DTT Ditiotreitolo (5G) CAS 3483-12-3

digitale terrestre, o Ditiotreitolo, è un agente riducente comunemente utilizzato nei laboratori di biochimica e biologia molecolare. È una piccola molecola che contiene due tioli (sulfidrile) gruppi e viene utilizzato per rompere i legami disolfuro nelle proteine ​​e mantenere un ambiente riducente in vari test biochimici. Il numero CAS per DTT è 3483-12-3.

Usi del DTT:

1. Denaturazione e unfolding delle proteine:
   • Il DTT viene spesso utilizzato per ridurre i legami disolfuro nelle proteine, portando alla denaturazione e al dispiegamento della struttura proteica. Ciò è particolarmente utile quando si studia il ripiegamento delle proteine ​​o quando si preparano le proteine ​​per l'analisi.
2. Attivazione degli enzimi:
   • Alcuni enzimi richiedono un ambiente riducente per essere attivi. La DTT viene utilizzata per mantenere una condizione riducente, garantire il corretto funzionamento di questi enzimi.
3. Riduzione degli aggregati proteici:
   • Il DTT può essere utilizzato per ridurre gli aggregati proteici o le proteine ​​mal ripiegate, facilitando la loro solubilizzazione e separazione durante esperimenti come l'elettroforesi su gel.
4. Prevenire l'ossidazione nella coltura cellulare:
   • Nella coltura cellulare, Talvolta al terreno viene aggiunto DTT per prevenire l'ossidazione dei residui di cisteina nelle proteine ​​e mantenere le condizioni riducenti necessarie per alcuni processi cellulari.

Come utilizzare la DTT:

1. Preparazione della soluzione DTT:
   • Sciogliere DTT in un tampone o solvente appropriato per creare una soluzione DTT della concentrazione desiderata. Le concentrazioni comunemente usate vanno da 1 mm a 100 mm, a seconda dell'applicazione specifica.
2. Aggiunta ai campioni proteici:
   • Il DTT viene tipicamente aggiunto direttamente ai campioni proteici o alle miscele di reazione per ottenere le condizioni riducenti desiderate. La concentrazione di DTT dovrebbe essere ottimizzata in base ai requisiti sperimentali specifici.
3. Incubazione:
   • Lasciare incubare la miscela di reazione per un periodo sufficiente per consentire al DTT di ridurre i legami disolfuro. Il tempo di incubazione può variare a seconda della configurazione sperimentale e degli obiettivi specifici dello studio.
4. Tempra:
   • Una volta completata la reazione di riduzione, è essenziale eliminare l’eccesso di DTT per prevenire interferenze con le applicazioni a valle. Ciò può essere ottenuto aggiungendo un reagente di spegnimento o mediante altri metodi appropriati.
5. Analisi:
   • Procedi con l'analisi dei tuoi campioni, se si tratta di elettroforesi su gel, saggi enzimatici, o altre tecniche biochimiche.