
| Metodo di processo | Manuale (centrifugazione o vuoto) |
| Tipo di campione | Tessuto, cellule, sangue, saliva, tamponi, macchia di sangue, sperma, e altri campioni clinici |
| Importo del campione | 0.2-2 ml |
| Volume di eluizione | ≥300μl |
| Tempo per corsa | ≤80 minuti |
| Volume di trasporto del liquido per colonna | 4ml |
| Resa legante della colonna | 1mg |
Principi
Questo prodotto offre un metodo semplificato per purificare il DNA dai campioni di sangue utilizzando la tecnologia delle colonne di silice.
Il processo:
- Lisi e digestione: Il campione di sangue viene trattato con una soluzione di lisato e proteasi per rompere le cellule e degradare le proteine, rilasciando il DNA nella soluzione.
- Legame con la silice: Il lisato viene trasferito su una colonna di silice. La membrana di silice nella colonna lega selettivamente le molecole di DNA, mentre le proteine e altre impurità passano attraverso.
- Lavaggio: I tamponi di lavaggio rimuovono le proteine non legate e i detriti cellulari che non hanno aderito alla silice.
- Eluizione: Un tampone a basso contenuto di sale (in genere 10 mmM Tris, pH 9.0, E 0.5 MM EDTA) viene utilizzato per eluire il DNA purificato dalla silice. Ciò interrompe l'interazione tra il DNA e la silice, consentendo la raccolta del DNA purificato in una provetta separata.
Vantaggi
- DNA di alta qualità – soddisfa una varietà di applicazioni a valle, compresa la PCR, qPCR, digestione enzimatica, ibridazione, eccetera.
- Veloce – senza separazione dei leucociti, estrazione organica, o precipitazione di etanolo
- Semplice – tutti gli acidi nucleici possono essere ottenuti mediante digestione diretta
- Ampia applicabilità – gestire una varietà di campioni liquidi
Contenuto del kit
| Contenuti | D311302 | D311303 |
| Tempi di purificazione | 20 | 100 |
| Colonne HiPure gDNA Midi | 20 | 100 |
| 15ml Provette di raccolta | 40 | 200 |
| ATL tampone | 50 ml | 250 ml |
| Buffer al | 50 ml | 250 ml |
| Buffer GW1* | 22 ml | 110 ml |
| Buffer GW2* | 12 ml | 50 ml |
| RNasi A | 20 mg | 90 mg |
| Proteinasi K | 100 mg | 440 mg |
| Tampone di dissoluzione della proteasi | 10 ml | 30 ml |
| Buffer ae | 20 ml | 120 ml |
Conservazione e stabilità
Per prestazioni ottimali:
- Conservare la proteinasi K e la RNasi A a 2-8°C (frigorifero) all'arrivo.
Archiviazione accettabile a breve termine:
- La proteinasi K e la RNasi A possono essere conservate fino a 12 settimane a temperatura ambiente (15-25°C) senza influire sulle loro prestazioni.
Componenti del kit rimanenti:
- Conservare tutti gli altri componenti del kit asciutti a temperatura ambiente (15-25°C).
- Sono stabili per almeno 18 mesi in queste condizioni.
Nota importante:
- Se si conserva l'intero kit a temperatura ambiente, assicurarsi che i tamponi siano ridisciolti prima dell'uso e riscaldare sempre tutti i tamponi a temperatura ambiente prima di utilizzarli.
Guida all'acquisto
| Nome | GATTO N | Importo del campione | Protocollo leucocitario* | Tipo di colonna | Volume di eluizione | Resa media | Tempo per corsa |
| Mini kit HiPure per il DNA del sangue | D3111 | 10-200ml | 1ml | 2colonna ml | ≥20μl | 5-9µg/200 µl | ≤30 minuti |
| Tessuto HiPure&Kit MIDI DNA di sangue | D3113 | 0.2-2ml | 10ml | 1.5colonna ml | ≥300μl | 20-40µg/1m | ≤80 minuti |
| Tessuto HiPure&Kit maxi DNA di sangue | D3115 | 3 -10ml | 10ml | 15colonna ml | ≥700μl | 20-40µg/1m | ≤90 minuti |
| Tessuto HiPure&DNA del sangue 96 Kit | D3117 | 1-200ml | 1ml | 96 bene piatto | 3-8µg/200 µl |
