Cos'è un test PCR?
Reazione a catena della polimerasi (PCR) Il test si riferisce a una tecnologia rivoluzionaria che ha consentito l'amplificazione esponenziale e l'analisi dei frammenti di DNA e RNA. Dalla sua invenzione in 1983, PCR è diventato essenziale attraverso la diagnostica medica, genetica, ricerca, forense, e altro ancora. Ma cosa comporta esattamente questa tecnica di vincita del premio Nobel e perché è così rivoluzionario?
Cosa rappresenta il test PCR?
La PCR sta per una reazione a catena della polimerasi. L'enzima "polimerasi" copia il DNA, Mentre la "reazione a catena" si riferisce alla copia esponenziale tramite automatizzata, Cambiamenti di temperatura ripetuti.
Nella scienza, La PCR si riferisce all'amplificazione DNA/RNA segmenti rapidamente per l'analisi tramite enzimi polimerasi e ciclo termico controllato a temperatura.
In un contesto medico, Un "test PCR" si riferisce all'utilizzo di questa tecnica di amplificazione per diagnosticare le condizioni dalle malattie infettive al cancro.
Per cosa test per i test PCR?
Un test PCR può rilevare la presenza di vari obiettivi, Compreso:
● patogeni come virus o batteri
● Mutazioni o cellule del cancro
● Cambiamenti genetici legati alle condizioni mediche
Amplificando piccole quantità di DNA o RNA, La PCR consente il rilevamento di questi obiettivi anche con piccole dimensioni del campione. Questo lo rende uno strumento vitale per la diagnostica.
Qual è lo scopo della PCR?
Lo scopo fondamentale della reazione a catena della polimerasi è quello di duplicare rapidamente i segmenti di DNA/RNA per l'analisi. Consente di identificare e studiare il DNA/RNA anche con quantità di partenza molto piccole.
Le applicazioni chiave dei test PCR includono:
● Diagnosi di malattie infettive attraverso il rilevamento del materiale genetico dei patogeni
● Screening per indicatori di cancro come le mutazioni
● Individuazione delle varianti genetiche associate a malattie
● Ricerca di DNA/RNA attraverso la biologia e la medicina così in breve, Mira ad amplificare e analizzare
DNA/RNA per rivelare i biomarcatori per le condizioni, infezioni, o intuizioni di ricerca.
Come si esegue la PCR?
La PCR comporta un automatizzato, macchina a temperatura controllata per replicare il DNA in modo esponenziale attraverso cicli di riscaldamento/raffreddamento ripetuti:
Fare un passo 1: Denaturazione
Il campione di DNA a doppio filamento viene riscaldato a circa 94 ° C per decomprimere i fili e separarli in due singoli fili di DNA. L'alto calore rompe i legami idrogeno tra le coppie di basi.
Fare un passo 2: Ricottura
La temperatura viene ridotta a 50-60 ° C per consentire il legame dei primer ai singoli fili di DNA. I primer sono brevi, Sequenze di DNA sintetiche che corrispondono a parti della regione del DNA target da copiare. Questo passaggio consente ai primer di collegarsi a sequenze complementari sul DNA a filamento singolo.
Fare un passo 3: Allungamento
La temperatura viene aumentata a 72 ° C e la DNA polimerasi sintetizza un nuovo filamento complementare base per base usando nucleotidi abbinati al filamento del modello. Il risultato è due copie del DNA a doppio filamento derivate dal segmento del DNA originale.
Fare un passo 4: Ripetere l'amplificazione
Il ciclo di denaturazione, Primer di ricottura, e l'estensione viene ripetuta in giro 30-40 volte, che si traduce in un miliardo di copie esatte del segmento DNA target. Vari metodi possono quindi essere utilizzati per analizzare il DNA amplificato.
Questi passaggi si ripetono rapidamente, raddoppiando il DNA target ogni ciclo. Dopo 30-40 cicli, Esistono milioni di copie per l'analisi.
Quali sono i 4 Passi di PCR?
PCR abilita l'amplificazione esponenziale utilizzando un semplice, processo in quattro fasi che si ripete attraverso 40 cicli. Questo processo di ciclismo raddoppia il numero di copie del DNA in ciascun ciclo.
1. Inizializzazione: Il campione di DNA target viene riscaldato per separare i due fili. Vengono aggiunti i primer DNA che indicano i punti di avvio/end del segmento da copiare.
2. Denaturazione: La temperatura è aumentata ulteriormente per dividere i due fili di DNA a parte nel DNA a singolo filamento.
3. Ricottura: La temperatura viene abbassata, quindi i primer si legano ai due fili di DNA bersaglio.
4. Estensione: Il DNA polimerasi costruisce nuovi fili che corrispondono alle sequenze target.
Come viene eseguito un test PCR?
Il tipico processo di test PCR prevede:
1. Raccolta campione: Fluido di estrazione contenente DNA/RNA, ad es.. tramite un tampone al naso/gola o collezione di saliva.
2. Elaborazione del campione: Isolare il materiale genetico dal campione tramite kit specializzati.
3. Amplificazione PCR: Esecuzione di ripetute variazioni di temperatura sul campione per copiare esponenzialmente qualsiasi DNA/RNA target presente.
4. Analisi: Rilevare se il bersaglio è stato amplificato indicando la sua presenza.
La PCR richiede solo piccoli campioni, è veloce, e amplifica DNA/RNA accuratamente per il rilevamento.
Cos'è un test PCR Covidid?
Un test PCR per Covid-19 utilizza tamponi per naso/gola o saliva per rilevare l'RNA virale SARS-CoV-2. Amplificando qualsiasi materiale genetico virale, Può diagnosticare l'infezione da coronavirus attivo attraverso un approccio molecolare.
A cosa è usato la PCR?
La PCR consente il rilevamento di DNA/RNA da campioni di traccia. Ciò consente diverse applicazioni come:
● Test Covid-19
● Screening del cancro attraverso mutazioni cellulari
● Diagnosi di infezioni batteriche/virali
● Test genetici per varianti legate alla malattia
● Impronta digitale del DNA in forense
● Ricerca di genetica, virus, batteri, e altro ancora
Quindi in sintesi, La PCR è un processo di amplificazione vitale che consente l'analisi del DNA/RNA attraverso la medicina, biologia, forense, e scienza.
Esame del sangue PCR Intervallo normale
Mentre i test PCR vengono utilizzati attraverso le specialità, Un esame del sangue PCR può monitorare i livelli di carico virale per alcune infezioni come l'HIV, Epatite b, o epatite c. L'intervallo normale esatto varia. Tuttavia, Un carico virale non rilevabile o basso è il bersaglio, Poiché misurazioni più elevate indicano un'infezione scarsamente controllata o peggioramento.
Test PCR per l'HIV
I medici utilizzano esami del sangue PCR per monitorare i livelli di carico virale dell'HIV in pazienti positivi. Un carico virale non rilevabile indica che il trattamento antiretrovirale sta sopprimendo efficacemente la replicazione virale. D'altra parte, L'aumento dei livelli di carico virale avverte del peggioramento dell'infezione che necessita di cambiamenti farmacologici. Pertanto la PCR consente frequenti test per l'HIV per guidare il trattamento in base alle tendenze di carico virale. Serve come barometro dell'efficacia del trattamento e aiuta a apportare modifiche tempestive per stare al passo con l'infezione.
Test PCR vicino a me
Se vuoi essere testato tramite la tecnologia PCR, Contatta sempre prima il tuo medico. Possono avvisare se i test diagnostici della PCR sono raccomandati in base ai sintomi, potenziali esposizioni, Storia dei viaggi, o altri fattori di rischio prima di guidare i passaggi successivi.
Puoi anche cercare a livello locale per termini come "PCR Test vicino a me" o "Covid PCR Test vicino a me". Varie cliniche, ospedali, Labs, e i centri sanitari offrono test PCR. Ma di nuovo, Consultare un operatore sanitario per determinare i test adeguati in base alle valutazioni del rischio individuali.
Il takeaway
In sintesi, La reazione a catena della polimerasi è una tecnologia rivoluzionaria vincitrice del premio Nobel che consente tutto, dai test Covid-19 al rilevamento di tumori o condizioni ereditarie.
Duplicando rapidamente DNA/RNA da campioni microscopici, La PCR è diventata parte integrante attraverso la medicina moderna e la ricerca scientifica. Quindi se individuare un'infezione da coronavirus o una mutazione genetica chiave, La PCR promette di continuare a beneficiare della salute globale per i decenni a venire.
