Kit pewarnaan asam fosfatase solarbio tartrate tartrate (Perangkap kit noda)

Komponen Perangkat:

Perkenalan:

Asam fosfatase (ACP) tersebar luas di berbagai jaringan, terutama pada lisosom, berfungsi sebagai penanda enzim. Asam fosfatase yang resisten terhadap tartrat (PERANGKAP), ditemukan terutama pada makrofag alveolar manusia dan sel limpa leukemia, dilepaskan ke dalam folikel sel, bukan ke dalam darah. PERANGKAP dalam darah sebagian besar berasal dari osteoklas, memungkinkan penilaian fungsi osteoklas.

Fosfatase Asam Tahan Tartrat (PERANGKAP) Prinsip Stain Kit melibatkan hidrolisis asam fosfatase dengan substrat AS-BI, melepaskan asam fosfat dan naftol pada pH asam. Gabungan naftol dengan garam diazo membentuk produk berwarna yang terlokalisasi di sitoplasma. Pewarnaan positif menunjukkan aktivitas tahan asam tartarat. Biasa digunakan untuk apusan darah segar, noda sel, dan bagian beku.

Materi yang Disediakan Sendiri:

Air Suling, Inkubator, Menggeser, Mikroskop

Protokol (hanya untuk referensi):

Untuk Smear Darah atau Sel:

1. Noda kering, perbaiki dalam TRAP Fixative pada suhu 4°C selama 30 detik-3 menit.
2. Cuci dengan air suling, dan udara kering.
3. Terapkan Solusi Inkubasi TRAP, dan inkubasi pada suhu 37°C dalam gelap selama 45-60 menit. Lalu cuci.
4. Pewarnaan ulang dengan Larutan Hematoxylin atau Larutan Methyl Green selama 2-3 menit.
5. Lihat bagian di bawah mikroskop setelah dicuci atau disegel.

Untuk Bagian Beku:

1. Kembalikan bagian tersebut ke suhu 37°C dengan merendamnya dalam air selama 1-2 menit.
2. Udara kering, perbaiki dalam TRAP Fixative selama 1-3 menit pada suhu 4°C.
3. Cuci dengan air suling, dan udara kering.
4. Terapkan Solusi Inkubasi TRAP, dan inkubasi pada suhu 37°C dalam gelap selama 45-60 menit. Lalu cuci.
5. Pewarnaan ulang dengan Larutan Hematoxylin atau Larutan Methyl Green selama 2-3 menit.
6. Lihat bagian di bawah mikroskop setelah dicuci atau disegel.

Untuk Bagian Parafin:

1. Dewax dan rehidrasi bagian dalam alkohol bertingkat.
2. Cuci dengan air suling, dan udara kering.
3. Terapkan Solusi Inkubasi TRAP, dan inkubasi pada suhu 37°C dalam gelap selama 45-60 menit. Lalu cuci.
4. Pewarnaan ulang dengan Larutan Hematoxylin atau Larutan Methyl Green selama 2-3 menit.

Hasil:

Signifikansi Klinis:

1. Pewarnaan TRAP membantu dalam mendiagnosis leukemia sel berbulu.
2. Pewarnaan positif diamati pada monosit leukemia akut yang belum matang.
3. Limfosit T menunjukkan pewarnaan TRAP positif.
4. Sel Gaucher menunjukkan pewarnaan positif yang kuat.

Catatan:

1. Solusi Inkubasi TRAP mungkin kehilangan efektivitasnya dengan cepat.
2. Kurangi waktu pemaparan untuk pewarnaan bagian yang beku.
3. Gunakan sampel segar segera untuk hasil yang akurat.
4. Simpan jaringan dalam fiksatif pada suhu 4°C tidak lebih dari 24 jam.
5. Kontrol suhu parafin selama penanaman untuk menjaga aktivitas enzim.
6. Pastikan xylene berkualitas tinggi untuk mencegah dekomposisi.
7. Kenakan pakaian eksperimental dan sarung tangan sekali pakai untuk keselamatan.