| Atribut | Detail |
|---|---|
| Kucing No. | D2600 |
| Kemasan | 50T/100t |
| Penyimpanan | Pada suhu kamar (15℃ -25 ℃) di tempat yang kering untuk 1 tahun |
Isi Paket
| Komponen | D2600-50T | D2600-100t |
| Solusi a | 25 ml | 50 ml |
| Solusi b | 3 ml | 6 ml |
| Solusi c | 5 ml | 10 ml |
| Solusi d | 10 ml | 20 ml |
| Buffer cuci | 15 ml | 15 Ml × 2 |
| Penyangga Elusi | 15 ml | 15 Ml × 2 |
| Kolom Adsorpsi | 50 Unit | 100 Unit |
| Tabung pengumpulan | 50 Unit | 100 Unit |
| PCR Penambah | 500 jalan | 1 ml |
| Petunjuk | 1 Bagian | 1 Bagian |
Catatan: Setelah dibuka, Solusi a, B, C, D harus disimpan di 2-8 ℃. Penambah PCR harus disimpan di -20 ℃.
Deskripsi Produk
- Kesesuaian dan kemanjuran:
- Tanah Ekstraksi DNA Genomik Kit sangat ideal untuk mengekstraksi DNA mikroba dari lingkungan tanah yang ekstrem seperti tanah kayu manis, lumpur, abu vulkanik, dll..
- Itu secara efektif melisis bakteri dan jamur, menjaga keragaman DNA mikroba.
- Penghapusan Humus:
- Memanfaatkan bahan adsorpsi humus yang unik untuk secara efisien dan khusus menghapus berbagai komponen humus.
- Proses ini tidak kompromi menghasilkan, dan kemurnian secara signifikan lebih tinggi dibandingkan dengan metode ekstraksi fenol-kloroform.
- Hasil dan integritas DNA:
- Hasil DNA yang diekstraksi sangat besar, dan integritas dipertahankan dengan baik.
- DNA yang diekstraksi cocok untuk berbagai operasi rutin, termasuk pencernaan enzim, PCR, Konstruksi Perpustakaan, Southern blot, dll..
Protokol
Tambahkan etanol absolut yang dibuka segar di buffer cuci sebelum digunakan, Volume didasarkan pada label botol sebagai referensi. Letakkan tutupnya kembali ke dalam botol dan kocok dengan baik. Semua langkah centrifuge dilakukan pada suhu kamar (15℃ -25 ℃).
- Metode a: Menimbang sampel tanah 0,1-0,5g, Tambahkan tanah ke dalam mortir, Tuang jumlah nitrogen cair yang tepat, giling segera, dan ulangi tiga kali. Saat tanah berubah menjadi bubuk, Tambahkan solusi 450ul a, dan terus gemetar selama 1-2 menit sampai zat terlarut sepenuhnya ditangguhkan.
Metode b: Timbang sampel tanah 0,1-0,5g dalam tabung centrifuge (Lebih baik menggunakan 2ml bundar bawah), Tambahkan solusi 450ul a, dan terus gemetar selama 1-2 menit sampai zat terlarut sepenuhnya ditangguhkan. Catatan: Efek penggilingan dengan nitrogen cair akan lebih baik.
- Tambahkan solusi 50ul b, dan membalikkan tabung beberapa kali untuk dicampur sepenuhnya (Jangan goyang dengan keras). Inkubasi pada 65 ℃ mandi air untuk 6 menit, membalikkan, dan aduk masing -masing 2 menit.
- Tambahkan Solusi 100ul C, dan membalikkan tabung beberapa kali untuk dicampur sepenuhnya (Jangan goyang dengan keras). Sentrifugasi di, 12000rpm untuk 10 menit.
- Transfer supernatan ke tabung centrifuge baru, sentrifugasi di, 12000rpm untuk 10 menit.
- Tambahkan Solusi 200UL D ke kolom adsorpsi, Tambahkan supernatan yang disentrifugasi dari langkah 4 ke kolom adsorpsi, dicampur sepenuhnya oleh pipet. Centrifuge pada 12000rpm untuk 1 menit.
- Campurkan filtrat dalam tabung koleksi sepenuhnya, Tambahkan ke kolom adsorpsi, dan centrifuge pada 12000rpm untuk 1 menit.
- Hapus limbah cairan dalam tabung pengumpulan, Tambahkan 500ul Buffer Cuci di kolom adsorpsi, dan centrifuge pada 12000rpm untuk 10 menit.
- Ulangi langkah 7 dua kali (Cuci Total Tiga Kali).
- Hapus limbah cairan dalam tabung pengumpulan, Masukkan kembali kolom adsorpsi ke dalam tabung pengumpulan, dan centrifuge pada 12000rpm untuk 2 menit.
- Keringkan kolom adsorpsi pada suhu kamar(15℃ -25 ℃) selama beberapa menit atau pada 50 ℃ untuk 1 menit.
- Masukkan kolom adsorpsi ke dalam tabung centrifuge baru, Tambahkan 50-100ul Buffer Cuci (Panaskan di 65 ℃ sebelum digunakan), dan centrifuge pada 12000rpm untuk 1 menit.
- Tambahkan filtrat di tabung centrifuge ke kolom adsorpsi, Centrifuge pada 12000rpm untuk 1 menit. Cairan dalam tabung centrifuge adalah larutan ekstraksi DNA genomik tanah.
- Jika efek PCR dari DNA tidak baik, encerkan konsentrasi DNA yang benar atau tambahkan 1/10 Volume Penambah PCR.
Catatan
- Sampel tanah segar akan mendapatkan hasil yang lebih tinggi. Dan lebih baik merujuk pada kondisi pelestarian yang tepat untuk sampel yang berbeda.
- Jika solusinya menunjukkan presipitasi, Redissolve at 37 ℃ mandi air untuk sesaat, curah hujan akan hilang, dan itu tidak mempengaruhi ekstraksi DNA.
- Saat mengambil supernatan, itu harus menghindari mengambil presipitasi, jika tidak, itu akan memblokir kolom penyerapan dan mempengaruhi kemurnian produk.
- Volume buffer elusi tidak boleh kurang dari 50ul, Jika volumenya terlalu kecil, itu akan mempengaruhi pemulihan, disarankan untuk menggunakan buffer elusi yang disediakan dengan kit, Menggunakan air sebagai penyangga elusi akan kehilangan bagian dari DNA. DNA yang diekstraksi harus disimpan pada -20 ℃ dan menghindari siklus beku -cair berulang untuk mencegah degradasi DNA.
- Jika produk mengandung sisa humus, itu akan secara serius mempengaruhi absorbansi DNA, Jadi harus diidentifikasi dengan kombinasi deteksi elektroforesis dan spektrofotometer
- Hindari menyentuh reagen cair, Dalam hal kontak yang tidak disengaja, Bilas dengan banyak air.
Produk-produk terkait
- T1050 5 × TBE Buffer
- T1060 50 × Buffer TAE
- M1400 1KB DNA Ladder
- M1060 D2000 DNA Ladder
- D1010 6 × Buffer Pemuatan DNA
- G8142 Goldview II Pewarnaan Nuklir (5000×)
- D1500 Tanaman Genomik Ekstraksi DNA
- D1600 Bakteri Genomik DNA Extraction Kit
- D1700 Jaringan Hewan/Sel Kit Ekstraksi DNA Genomik D1800 Kit Ekstraksi DNA Genomik Darah (Kolom putaran)
Ulasan
Belum ada ulasan.