Kode Produk: C0030
Spesifikasi: 10ml/50ml
Penyimpanan: Simpan di tempat gelap pada suhu -20°C, berlaku selama satu tahun.
PENDAHULUAN PRODUK:
- Hoechst 33342, juga dikenal sebagai bisBenzimida H 33342 atau HOE33342, adalah pewarna fluoresen biru yang mampu menembus membran sel dengan toksisitas rendah terhadap sel.
- Ini biasanya digunakan untuk mendeteksi apoptosis sel, dan setelah pewarnaan, pengamatan dapat dilakukan dengan menggunakan mikroskop fluoresensi atau flow cytometry.
- Hoechst 33342 juga digunakan untuk pewarnaan nuklir atau pewarnaan DNA rutin. Panjang gelombang eksitasi maksimumnya adalah 346nm, dan panjang gelombang emisi maksimum adalah 460nm. Ketika terikat pada DNA beruntai ganda, panjang gelombang eksitasi bergeser ke 350nm dan panjang gelombang emisi menjadi 461nm.
- Hoechst ini 33342 larutan pewarnaan siap digunakan dan cocok untuk pewarnaan inti sel mati atau sel hidup.
Petunjuk Penggunaan:
Untuk sel atau jaringan tetap:
A. Setelah fiksasi, cuci untuk menghilangkan fiksatifnya. Jika pewarnaan imunofluoresensi diperlukan, lakukan terlebih dahulu sebelum Hoechst 33342 pewarnaan. Jika tidak diperlukan pewarnaan lain, lanjutkan langsung ke Hoechst 33342 pewarnaan.
B. Untuk sel atau bagian jaringan yang melekat, tambahkan sedikit Hoechst 33342 larutan pewarna untuk menutupi sampel. Untuk sel tersuspensi, tambahkan tiga kali volume sampel yang akan diwarnai, campur dengan baik, dan inkubasi pada suhu kamar selama 3-5 menit.
C. Hapus larutan pewarna, dan mencuci 2-3 kali dengan TBST, PBS, atau garam fisiologis untuk 3-5 menit setiap kali.
D. Amati langsung di bawah mikroskop fluoresensi atau setelah kaca objek ditutup. Inti sel apoptosis tampak berwarna pekat atau terfragmentasi.
Untuk sel atau jaringan hidup:
A. Tambahkan Hoechst dalam jumlah yang sesuai 33342 larutan pewarnaan, memastikan cakupan penuh sampel yang akan diwarnai. Menambahkan 1 ml untuk setiap lubang pada pelat enam lubang atau 100μl untuk setiap lubang pada pelat dengan 96 lubang.
B. Inkubasi pada suhu yang sesuai untuk kultur sel 20-30 menit. Buang solusinya, mencuci 2-3 kali dengan PBS atau media kultur, dan kemudian melanjutkan ke deteksi fluoresensi.
Tindakan pencegahan:
Pewarna neon rentan terhadap pendinginan; disarankan menggunakan media pemasangan yang anti luntur. Usahakan untuk menyelesaikan deteksi pada hari yang sama setelah pewarnaan, dan amati sel atau jaringan hidup segera setelah pewarnaan. Demi keselamatan dan kesehatan Anda, harap kenakan pakaian laboratorium dan sarung tangan sekali pakai selama operasi.
Ulasan
Belum ada ulasan.