Virus Sindrom Bintik Putih（WSSV）Alat Uji Asam Nukleat (Metode Pemeriksaan Fluoresen PCR) 24T

Produk ini perlu dikemas dengan kantong es dan dikirim melalui FedEx atau UPS.
Itu akan tiba di dalam 7-10 hari. Biaya pengiriman sudah termasuk dalam harga produk.

Perkenalan produk：

Alat tes ini menawarkan metode yang cepat dan akurat untuk mendeteksi Virus White Spot Syndrome (WSSV) dalam udang.

• Teknologi: Menggunakan kuantitatif neon waktu nyata PCR (Metode penyelidikan TaqMan) untuk deteksi sensitif dan spesifik.
• Target: Memanfaatkan primer spesifik dan probe fluoresen yang dirancang untuk menargetkan rangkaian asam nukleat unik WSSV.
• Aplikasi: Mendeteksi WSSV di berbagai sampel udang, termasuk:
  • Jaringan hewan
  • Memberi makan
  • Jenis sampel lainnya (konsultasikan spesifikasi kit)
• Deteksi Ganda: Memberikan hasil kualitatif dan kuantitatif:
  • Kualitatif: Menentukan ada tidaknya WSSV.
  • Kuantitatif: Mengukur jumlah asam nukleat WSSV yang ada, memungkinkan untuk penilaian viral load.
• Pemantauan Waktu Nyata: Memanfaatkan PCR real-time untuk pemantauan amplifikasi secara terus-menerus di seluruh reaksi, memungkinkan hasil yang cepat.

Alat uji yang mudah digunakan ini menyediakan alat yang berharga bagi petambak udang, peneliti, dan laboratorium diagnostik untuk deteksi dan pengelolaan WSSV yang efektif.

Isi produk：

Komponen	WP2101005-01(24T)
Solusi reaksi WSSV	23μL per sumur × 8 sumur per strip × 3 strip
Kontrol positif WSSV	100μL
kontrol negatif	100μL

Penyimpanan:

Simpan pada suhu -20°C, dengan umur simpan setidaknya 12 bulan.

Instrumen yang berlaku：

seri ABI (ABI 7300/ABI 7500/Langkah Pertama, dll.), Seri Roche LightCycler, Bio-Rad CFX 96, SanshiBio Q162D, dan instrumen PCR kuantitatif fluoresensi waktu nyata lainnya

Pemrosesan sampel：

Proses sampel sesuai dengan standar yang relevan, dan menyimpan sampel yang telah diproses untuk digunakan nanti.

Prosedur eksperimental：

• Persiapan Sampel (Area Persiapan Sampel)

Silakan merujuk ke instruksi manual total DNA/Paket ekstraksi RNA, atau gunakan instrumen ekstraksi dan pemurnian asam nukleat otomatis ES08 dengan kit ekstraksi asam nukleat cepat yang cocok (metode manik magnetik), atau perangkat/metode ekstraksi asam nukleat lainnya yang memenuhi standar relevan untuk mengekstraksi asam nukleat dari sampel yang diproses. Sampel asam nukleat yang diekstraksi harus diuji sesegera mungkin dan disimpan dalam lemari es, atau disimpan pada suhu -20°C.

• Persiapan Sistem Reaksi (Menambah Luas)

2.1 Keluarkan tabung kendali positif WSSV, tabung kontrol negatif, dan tabung reaksi berisi larutan reaksi WSSV yang diperlukan untuk percobaan (n+2) (yaitu, n sampel yang akan diuji + kontrol positif + kontrol negatif), cairkan reagen sepenuhnya pada suhu kamar, mesin sentrifugal untuk 10 detik, sentrifugasi cairan dari dinding tabung dan tutupnya ke dasar tabung, dan simpan di lemari es untuk digunakan nanti.

2.2 Kemudian tambahkan 2μL kontrol negatif yang diekstraksi, sampel asam nukleat, dan kontrol positif WSSV ke tabung reaksi pada strip delapan baris, tutup penutup tabung, membuat rekor, dan jadikan volume total setiap reaksi 25μL. Aduk rata, mesin sentrifugal untuk 30 detik, dan melakukan eksperimen amplifikasi pada instrumen PCR kuantitatif fluoresensi waktu nyata.

• Amplifikasi PCR Fluoresen (Area Amplifikasi dan Analisis Produk)

Pra-denaturasi pada suhu 95°C untuk 3 menit; denaturasi pada suhu 95°C untuk 5 detik, anil dan ekstensi pada suhu 60°C untuk 30 detik, untuk 40 siklus, mengumpulkan sinyal fluoresensi pada 60°C. Pilih FAM sebagai grup fluoresensi, dan None sebagai grup pemadam (untuk digunakan dengan instrumen PCR kuantitatif fluoresensi real-time seri ABI, jika diperlukan, hubungi produsen terlebih dahulu atau tambahkan sendiri pewarna kalibrasi ROX, dan pilih ROX sebagai grup pemadam; jika tidak, ikuti prosedur normal).

• Penentuan Hasil

4.1 Nilai Ct kontrol positif < 30 dan sebuah “S” kurva amplifikasi berbentuk muncul, hasil tesnya valid. Jika tidak, percobaan harus diulang. Jika tes ulang masih tidak valid, silakan hubungi tenaga teknis.

4.2 Hasil deteksi sampel: Nilai Ct ≤ 38 dan sebuah “S” kurva amplifikasi berbentuk muncul, menunjukkan hasil yang positif, yang berarti sampel tersebut mengandung Virus White Spot Syndrome (WSSV).

4.3 Hasil deteksi sampel: 38 < Kt < 40, itu dianggap mencurigakan. Sampel harus diuji ulang. Jika tes ulang nilai Ct < 40 dan ada kurva amplifikasi yang jelas, itu dianggap positif; jika tidak, itu dianggap negatif.

4.4 Hasil deteksi sampel: Tidak ada nilai Ct atau nilai Ct ≥ 40 dan tidak “S” kurva amplifikasi berbentuk, itu dianggap negatif, menunjukkan bahwa Virus White Spot Syndrome (WSSV) tidak terdeteksi dalam sampel.

Tindakan pencegahan：

• Alat tes ini mempunyai sensitivitas yang tinggi. Untuk mencegah kontaminasi, eksperimen perlu dipartisi secara ketat, dan isolasi fisik antar partisi disarankan untuk menghindari kontaminasi silang yang disebabkan oleh faktor manusia.
• Kenakan jas lab dan sarung tangan lateks selama percobaan. Gunakan alat terpisah di area berbeda, dan ingat untuk mengganti sarung tangan dan jas lab.
• Komponen dalam larutan reaksi peka terhadap cahaya dan harus disimpan jauh dari cahaya. Cairkan reagen sepenuhnya sebelum digunakan, tetapi hindari pembekuan dan pencairan berulang kali.
• Ikuti instruksi secara ketat untuk langkah-langkah seperti persiapan reagen dan penambahan sampel. Disinfeksi meja kerja, alat sentrifugal, dan pipettor secara teratur menggunakan disinfektan klorin, etanol, agen dekontaminasi asam nukleat, atau sinar ultraviolet.
• Setelah reaksi, tempatkan tabung reaksi PCR dalam kantong tertutup untuk dibuang. Jangan membuka tabung untuk menghindari kontaminasi aerosol.
• Jangan mencampur reagen dari batch yang berbeda. Gunakan dalam tanggal kedaluwarsa. Bahan habis pakai harus diolah tanpa enzim dan steril.
• Hasil tes yang negatif belum sepenuhnya menunjukkan keadaan tidak terinfeksi; hal ini erat kaitannya dengan kualitas asam nukleat yang diperoleh. “Negatif” Hasilnya mungkin disebabkan oleh kualitas sampel asam nukleat yang tidak memenuhi syarat, beban asam nukleat sampel rendah, atau ekstraksi asam nukleat yang gagal (deteksi). Pertimbangan klinis veteriner diperlukan untuk diagnosis spesifik.
• Kemungkinan penyebab positif palsu: Kontaminasi silang selama pengumpulan sampel, angkutan, dan ekstraksi asam nukleat.
• Untuk pertanyaan lainnya, harap segera menghubungi staf teknis pabrikan. Produk ini hanya untuk penggunaan penelitian ilmiah dan tidak dimaksudkan untuk diagnosis klinis atau tujuan lainnya.