Sanshibio Taq Mulai Panas DNA Polimerase

Taq Mulai Panas DNA Polimerase

Nomor Barang：EH001 Spesifikasi：500U/1000U/5000U Storage: Simpan pada suhu -20°C

Perkenalan produk：

This product is an antibody-blocked hot-start enzyme that suppresses non-specific amplification caused by primer misannealing or primer dimer formation at low temperatures. It is suitable for Hot Start PCR. Since the antibody is inactivated during the initial DNA denaturation step of the PCR reaction, there is no need for special deactivation treatment; it can be used under standard PCR conditions. The PCR product amplified using this product has an ‘A’ base added to the 3′ akhir, making it directly clonable into a T-Vector. It can also be cloned into blunt-end vectors after end polishing and phosphorylation.

Isi produk：

Penyimpanan:

Simpan pada suhu -20°C, dengan umur simpan setidaknya 12 bulan.

Definisi Aktivitas:

Menggunakan DNA sperma mahi-mahi teraktivasi sebagai cetakan/primer, kegiatan tersebut didefinisikan sebagai 1 satuan (kamu) dari bahan yang tidak larut dalam asam dimasukkan, dengan mengambil 10 nmol nukleotida di dalamnya 30 menit pada suhu 74°C.

Kontrol Kualitas:

Produk ini telah menjalani pengujian kualitas dan bebas dari aktivitas deoksiribonuklease endonuklease, aktivitas eksonuklease deoksiribonuklease, dan kontaminasi ribonuklease. Konten sisa DNA genom inang ada di bawah 10 salinan.

Kegunaan Produk:

Hot Start PCR; Penentuan urutan DNA.

Petunjuk Penggunaan:

• Allow the required reagents to equilibrate at room temperature until fully dissolved. Aduk rata dengan lembut (jangan pusaran), and use after brief centrifugation to prevent excessive bubble formation and avoid repeated freeze-thaw cycles. If frequently used, simpan pada suhu 4°C. Prepare the PCR reaction mixture according to the following components (siapkan campuran reaksi pada kotak es):

Sistem Reaksi yang Direkomendasikan:

Catatan: Jumlah masing-masing komponen dalam sistem reaksi dapat disesuaikan dengan kebutuhan sebenarnya.

• Umumnya, metode dua langkah dapat digunakan untuk reaksi; jika amplifikasi dua langkah tidak memuaskan, metode tiga langkah dapat digunakan untuk menyiapkan program reaksi PCR.

Catatan: Kondisi reaksi dapat disesuaikan dan dioptimalkan sesuai dengan kebutuhan sebenarnya.

• Setelah reaksi selesai, menganalisis hasil percobaan. Untuk metode analisis terperinci, mengacu pada panduan pengoperasian instrumen amplifikasi PCR.

Tindakan pencegahan:

1. Please choose an appropriate annealing (perpanjangan) suhu berdasarkan desain primer. Khas, nilai Tm primer dirancang sekitar 60°C. Untuk primer dengan suhu anil yang lebih rendah atau untuk memperkuat fragmen yang panjangnya melebihi 200 bp, metode tiga langkah direkomendasikan. The extension time can be adjusted based on the length of the PCR product, GC content, and other factors. The extension time per kb of product is closely related to template complexity. Simple templates use 20 detik, normal templates use 30 detik, and complex templates use 1 menit.
2. The PCR reaction conditions should be set differently based on factors such as template, primer, length of the PCR product, dan konten GC. The final concentration of commonly used primers can be adjusted within the range of 0.2-1.0 μM. The DNA template concentration can also be adjusted based on its concentration. Untuk template yang kompleks atau konten GC tinggi, consider extending the denaturation/annealing or extension times, and increasing denaturation/annealing temperature.
3. Gunakan area khusus dan pipettor sebelum dan sesudah amplifikasi, memakai sarung tangan, dan sering-seringlah mengubahnya. Setelah amplifikasi PCR, jangan membuka tabung reaksi secara langsung. Tempatkan pada suhu 4°C atau -20°C hingga cukup dingin sebelum dibuka untuk meminimalkan risiko kontaminasi produk PCR di lingkungan percobaan.