Kit Uji Aktivitas Pemulungan Radikal Pohon Solarbio ABTS

Ikhtisar Produk

Konten Produk:

Harap pastikan volume reagen sesuai dengan volume larutan di dalam botol sebelum digunakan. Untuk pertanyaan, silakan hubungi bio surya staf dengan segera.

Persiapan Solusi:

1. Reagen II: Sebelum digunakan, menambahkan 3 mL air suling dan larut sepenuhnya. Reagen apa pun yang tidak terpakai dapat disimpan pada suhu -20℃ selama dua minggu.
2. Pembuatan Larutan Kerja Reagen III: Tempatkan cairan dalam tabung EP yang disediakan. Siapkan larutan kerja sesuai perbandingan Reagen III (μL) ke air sulingan (ml) = 1 μL: 12 ml. Reagen yang tidak digunakan harus disimpan pada suhu 4℃.
3. Pembuatan Larutan Kerja Reagen IV: Simpan Reagen IV secara terpisah pada suhu -20℃. Sebelum digunakan, siapkan larutan kerja sesuai dengan jumlah sampel dan perbandingan Reagen V terhadap Reagen I (V: V) = 1:9. Reagen yang tidak terpakai harus disimpan pada suhu -20℃.
4. Reagen V: Tempatkan bedak yang mengandung 5 mg vitamin C dalam tabung EP yang disediakan. Menambahkan 2.8 mL Larutan Ekstrak sebelum digunakan, dan kocok hingga larut. Mempersiapkan a 10 mmol/L larutan vitamin C untuk digunakan sebagai kontrol positif. Simpan pada suhu 4℃ selama satu minggu.
5. Persiapan Solusi Kerja ABTS: Sebelum digunakan, siapkan larutan kerja ABTS sesuai jumlah yang diperlukan untuk pengujian. Proporsi Reagen I: Reagen II: Larutan Kerja Reagen III (V:V:V) = 76:5:4. Siapkan dan simpan di ruangan gelap pada suhu kamar. Gunakan di dalam 30 menit.

Deskripsi Produk:

1. Penilaian Kapasitas Antioksidan: Metode ABTS banyak digunakan untuk menilai kapasitas antioksidan zat hidrofilik dan lipofilik.
2. Pembentukan ABTS Radikal: ABTS teroksidasi membentuk radikal ABTS kation biru-hijau yang stabil dengan puncak serapan pada 405 nm atau 734 nm.
3. Penurunan Absorbansi: Ketika zat uji ditambahkan ke larutan radikal ABTS, komponen antioksidan bereaksi dengannya, menyebabkan penurunan serapan pada 405 nm.
4. Pemulungan Proporsional: Perubahan serapan berbanding lurus dengan derajat penangkapan radikal bebas dalam rentang tertentu.
5. Kuantifikasi Pemulungan: Kit ini mengukur kemampuan sampel untuk mengais radikal ABTS dengan mengukur penurunan serapan.

Catatan: Sebelum pengujian, melakukan eksperimen pendahuluan dengan 2–3 sampel yang menunjukkan perbedaan signifikan yang diperkirakan. Jika serapan sampel berada di luar rentang pengukuran, pertimbangkan untuk mengencerkan atau menambah ukuran sampel untuk pengujian.

Reagen dan Peralatan Diperlukan tetapi Tidak Disediakan:

Pemandian air bersuhu konstan, spektrofotometer, 1 mL kuvet kaca, sentrifugal desktop, mortir/penggiling, kotak pengering, 30~saringan 50 mesh, dan air suling.

Prosedur:

SAYA. Ekstraksi Sampel: (Jumlah sampel dapat disesuaikan, dan mengacu pada literatur untuk proporsi tertentu)

1. Persiapan Sampel Jaringan Tumbuhan: Keringkan sampel segar pada suhu 60℃ hingga berat konstan, haluskan dalam lesung (atau penggiling), dan saring dengan saringan 30~50 mesh. Timbang kira-kira 0.05 g sampel, menambahkan 1 mL Larutan Ekstrak, dan inkubasi dalam penangas air 40℃ selama 30 menit. Sentrifugasi di 10000 rpm untuk 10 menit pada suhu kamar, kumpulkan supernatan dan simpan di es untuk pengujian.
2. Anggur merah, Jus buah, dan Sampel Cairan Lainnya: Mengambil 100 μL larutan sampel dan tambahkan 900 μL Larutan Ekstrak. Campuran pusaran, sentrifugasi pada suhu kamar, 10000 rpm untuk 10 menit, kumpulkan supernatan dan simpan di es untuk pengujian.
3. Ekstraksi atau Obat: Siapkan konsentrasi tertentu dengan Larutan Ekstrak, seperti 5 mg/mL.

Catatan: Kemampuan berbagai sampel untuk mengais radikal bebas ABTS mungkin sangat bervariasi. Untuk memastikan keakuratan, sesuaikan sampel sesuai dengan hasil awal.

II. Langkah Penentuan:

1. Panaskan spektrofotometer selama lebih dari itu 30 menit, atur panjang gelombangnya menjadi 405 nm, dan nol dengan air suling.
2. Persiapan Pengendalian Positif: Mempersiapkan a 10 larutan vitamin C mmol/L dengan Larutan Ekstrak. Untuk hubungan linier, mempersiapkan 1, 0.8, 0.6, 0.4, 0.2, Dan 0.1 mg/mL larutan vitamin C. Untuk kontrol positif dengan tingkat izin sekitar 90%, siapkan larutan vitamin C lebih besar dari 1.5 mmol/L.
3. Tabel Operasional: Tambahkan reagen berikut ke dalam pelat 96 sumur atau tabung EP, masing-masing:

Setelah tercampur rata, menetaskan dalam kegelapan untuk 6 menit pada suhu kamar. Ukur serapannya pada 405 nm. Catat nilai serapan pada tabung kosong, tabung kontrol, tabung kontrol positif, dan tabung reaksi sebagai AB, AC, APC, dan AT masing-masing. Tabung kosong perlu diuji 1-2 waktu.

AKU AKU AKU. Perhitungan Tingkat Pemulungan Radikal Bebas ABTS:

1. Penetapan Kurva Standar: Rumus laju pembasmian radikal bebas dari kontrol positif: Tingkat Pemulungan Radikal Bebas ABTS DVC% = [(AB-APC) − AB] × 100%
2. Rumus Perhitungan Contoh Laju Pemulungan Radikal Bebas: Tingkat Penanggulangan Radikal Bebas ABTS D% = [AB – (DI-AC)] − AB] × 100%.

Catatan:

1. Untuk membandingkan kemampuan pemulungan sampel yang berbeda, disarankan untuk menambahkan volume sampel yang sama ke batch yang sama, menyesuaikan sesuai dengan hasil pra-eksperimental. Selama perbandingan, sesuaikan sampel sesuai dengan hasil, membandingkan tingkat pembersihan pada konsentrasi yang sama (rasio pengenceran).
2. Sampel harus diambil dan diuji pada hari yang sama.

Contoh Eksperimental:

Mengambil 0.05 g cabai dan tambahkan 1 mL Larutan Ekstrak hingga homogen. Setelah sentrifugasi, kumpulkan supernatan dan lanjutkan sesuai langkah penentuan. Hitung tingkat izin: D% = [AB – (DI-AC)] −AB] × 100% = [1.330-(0.468-0.022)]1,330×100% = 66.466%

Produk-produk terkait:

• BC4750/BC4755: Kit Uji Kapasitas Pemulungan Radikal Bebas DPPH
• SM1310/BC1315: Kapasitas Antioksidan Total (T-AOC) Perangkat Pengujian
• BC1320/BC1325: Kit Uji Kapasitas Pemulungan Radikal Hidroksil